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1、临床生物化学绪论临床生物化学绪论高科技在检验医学中的应用促进了临床检高科技在检验医学中的应用促进了临床检验学术水平的提高,使临床医学迅速发展验学术水平的提高,使临床医学迅速发展新实验、新方法、新的实验参数,为临床新实验、新方法、新的实验参数,为临床疾病的诊断、治疗、预防及预后的分析提疾病的诊断、治疗、预防及预后的分析提供了重要指标。供了重要指标。影像学诊断影像学诊断临床诊断临床诊断 细胞学诊断细胞学诊断 实验室诊断实验室诊断早期早期我国综合性医院检验科检测项目分为:我国综合性医院检验科检测项目分为:生化检验:重要地位;生化检验:重要地位;项目多、项目多、信息多、信息多、自动化程度高。自动化程度
2、高。临床检验:三大常规检测临床检验:三大常规检测细菌检验细菌检验免疫学检验免疫学检验血液学检验血液学检验分子诊断学检验分子诊断学检验一、临床生物化学的含义一、临床生物化学的含义(Clinical Biochemistry)生物化学生物化学+临床医学临床医学 临床生临床生物化学物化学 利用生物化学的利用生物化学的 理论与技术理论与技术研究研究人体疾病状态下的人体疾病状态下的 生化改变的机理、体液生化改变的机理、体液中生化组分的质与量的变化中生化组分的质与量的变化为疾病的诊为疾病的诊断、治疗、病情监测、药物疗效、预后及断、治疗、病情监测、药物疗效、预后及疾病的预防提供信息和决策依据的一门学疾病的预
3、防提供信息和决策依据的一门学科。科。二、临床生物化学的特点二、临床生物化学的特点理论性、实践性强:说明疾病发生机理、理论性、实践性强:说明疾病发生机理、开开发新的检测技术发新的检测技术边缘性、应用性学科(交叉学科):与多边缘性、应用性学科(交叉学科):与多种学科和技术有密切联系。种学科和技术有密切联系。生物学、物理学、数学、生理学、药理学、生物学、物理学、数学、生理学、药理学、病理生理学、毒理学病理生理学、毒理学基础学科基础学科生物化学、免疫学、血液学、输血学、遗生物化学、免疫学、血液学、输血学、遗传学、微生物学、分子生物学传学、微生物学、分子生物学专业学科。专业学科。仪器学、电子技术、计算机
4、技术、免疫学仪器学、电子技术、计算机技术、免疫学技术、生化技术、及分子生物学技术技术、生化技术、及分子生物学技术技技术应用。术应用。三、临床生物化学的发展三、临床生物化学的发展临床生物化学临床生物化学一门年轻正在发展的学科一门年轻正在发展的学科1918年:年:“临床生物学临床生物学”专著专著1931年出版了年出版了“临床生物学临床生物学”教科书教科书标志临床生物化学的初步形成。标志临床生物化学的初步形成。20世纪四十年代:蛋白质、氨基酸、营养世纪四十年代:蛋白质、氨基酸、营养与健康、酶学等方面与健康、酶学等方面进行了研究,并取进行了研究,并取得了较大成果。得了较大成果。20世纪世纪50年代年代
5、分子生物学的研究。分子生物学的研究。生物化学技术的发展:生物化学技术的发展:肉眼观察:肉眼观察:3000年前年前中国:记载中国:记载“泡沫尿泡沫尿”竹条搅动尿液竹条搅动尿液泡泡沫沫 出现出现说明尿液有蛋白说明尿液有蛋白诊断疾诊断疾病。病。埃及:(公元前埃及:(公元前500年)年)尿液倒在干沙上尿液倒在干沙上数蚂蚁数目数蚂蚁数目尿糖尿糖18世纪后期世纪后期体液分析体液分析 重量法及容量法重量法及容量法分析体液的血糖、尿分析体液的血糖、尿素、电解质。素、电解质。缺点:耗时、耗料、方法繁琐、灵敏度低缺点:耗时、耗料、方法繁琐、灵敏度低20世纪世纪50年代:比色分析技术年代:比色分析技术使生化使生化检
