药理学实验课 .ppt

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1、药理学实验课药理学实验课 药理教研室药理教研室药学专业实验课程安排药学专业实验课程安排实验课程安排实验课程安排共共18学时学时（1）实验基本技能）实验基本技能（2）不同给药途径对药物的影响）不同给药途径对药物的影响（4）药物对家兔离体肠平滑肌的）药物对家兔离体肠平滑肌的作用作用（5）吗啡镇痛实验）吗啡镇痛实验（3）药物抗炎实验）药物抗炎实验足肿胀法耳片法热板法扭体法临床医学（本）实验课程临床医学（本）实验课程实验课程安排实验课程安排共共27学时学时（1）实验基本技能）实验基本技能（2）不同给药途径对药物的）不同给药途径对药物的 影响影响（5）药物对家兔离体肠平滑肌的作用）药物对家兔离体肠平滑肌

2、的作用（7）药物对肠推进实验的影响）药物对肠推进实验的影响（4）吗啡镇痛实验）吗啡镇痛实验（3）药物抗炎实验）药物抗炎实验（8）药物对家兔心电图的影响）药物对家兔心电图的影响（6）药物对家兔动脉血压的影响）药物对家兔动脉血压的影响实验课程学习要求实验课程学习要求实验前实验前实验中实验中实验后实验后1.1.预习实验指导，预习实验指导，明确实验目的和明确实验目的和要求，充分了解要求，充分了解实验方法实验方法 2.2.进入实验室，进入实验室，必须穿白大衣必须穿白大衣.3.3.检查实验器材检查实验器材 1.1.根据实验内容根据实验内容进行小组内分工进行小组内分工 2.2.严格、准确地严格、准确地按照指

3、导中的实按照指导中的实验方法进行实验验方法进行实验操作。操作。3.3.仔细、真实的仔细、真实的记录实验结果。记录实验结果。1.1.死亡动物放在死亡动物放在指定地点；存活指定地点；存活动物放入笼内。动物放入笼内。2.2.将器材洗净擦将器材洗净擦干，放回原处干，放回原处3.3.每小组轮流负每小组轮流负责搞好实验室内责搞好实验室内卫生卫生 。u实验课程学习目的实验课程学习目的DDBBC CAA巩固药理学基本理论巩固药理学基本理论学习基本的实验方法学习基本的实验方法培养实事求是的学习作风培养实事求是的学习作风培养动手能力、科研能力培养动手能力、科研能力药理学实验药理学实验一、基本实验操作一、基本实验操

4、作看短片看短片实验报告标题实验目的：实验原理：实验器材：实验方法：结果：讨论：结论：二、不同给药途径对二、不同给药途径对 药物的影响药物的影响实验目的：掌握小鼠给药的基本方法。实验目的：掌握小鼠给药的基本方法。比较不同给药途径药物起效的时比较不同给药途径药物起效的时 间快慢间快慢实验原理：不同的给药途径药物吸收不同实验原理：不同的给药途径药物吸收不同实验目的及原理实验目的及原理1实验动物：小鼠实验动物：小鼠实验器材：实验器材：0.4%戊巴比妥钠、戊巴比妥钠、1ml注射器、注射器、1ml灌胃器。灌胃器。主要实验材料主要实验材料2 取取6只小鼠，称重、分组只小鼠，称重、分组、标记标记 给给0.4戊

5、巴比妥钠戊巴比妥钠（腹腔、皮下、灌胃）（腹腔、皮下、灌胃）（0.1ml/10g）观察小鼠翻正反射消失及恢复的时间观察小鼠翻正反射消失及恢复的时间 分析、比较实验结果分析、比较实验结果3主要实验过程（二）主要实验过程（二）计时计时 （1）注意给药途径的正确操作。）注意给药途径的正确操作。（2）注意小鼠翻正反射消失时间判定）注意小鼠翻正反射消失时间判定 （1min）。）。实验注意事项实验注意事项4影响药物起效的影响药物起效的因素有哪些？因素有哪些？请分析本次实验请分析本次实验中，那些因素可中，那些因素可影响实验结果。影响实验结果。问题与思考问题与思考？仔细观察记录实验仔细观察记录实验结果，结合药理

6、学结果，结合药理学总论知识思考，何总论知识思考，何种给药途径起效最种给药途径起效最快。为什么？快。为什么？药理学实验药理学实验 二、抗炎实验二、抗炎实验 1 1、大鼠足肿胀法、大鼠足肿胀法 2 2、小鼠耳片法、小鼠耳片法 1 1、大鼠足肿胀法、大鼠足肿胀法1.1 实验目的：实验目的：l学习利用鸡蛋清制急性炎症动物模型方法。l观察糖皮质激素的抗炎作用。1.2 实验原理：实验原理：u鸡蛋清为异性蛋白，可致动物急性炎症，出现局部肿胀，容积增加。比较給药组与对照组动物局部容积的变化，从而观察到药物的抗炎作用。实验目的及原理实验目的及原理1和 实验动物：大鼠实验动物：大鼠（雄性雄性）实验药物：实验药物：

