赣南地区耐碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌耐药基因检测结果及其耐药性分析.docx

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1、赣南地区耐碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌耐药基因检测结果及其耐药 性分析铜绿假单胞菌是医院感染的重要病毒，也是临床感染的常见方式，在所有医院感染的非发 酵菌中占据第一位。碳青霉烯类抗生素是一类非典型内酰胺类抗生素，其抗菌谱广， 抗菌活性强，安全性高。由于临床治疗中碳青霉烯类抗生素的不规范使用，加剧了其耐药 性的发生，给临床治疗带来了很大的困扰1数据和方法1.1 耐碳青霉烯类药物的分离纯化抽取2017年8月一2018年8月间赣南地区4所综合性医院中分离出的耐碳青霉烯类药物 的铜绿假单胞菌80株，其中痰标本中分离出49株，分泌物中分离出10株，支气管肺泡 灌洗液中分离出21株。质控菌株采用大肠埃希菌（

2、ATCC25922）。1.2 抗菌药物的耐药情况应用K-B法对纳入菌株开展药敏试验，测定纳入菌株对亚胺培南、庆大霉素、阿米卡星、 美罗培南、哌拉西林、头抱他咤、妥布霉素、替卡西林、头抱吐月亏、复方磺胺甲嗯唾、多 粘菌素E、环丙沙星等12种抗菌药物的耐药情况。测定结果的判别，参考美国临床和实验 室标准协会标准（CLSI） o1.3 耐药基因的构建应用聚合酶链式反应（PCR）法检测耐药菌株中的编码碳青霉烯酶（NMD、IMP、KPC、VIM. SPM、GIM）以及超广谱B-内酰胺酶的耐药基因。其检测结果与GenBank序列（BLAST）进 行比较分析，并鉴定耐碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌的耐药基因类型

3、。1.4 统计方法采用SPSS 17.0版统计学软件分析，数据资料采用均值土标准误2结果2. 1携带碳青霉烯酶基因检测经基因检测结果显示，80株耐碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌中，来自痰标本49株、分泌 物10株和支气管肺泡灌洗液21株。其中，69株检测出携带碳青霉烯酶基因，其检出率为 86. 25%,其中NMD型17株、IMP型31株、KPC型9株、VIM型12株；另有NMD型合并IMP型1株。80株耐碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌的基因中，膜孔蛋白基因OprD2全部缺 失，除69株检出携带碳青霉烯酶基因外，其余11株均未检出SPM型金属酶和GIM型金属 酶。碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌耐药基因检测结

4、果，见表1。2.2阿米卡星、复方酰胺甲喳80株耐碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素、庆大霉素、妥布霉素、替卡西 林、复方磺胺甲嗯喋具有较高的耐药性，其耐药率265%；而其对亚胺培南、阿米卡星、 美罗培南、哌拉西林、头抱他咤、头抱吐月亏、多粘菌素E、环丙沙星的耐药性均较低（分 为耐药、中介、敏感）。耐碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药性，见表2。3耐碳青霉烯类药物的耐药基因铜绿假单胞菌为革兰阴性杆菌，广泛分布在土壤、水、空气等自然中，也存在于正常人的 皮肤、呼吸道和肠道中，是造成医院感染的重要致病菌。由于临床治疗中碳青霉烯类抗生 素的不合理使用，不仅增加了该药的耐药株，而且也导

5、致铜绿假单胞菌逐渐演变为多重耐 药菌株有研究报道外膜孔蛋白基因0prD2是碳青霉烯类药物进入机体的重要通道，外膜孔蛋白基因0prD2缺 失导致药物不能进入细菌的体内，因此产生耐药性。本文的研究结果显示，所纳入的80株铜绿假单胞菌均有外膜孔蛋白基因0prD2缺失的情 况。碳青霉烯酶是能够水解碳青霉烯类药物的内酰胺酶，它有A、B、D类3种，其中类金属镁是铜绿假单胞菌耐青霉烯类药物的重要内酰胺酶，能够通过质粒、染色体 以及转座子介导。本文的调查研究显示，80株耐碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌菌株中，69 株检测出携带碳青霉烯酶基因（NMD酶、IMP酶、KPC酶、VIM酶）是引起铜绿假单胞菌对 碳青霉烯类抗生素产生耐药的重要原因。因此，不同地区对耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的 耐药性及耐药基因进行研究，分析其耐药机制，对指导临床科学用药和控制院内感染具有 重大的临床意义。研究结果表明，耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的耐药基因主要为NMD酶、IMP酶、KPC酶、 VIM酶，临床应根据不同耐药基因合理使用抗菌药物，以确保患者用药的合理、安全性。