6、验发生根本性改观。检验发生根本性改观。测定物测定物+试剂试剂 显色显色 比色比色 可见光:可见光:400nm700nm波长波长光度法:紫外分析技术光度法:紫外分析技术 蛋白质蛋白质 定性、定量定性、定量 核酸核酸 定性、定量定性、定量280nm260nm形成:光谱分析技术形成:光谱分析技术发射光谱、吸收光发射光谱、吸收光 谱、散色光谱。谱、散色光谱。准确度:血糖、血脂、酶类、尿素、尿酸、准确度:血糖、血脂、酶类、尿素、尿酸、肌酐等等。肌酐等等。电化学分析技术:离子选择电极电化学分析技术:离子选择电极分析分析 电解质。电解质。电泳技术:薄层电泳、凝胶电泳、等电聚电泳技术:薄层电泳、凝胶电泳、等电
7、聚 焦电泳、转移电泳、焦电泳、转移电泳、毛细管电毛细管电 泳。泳。层析技术:离子交换层析、凝胶层析、亲层析技术:离子交换层析、凝胶层析、亲 和层析、高效液相和层析、高效液相层析。气相层析。气相 层析。层析。离心技术:差速离心法、密度梯度离心法。离心技术:差速离心法、密度梯度离心法。同位素技术同位素技术放射性:检验微量成分。放射性:检验微量成分。免疫技术:免疫电泳法、免疫扩散法、免免疫技术:免疫电泳法、免疫扩散法、免 疫沉淀法、酶免疫疫沉淀法、酶免疫法。法。酶试剂法:提供了更可靠更灵敏的检测分酶试剂法:提供了更可靠更灵敏的检测分 析技术。析技术。分子生物学技术分子生物学技术基因诊断基因诊断 分子
8、杂交技术、分子杂交技术、PCR技术、技术、RFLP技术、技术、DNA序列分析技术等。序列分析技术等。自动化分析仪的应用自动化分析仪的应用20世纪后期世纪后期:计算机技术的应用计算机技术的应用全自动生化全自动生化 分析仪的产生将取样、分析仪的产生将取样、加试剂、加试剂、去干扰物、混合、保去干扰物、混合、保温反应、检温反应、检 测数据处理、打印、测数据处理、打印、清洗等步骤清洗等步骤 通过仪器完成。通过仪器完成。特点:快速、简便、灵敏、准确、标准化、特点:快速、简便、灵敏、准确、标准化、微量化。微量化。第一代:流动式自动生化分析仪第一代:流动式自动生化分析仪第二代:分立式自动生化分析仪第二代:分立
9、式自动生化分析仪第三代:离心式自动生化分析仪第三代:离心式自动生化分析仪例如:例如:COBAS 800型全自动多功能生化分析型全自动多功能生化分析 系统。系统。检测速度检测速度:855测试测试/小时小时同时测定同时测定72相相标本用量标本用量:210微升微升/测试测试标本类型:血清、血浆、尿、脑脊液、溶血标本类型:血清、血浆、尿、脑脊液、溶血 物、全血。物、全血。分析方法:分析方法:4种种分光光度法分光光度法酶类、底物类酶类、底物类透射比浊法透射比浊法特种蛋白、滥用药物特种蛋白、滥用药物荧光偏振法荧光偏振法治疗药物检测、甲状腺功能治疗药物检测、甲状腺功能 检测检测离子选择电极法离子选择电极法钠
10、、钾、氯、锂离子。钠、钾、氯、锂离子。目前检验科用:目标式、一体化分析系统目前检验科用:目标式、一体化分析系统 将临床化学及免疫化学检测项目结将临床化学及免疫化学检测项目结合于合于 一个模块平台进行检测。一个模块平台进行检测。临床化学模块临床化学模块 样本:血清、血浆、尿、脑脊液、溶血样本:血清、血浆、尿、脑脊液、溶血物、物、全血。全血。检测能力:检测能力:10002000项次项次/小时小时同时上机项目:同时上机项目:60120个个免疫模块:免疫模块:检测能力:检测能力:170340项次项次/小时小时同时上机项目:同时上机项目:2550个项目个项目 检测项目:检测项目:750个免疫项目个免疫项