7、0.5%氢化可的松、氢化可的松、10%鸡蛋清、鸡蛋清、生理盐水生理盐水 主要仪器：（主要仪器：（PV-200足趾肿胀测定仪足趾肿胀测定仪）主要实验材料主要实验材料 大鼠两只：称重、标记大鼠两只：称重、标记 甲、乙二鼠右踝关节的突起点处用笔划线作为测甲、乙二鼠右踝关节的突起点处用笔划线作为测量标志，测定大鼠正常足容积量标志，测定大鼠正常足容积(见后图见后图)动物动物 给药给药30min，从右后足掌心向掌跖关节方向进从右后足掌心向掌跖关节方向进针，皮下注射针，皮下注射10%新鲜蛋清新鲜蛋清0.1ml。(见后图)注射蛋清后注射蛋清后15min、30 min、45min、，测量右后足的体积，记录、，测

8、量右后足的体积，记录数据。数据。计算肿胀率计算肿胀率=（药后药后-药前体积）药前体积）/药前体积药前体积100%实验主要步骤（大鼠足肿胀）实验主要步骤（大鼠足肿胀）甲（给药组）：腹腔注射甲（给药组）：腹腔注射0.5%氢化可的松溶液氢化可的松溶液 0.3ml/100g体重体重乙（对照组）：腹腔注射生理盐水乙（对照组）：腹腔注射生理盐水0.3ml/100g体重体重计计时时皮下注射新鲜蛋清皮下注射新鲜蛋清抗炎实验中动物性别的选择：抗炎实验中动物性别的选择：雄性雄性测定大鼠足体积时，选定测定大鼠足体积时，选定统一测量位置统一测量位置（大鼠足（大鼠足外踝关节突起）外踝关节突起）注意测量时别把鼠足插得过深

9、，避免测量杯中水注意测量时别把鼠足插得过深，避免测量杯中水溢出，影响准确性。溢出，影响准确性。大鼠捉拿时别捉得过紧，避免其窒息死亡。大鼠捉拿时别捉得过紧，避免其窒息死亡。鸡蛋清现配现用。鸡蛋清现配现用。实验注意事项实验注意事项2、小鼠耳片法2.1 实验目的：实验目的：l学习利用化学药物刺激制急性炎症动物模型方法。l观察糖皮质激素的抗炎作用。2.2 实验原理：实验原理：u化学刺激物，可致动物急性炎症，出现局部肿胀，重量改变，比较給予药物前后动物局部肿胀程度的变化从而观察到药物的抗炎作用。实验目的及原理实验目的及原理和 实验动物：小鼠实验动物：小鼠（雄性雄性）实验药物：实验药物：0.1%地塞米松、

10、二甲苯、地塞米松、二甲苯、生理盐水生理盐水 主要仪器：主要仪器：分析天平、打孔器、手术剪等分析天平、打孔器、手术剪等2主要实验材料主要实验材料 小鼠小鼠4只，称重、标记只，称重、标记 四只分二组四只分二组 30min后用二甲苯后用二甲苯0.05ml均匀涂抹每只鼠均匀涂抹每只鼠的右耳的右耳涂抹涂抹45min后小鼠脱臼处死，分别用打孔器取相同后小鼠脱臼处死，分别用打孔器取相同部位左右耳片，电子天平称重。计算：部位左右耳片，电子天平称重。计算：右耳右耳-左耳左耳=肿胀度；肿胀度；肿胀率肿胀率=（右耳右耳-左耳）左耳）/左耳左耳100%给药组：腹腔注射给药组：腹腔注射0.1地塞米松地塞米松 0.1ml

11、/10g体重体重对照组：腹腔注射生理盐水对照组：腹腔注射生理盐水0.1ml/10g体重体重3主要实验步骤主要实验步骤（小鼠耳肿胀小鼠耳肿胀）计计时时白白左左右右头头左左右右背背左左右右尾尾左左右右抗炎实验中动物性别的选择：抗炎实验中动物性别的选择：雄性雄性小鼠耳廓滴加二甲苯时，正反面均匀涂抹。避免小鼠耳廓滴加二甲苯时，正反面均匀涂抹。避免滴入耳廓内。滴入耳廓内。小鼠左右耳小鼠左右耳打耳片位置统一打耳片位置统一（耳廓中间部位）。（耳廓中间部位）。使用打孔器注意：使用打孔器注意：1、安全；、安全；2、别打硬物。、别打硬物。注意时间合理分配。注意时间合理分配。实验注意事项实验注意事项4炎症的表现炎症

12、的表现以及炎症的以及炎症的类型有哪些类型有哪些？问题与思考问题与思考？本实验中选本实验中选择雄性动物择雄性动物的原因？的原因？药理学实验药理学实验四、四、药物对家兔离体肠平滑肌的作用药物对家兔离体肠平滑肌的作用药物对家兔离体肠平滑肌的作用药物对家兔离体肠平滑肌的作用浴槽实验前准备浴槽实验前准备(预热）：预热）：1、领取器材、领取器材2、浴槽内加水、浴槽内加水3、测定筒内加液、测定筒内加液4、接通电源、接通电源5、按压温度调节旋钮、按压温度调节旋钮6、调温为、调温为371.1 实验目的：实验目的：学习离体平滑肌器官的实验方法。观察拟胆碱药和抗胆碱药对离体家兔肠平滑肌的作用。1.2 实验原理：实验

