冰冻切片技术原理 .ppt
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1、冷冻切片制作技术一、冷冻切片的意义二、恒温冷冻切片机的结构与功能三、冷冻切片组织的取材四、冷冻切片的制作方法五、冷冻切片的固定和染色六、冷冻切片的标准及染色的注意事项七、冷冻切片机的使用注意事项及日常维护一、冷冻切片的意义1.快速诊断快速诊断:冷冻切片可称之为病理科的急诊工作急诊工作,常用于临床手术科室快速组织学诊断,特别是在手术进行当手术进行当中中取出病变组织,要求病理医师在很短的时间内做出良、恶性的正确的诊断,为临床医师下一步的手术方案及治疗提供指导。2.显示组织中脂质 脂肪染色和神经组织髓鞘的染色等3.显示酶活性 主要应用于肌肉活检的检查4.免疫荧光的研究二、恒温冷冻切片机的结构与功能1
2、.结构:恒温冷冻切片机主要由冷箱体及切片机构成,具有快速双重制冷、自动除霜、自动消毒、负压等功能。2.功能:利用物理降温的方法将新鲜组织标本冷冻使其产生一定的硬度进行切片,与石蜡切片相比,冷冻切片不需要脱水处理,因此制片速度快,是为术中提供快速病理诊断的良好方法。LEICA CM1850三、冷冻切片组织的取材1.标本必须新鲜无固定,无液体浸泡;2.组织块大小厚薄适宜;3.组织块未受挤压;4.尽量保持组织的原有形态;5.选择好组织切面;6.保持组织的清洁;7.切除不需要的部分,遇有脂肪组织要剔除;8.组织内有异物一定要清除。四、冷冻切片的制作方法冷冻切片的重要环节是温度。冷冻切片的重要环节是温度
3、。1.冷冻前将恒温冷冻切片机的速冻头温度和箱内温度调整到适宜的切片温度,一般情况下为-25-18。2.在标本托上涂一层冷冻包埋剂OCT,然后将取材后的新鲜标本安放在标本冷冻托上并用OCT包埋剂覆盖标本。3.组织较小或较薄,可先将OCT滴加在标本托上,冻成一个小冷台,将组织放在小冷台上,再覆盖OCT冷冻,并用冷冻锤轻轻压平。4.标本冷冻完成后将标本托固定在切片机的机头上,调整机头的位置使其恰好位于切片刀的后方。四、冷冻切片的制作方法5.以粗切削的方式进行标本的粗切削至暴露标本的最大平面,用毛笔清除机头、标本托及刀片上的组织碎屑。毛笔清除机头、标本托及刀片上的组织碎屑。6.确认切片的厚度,一般61
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