11、目四、研究领域四、研究领域阐述疾病的生化基础阐述疾病的生化基础了解疾病的发生了解疾病的发生机理。机理。例如:例如:糖尿病及其代谢紊乱糖尿病及其代谢紊乱 疾病时血浆蛋白质变化疾病时血浆蛋白质变化 高脂血症高脂血症 肝脏疾病的生化改变肝脏疾病的生化改变化学病理学(化学病理学(Chemical Pathology)研究基因与疾病的防治研究基因与疾病的防治基因突变基因突变疾病发生疾病发生美、英、中、俄、法等美、英、中、俄、法等6国完成的(国完成的(2001年)年)人类基因组计划(人类基因组计划(HGP):3.5万基因的核万基因的核苷酸序列测定使人类进入基因王国苷酸序列测定使人类进入基因王国对遗对遗传与
12、疾病的相关性研究开辟一条通道传与疾病的相关性研究开辟一条通道更更深入了解人类疾病的分子生物学基础深入了解人类疾病的分子生物学基础形形成基因诊断技术。成基因诊断技术。功能基因组学功能基因组学深入研究各基因的功能深入研究各基因的功能蛋白质组学蛋白质组学基因表达产物的研究基因表达产物的研究探讨生化检测的临床意义、指标的选择及探讨生化检测的临床意义、指标的选择及评价评价诊断化学:诊断化学:(Diagnostic Clinical Chemistry)例如:例如:血清酶学检测血清酶学检测 心肌疾病的生化标志物检测心肌疾病的生化标志物检测 肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测 常规生化检测:常规生化检测:肝功能、
13、肾功能、血糖、血脂等。肝功能、肾功能、血糖、血脂等。急诊生化检测:检测结果需迅速回收急诊生化检测:检测结果需迅速回收 血糖、血糖、尿素、电解质、尿素、电解质、酶、血酶、血气分析、心肌标气分析、心肌标 志物。志物。特殊生化检测:毒物检测、激素检测、特殊生化检测:毒物检测、激素检测、治疗药治疗药物检测、物检测、DNA分分 析、羊析、羊水分析水分析床旁生化检测:急诊室、监护室、手术室、床旁生化检测:急诊室、监护室、手术室、事故现场、事故现场、农村等农村等微量、小型仪器,现场操作微量、小型仪器,现场操作快捷、方便。快捷、方便。对各种检测方法进行评价对各种检测方法进行评价对检测项目进行检测对检测项目进行
14、检测对检测结果进行分析对检测结果进行分析五、影响生化检测结果的生物学五、影响生化检测结果的生物学因素因素生理因素生理因素 年龄:新生儿:年龄:新生儿:HBF(主)胎儿型(主)胎儿型 胆红素胆红素浓度浓度 青春期:青春期:ALP活性活性 成年期:生化指标稳定成年期:生化指标稳定 老年期:胰岛素对糖反老年期:胰岛素对糖反应应,血,血 尿素尿素 性别:醇脘性别:醇脘H酶活性:女性酶活性:女性男性男性妊娠:妊娠:AFP运动:运动:LDH、CK食物食物饮酒:饮酒:TG,-GT,AST餐后:血餐后:血G,钾离子,钾离子,TG,ALP药物:药物:利尿药:血钾利尿药:血钾避孕药:避孕药:Ch,ALT,转氨酶,
15、转氨酶,TG吸毒:淀粉酶吸毒:淀粉酶,ALP,胆红素,胆红素,血钾血钾,尿素,尿素标本保存不妥标本保存不妥血清、血浆保存中:血清、血浆保存中:ACP失活、血氨失活、血氨、血、血P冰冻六个月:冰冻六个月:ALP、血、血G、氮含量明显改变、氮含量明显改变不稳定血清(血浆)成分保存法不稳定血清(血浆)成分保存法 成分成分 保存法保存法 氨氨 採血后直接冰冻(几採血后直接冰冻(几小时到小时到1天)天)尿素尿素 4(3天),冷冻(数天),冷冻(数月)月)胆红素胆红素 避光,避光,4(数月),冷(数月),冷冻(冻(1月)月)酮体酮体 冷冻(数月)冷冻(数月)G NaF抗凝剂,全血抗凝剂,全血4(2周)周)
