【生物】动物细胞培养课件-2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修三.pptx

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1、随堂练习学习目标01动物细胞培养的条件02动物细胞培养的基本操作过程第第第第2 2 2 2节节节节 动物细胞工程动物细胞工程动物细胞工程动物细胞工程一，动物细胞培养随堂练习通过细胞培养构建的人造皮肤在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。思考：利用他人皮肤面临什么问题？怎样获得大量的自体健康皮肤？能不能用自体皮肤细胞培养出可供的移植皮肤？皮肤干皮肤干细胞培养细胞培养从社会中来从社会中来人体再生术的秘密人造皮肤（视频）随堂练习p动物细胞培养p动物细胞融合p动物细胞核移植p生产单

2、克隆抗体动物细胞工程动物细胞工程的基础地位动物细胞培养动物细胞培养【任务一】阅读课本43页第1-2段，明确动物细胞工程常用的技术有那些？动物细胞培养的地位，概念以及原理？随堂练习从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。动物体组织单个细胞细胞生长和增殖取出分散成适宜条件原理：细胞增殖（有丝分裂）一、动物细胞培养的概念一、动物细胞培养的概念随堂练习二、动物细胞培养的条件二、动物细胞培养的条件【小组任务二】阅读课本43-44页有关动物细胞培养条件的内容和图2-9，明确动物细胞体外培养需要哪些条件？并对每种条件进行详细分析。随堂练习动物细胞培养

3、所需的基本条件营养物质其他条件糖类氨基酸无机盐维生素无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基。含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质（包括激素）为了满足细胞对未知营养成分的需求。培养基的构成：合成培养基+血清等天然成分1)营养二、动物细胞培养的条件二、动物细胞培养的条件除了动物激素之外血清中还含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖等多种营养物质，促除了动物激素之外血清中还含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖等多种营养物质，促细胞生长因子、其他活性物质，能促进细胞的生长和增殖。细胞生长因子、其他活性物质，能促进细胞的生长和增殖。随堂练习糖类氨基酸无机盐

4、维生素无菌、无毒的环境培养液和培养用具：灭菌处理；无菌操作；添加适量抗生素适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境定期更换培养液，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。动物细胞培养所需的基本条件营养物质其他条件二、动物细胞培养的条件二、动物细胞培养的条件2)无菌，无毒随堂练习糖类氨基酸无机盐维生素无菌、无毒的环境培养液和培养用具：灭菌处理；无菌操作；添加适量抗生素适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以为宜；适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为；适宜的渗透压：维持细胞正常的和功能。定期更换培养液，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身

5、造成危害。36.50.57.27.4形态动物细胞培养所需的基本条件营养物质其他条件二、动物细胞培养的条件二、动物细胞培养的条件3)温度、pH、渗透压随堂练习糖类氨基酸无机盐维生素无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境动物细胞培养所需的基本条件营养物质其他条件二、动物细胞培养的条件二、动物细胞培养的条件4)气体环境CO2培养箱松盖培养瓶95%空气+5%CO2的CO2培养箱O2：细胞代谢所必需的（有氧呼吸）维持培养液的pH随堂练习胰蛋白酶原代培养传代培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代单个细胞加培养液三、动物细胞培养的过程三、动物细胞培养的过程【

6、小组任务三】阅读课本44-45页（动物细胞培养过程）有关内容结合图2-12，利用文字和箭头简述动物细胞培养的大致过程。随堂练习动物组织分散成单个细胞机械法机械法或或胰蛋白酶、胰蛋白酶、胶原蛋白酶胶原蛋白酶处理处理1.取什么样的组织？选动物胚胎或幼龄动物的器官或组织选动物胚胎或幼龄动物的器官或组织原因：其细胞生命力旺盛，分化程度低，分裂能力强。原因：其细胞生命力旺盛，分化程度低，分裂能力强。2.为什么要分散成单个细胞？如何分散？说明动物细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶可以吗？胰蛋白酶会不会破坏细胞结构？分散成单个细胞便于从培养液中获得营养，排出代谢废物，利于继续培养。分散成单个细胞便于从培

7、养液中获得营养，排出代谢废物，利于继续培养。蛋白质蛋白质不可以，因为胃蛋白酶的最适不可以，因为胃蛋白酶的最适PHPH为为1.51.5左右左右而多数而多数动物细胞培养的适宜动物细胞培养的适宜pHpH为为7.2-7.47.2-7.4酶的作用时间过长，也会破坏细胞结构酶的作用时间过长，也会破坏细胞结构三、动物细胞培养的过程三、动物细胞培养的过程随堂练习动物组织块分散成单个细胞机械法机械法胰蛋白酶胰蛋白酶胶原蛋白酶处理胶原蛋白酶处理加培养加培养液液细胞悬液u细胞悬液中（体外）培养动物细胞分为两类：悬浮生长细胞贴壁生长细胞三、动物细胞培养的过程三、动物细胞培养的过程悬浮生长（无接触抑制）贴壁生长（具有接

