《高效液相色谱法A》课件.pptx
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1、高效液相色谱法Axx年xx月xx日目录CATALOGUE高效液相色谱法简介高效液相色谱法的仪器设备高效液相色谱法的分离技术高效液相色谱法的样品处理高效液相色谱法的实验设计高效液相色谱法的应用实例01高效液相色谱法简介高效液相色谱法的定义高效液相色谱法(HPLC)是一种分离和检测复杂混合物中各组分的方法,利用不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异进行分离。它结合了经典液相柱色谱和经典薄层色谱的原理,通过高压泵将流动相注入色谱柱,利用各组分在两相间的分配系数差异实现分离。高效液相色谱法基于物质在固定相和流动相之间的分配系数差异进行分离。在高压流动相的推动下,各组分在色谱柱内经过多次分配平衡,实
2、现分离。固定相是色谱柱中的填料,根据不同物质的吸附、分配、键合等作用进行分离。流动相是携带待测组分通过色谱柱的介质,根据各组分在两相间的分配系数差异实现分离。高效液相色谱法的原理高效液相色谱法广泛应用于化学、生物学、医学、环境科学等领域,用于分离和检测各类有机和无机化合物,包括药物、蛋白质、多肽、核酸、糖类等物质。在药物分析中,高效液相色谱法用于药物的分离、纯化、含量测定和质量控制等方面。在食品分析中,高效液相色谱法用于检测食品中的添加剂、农药残留和营养成分等。在环境科学中,高效液相色谱法用于检测水体、土壤和大气中的污染物和有毒物质。高效液相色谱法的应用领域02高效液相色谱法的仪器设备高效液相
3、色谱仪的组成将样品注入色谱柱的装置,要求进样量小、重复性好。用于分离不同组分的核心部件,由固定相和流动相组成。检测色谱柱流出的组分,并将其转化为电信号,以便记录和分析。用于采集、处理、分析和存储色谱数据。进样器色谱柱检测器数据处理系统硅胶柱、氧化铝柱、活性炭柱等。按固定相类型紫外可见光检测器、荧光检测器、电导检测器等。按检测器类型手动操作、半自动操作、全自动操作等。按操作方式高效液相色谱仪的分类注入样品将样品注入进样器,并按照设定的操作参数进行分离分析。样品前处理将样品进行适当处理,以便进行后续分析。设定色谱条件根据样品性质选择合适的固定相、流动相、检测波长等。数据采集与处理通过检测器检测组分
4、,并由数据处理系统采集、处理和分析数据。结果输出将分析结果以图表或数据形式输出,以便进行解释和评价。高效液相色谱仪的操作流程03高效液相色谱法的分离技术选择合适的固定相是实现高效分离的关键,常用的固定相包括硅胶、氧化铝、活性炭等。流动相的选择应根据被分析物质的性质和分离要求进行,常用的流动相有水、甲醇、乙腈等有机溶剂。固定相和流动相的选择流动相固定相123适用于极性物质的分析,如氨基酸、糖类等。正相色谱适用于非极性物质的分析,如脂肪酸、烃类等。反相色谱适用于离子型物质的分析,如蛋白质、核酸等。离子交换色谱分离模式的选择梯度洗脱技术是通过改变流动相的组成或浓度,实现被分析物质在固定相和流动相之间
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