16、ChE 4(1周),冷冻(周),冷冻(2周)周)ALP 迅速分离,迅速分离,4(1周),不可冷周),不可冷冻冻 ACP 迅速分离,迅速分离,4(1周),隔绝空周),隔绝空气气 CK 4(数日),冷冻(数日),冷冻(2周)周)LD 室温,不可冰箱保存室温,不可冰箱保存 干扰物干扰物内源性干扰物:内源性干扰物:Hb,胆红素,脂类,异物,胆红素,脂类,异物 蛋白蛋白溶血:溶血:溶血溶血稀释出稀释出Hb340nm吸收峰吸收峰直接干直接干扰胆红素结果。扰胆红素结果。溶血溶血红细胞内成分释放红细胞内成分释放影响结果影响结果RBC:LD,钾离子,镁离子弄故分别比血浆高钾离子,镁离子弄故分别比血浆高 160倍
17、、倍、22倍、倍、3倍。倍。RBC与血浆(血清)某些物质浓度差异与血浆(血清)某些物质浓度差异 生化成分生化成分 RBC 血浆(血清)血浆(血清)RBC/血浆血浆精氨酸酶(精氨酸酶(U/L 37)61201428 3.9(0.87.9)1569.2MDH(U/L 25)300223714 160(80310)187.6LD(U/L 37)680009010 208378 179.9AST(U/L 25)42592 11.1 38.3CK(U/L 25)124153 80 15.5钾离子(钾离子(mmol/L)88(76100)4.4(3.55.5)20.0肌酸(肌酸(mol/L)618.0 3
18、14.3 18.0脂血:干扰血脂血:干扰血G、TG、P、总胆红素、尿、总胆红素、尿 酸、酸、TP、纳离子测定。、纳离子测定。黄疸:干扰血黄疸:干扰血G、尿酸、尿酸、Ch、TG测定。测定。外源性干扰物外源性干扰物药物、添加剂、实验材料等药物、添加剂、实验材料等抗凝剂:草酸盐、柠檬酸盐、抗凝剂:草酸盐、柠檬酸盐、EDTA钙离子钙离子 抑制淀粉酶、抑制淀粉酶、CK、5羟色氨羟色氨六、生化学检验的任务六、生化学检验的任务检验人员素质的提高检验人员素质的提高 对检测质量保证的认识对检测质量保证的认识 对检测结果分析能力的提高对检测结果分析能力的提高信息化管理信息化管理网络化网络化 设置实验室信息系统,进
19、行实验数据储设置实验室信息系统,进行实验数据储 存,处理及管理。存,处理及管理。临床对话:与临床医师交流,参加病案讨临床对话:与临床医师交流,参加病案讨 论,提供检测项目论,提供检测项目的选择。的选择。研究开发:新技术新项目的开发;研究开发:新技术新项目的开发;配套实验正确组合,配套实验正确组合,进行科研进行科研 项目的申报及研究。项目的申报及研究。人才培养:培养硕士、博士研究生,定期人才培养:培养硕士、博士研究生,定期 进行学术交流。进行学术交流。七、参考资料七、参考资料中文:中文:中华检验医学杂志中华检验医学杂志 国际检验医学杂志国际检验医学杂志 中国检验医学杂志中国检验医学杂志外文:外文:Tietz Textbook of clinical Chemistry and Molecular.Clinical Chemistry(美国)(美国)Annuals of clinical Biochemistry(英国)(英国)Clinical Chemistry Acta(荷兰)(荷兰)Clincal Chemistry Review (加拿大)(加拿大)43Thank you!
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