8、触抑制）随堂练习细胞贴壁：细胞贴壁：某些细胞需要贴附于某些基质表面才能增殖，这类细胞往往某些细胞需要贴附于某些基质表面才能增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。贴附在培养瓶的瓶壁上。接触抑制：接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。的现象。细胞贴壁过程贴壁生长与接触抑制圆球形细胞刚开始铺展贴壁生长（100）培养的动物细胞贴壁生长并进行有丝分裂（100）细胞单层贴壁生长铺满瓶壁后出现接触抑制（100）要求：培养瓶或培养瓶或培养皿的内表面培养皿的内表面光滑、无毒、易光滑、无毒、易于贴附于贴附二、动物细胞培养的过程二

9、、动物细胞培养的过程随堂练习思考1：由于接触抑制，正常情况下只能单层细胞思考2：癌细胞；癌细胞的细胞膜上糖蛋白等物质减少正常情况下，动物细胞培养的细胞是单层还是双层？“细胞增殖到互相接触的时候，糖蛋白识别了这种信息，就会使细胞停止继续繁殖，出现接触抑制的现象”试结合上述解释，举例说明哪种细胞无接触抑制现象，并阐述原因。思考与讨论思考与讨论随堂练习动物组织块分散成单个细胞机械法机械法胰蛋白酶胰蛋白酶胶原蛋白酶处理胶原蛋白酶处理加培养液加培养液细胞悬液原代培养传代培养放入培养瓶放入培养瓶在适宜条件中在适宜条件中在适宜条件中在适宜条件中分瓶培养分瓶培养3.什么是原代培养和传代培养？判断依据判断依据：

10、是否分瓶！原代培养：指动物组织经处理后的初次培养。传代培养：分瓶后的细胞培养。二、动物细胞培养的过程二、动物细胞培养的过程随堂练习4.为什么要分瓶进行传代培养？怎样处理？细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等悬浮生长贴壁生长(大多数）接触抑制传代培养悬浮培养的细胞:直接用离心法收集贴壁细胞:用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，再用离心法收集制成细胞悬液，分瓶培养收集细胞细胞分裂受阻加培养液二、动物细胞培养的过程二、动物细胞培养的过程随堂练习部分细胞的细胞核型可能会发生变化，增殖缓慢，甚至完全停止。大部分细胞衰老死亡少数细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这些细胞已经发生了突变，正朝癌细胞

11、发展。1050代继续培养（50代以后）使用或保存的细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型(遗传物质不改变)；遗传物质一定改变了传代培养传代培养随堂练习取动物组织分散成单个细胞解决方法：（收集细胞分瓶传代培养）悬浮生长贴壁生长(大多数）细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等接触抑制细胞悬液培养分瓶培养加培养液在培养皿培养瓶内悬浮培养的细胞收集法:直接用离心法收集贴壁细胞收集法:用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，用离心法收集细胞分裂受阻制成细胞悬液，分瓶培养(培养条件不变）原代培养传代培养动物细胞培养的过程动物细胞培养的过程加培养液用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理随堂练习动物细胞培

12、养动物细胞培养的概念和原理动物细胞培养的条件动物细胞培养的过程原理：细胞的增殖在适当的培养条件下，让细胞生长和增殖的技术(1)营养条件(2)无菌、无毒的环境(3)温度、pH和渗透压(4)气体环境取动物组织单个细胞细胞悬液原代培养传代培养课堂小结随堂练习归纳总结：植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养过程培养结果培养目的相同点获得细胞或细胞产物常用固体培养基完整植株动物血清常用液体培养基细胞增殖植物细胞的全能性获得大量细胞快速繁殖等植物激素培养过程中细胞都进行有丝分裂，不涉及减数分裂；均需无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件。原代培养、传

13、代培养脱分化、再分化随堂练习1.判断下列有关动物细胞培养的表述是否正确。（1）培养环境中需要O2，不需要CO2。（）（2）细胞要经过脱分化形成愈伤组织（）（3）培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清（）（4）培养瓶中的细胞需定期用胰蛋白酶处理,分瓶后才能继续增殖（）2.动物细胞工程技术的基础是（）A.动物细胞培养B.动物细胞融合C.动物细胞核移植技术D.单克隆抗体的制备A随堂练习随堂练习真题再现3治疗大面积烧伤时，可通过细胞培养构建“人造皮肤”进行移植。下列叙述错误的是（）A使用烧伤病人健康皮肤细胞可培养出不产生免疫排斥反应的“皮肤”B用胰蛋白酶处理皮肤组织，目的是使它分散成单个细胞C贴壁生长的皮肤细胞会发生接触抑制现象D传代培养时，贴壁细胞直接用离心法收集，然后再分瓶培养D