13、原理：u乙酰胆碱通过激动M受体兴奋胃肠平滑肌；阿托平可阻断M受体；氯化钡直接兴奋胃肠平滑肌。实验目的及原理实验目的及原理1和 实验动物：家兔实验动物：家兔 实验药物：乙酰胆碱溶液（实验药物：乙酰胆碱溶液（1/10万）、万）、0.1%硫酸阿托品溶液、硫酸阿托品溶液、1%氯化钡溶液氯化钡溶液 实验试剂：台氏液实验试剂：台氏液 主要仪器：离体平滑肌槽（浴槽）主要仪器：离体平滑肌槽（浴槽）2主要实验材料主要实验材料 在浴槽（大试管）中，加入台氏液在浴槽（大试管）中，加入台氏液70ml（标（标线处），加热，维持水线处），加热，维持水370.5。实验主要步骤实验主要步骤3安装离体实验装置安装离体实验装置实

14、验主要步骤实验主要步骤3安装离体实验装置安装离体实验装置换能器插入第一通道换能器插入第一通道斜角在上斜角在上 取家兔一只，颈椎脱臼处死。取家兔一只，颈椎脱臼处死。立即打开腹腔，找到幽门部，分离十二指肠，以立即打开腹腔，找到幽门部，分离十二指肠，以2cm左右穿左右穿线，分段结扎，剪取肠段（一只兔取三段）。线，分段结扎，剪取肠段（一只兔取三段）。每组取一肠段，在上下结扎线内侧边缘各剪一小口。肠段贯通。每组取一肠段，在上下结扎线内侧边缘各剪一小口。肠段贯通。实验主要步骤实验主要步骤3离体肠肌的制备离体肠肌的制备 将肠段，一端连结通气钩，置测定管（麦氏浴槽）中。另一将肠段，一端连结通气钩，置测定管（麦

15、氏浴槽）中。另一端连结张力换能器弹簧片上。上下调节双凹夹，控制张力的大小。端连结张力换能器弹簧片上。上下调节双凹夹，控制张力的大小。实验主要步骤实验主要步骤3离体肠肌连接及记录离体肠肌连接及记录 打开气量调节旋钮，让气泡缓慢通入，打开气量调节旋钮，让气泡缓慢通入，1-2个气泡个气泡/秒即可。秒即可。打开电脑，点击桌面中打开电脑，点击桌面中BL-420图标，进入主菜单，点击工具图标，进入主菜单，点击工具栏上的栏上的“实验项目实验项目”，消化道实验，消化道实验，消化道平滑肌生理消化道平滑肌生理特性（特性（2）双击双击正常曲线正常曲线乙酰胆碱乙酰胆碱阿托品阿托品乙酰胆碱乙酰胆碱1.肠管肠管稳定稳定1

16、0分分钟，记录钟，记录一段正常一段正常活动曲线活动曲线。2.加入加入1:10万乙酰胆碱万乙酰胆碱溶液溶液0.2ml，记录其收缩记录其收缩幅度，待收幅度，待收缩明显后。缩明显后。3.立即加入立即加入0.05%硫酸阿硫酸阿托品托品0.2ml。观察结果。观察结果。4.平滑肌收缩平滑肌收缩曲线稳定后，曲线稳定后，再次加入再次加入1:10万乙酰胆碱溶万乙酰胆碱溶液液0.2ml，结，结果与（果与（1）相）相比较，观察结比较，观察结果有何不同。果有何不同。实验主要步骤实验主要步骤3加药加药加药加药 5.加入加入1%氯化钡溶液氯化钡溶液0.2ml，观察实验结果。，观察实验结果。实验主要步骤实验主要步骤3加药加

17、药6.待作用明显后，加入待作用明显后，加入0.05%硫酸阿托品溶液硫酸阿托品溶液0.2ml，再次观察结果，再次观察结果。反演窗口及剪辑1拖2点击剪辑板（同时复制）冲洗和分离肠管时动作应轻柔，尽量避免牵拉肠管。冲洗和分离肠管时动作应轻柔，尽量避免牵拉肠管。如需换液，台氏液液面高度及温度应与以前保持一致。如需换液，台氏液液面高度及温度应与以前保持一致。加药时不要把药液直接加到标本上，以免影响结果。加药时不要把药液直接加到标本上，以免影响结果。浴温和肠肌的张力均可影响实验结果，应注意调节。浴温和肠肌的张力均可影响实验结果，应注意调节。实验注意事项实验注意事项4阿托品是否阿托品是否对于乙酰胆对于乙酰胆

18、碱和氯化钡碱和氯化钡均有拮抗作均有拮抗作用？为什么用？为什么？问题与思考问题与思考？实验中能影实验中能影响离体肠肌响离体肠肌收缩活性的收缩活性的必要条件有必要条件有哪些？哪些？药理学实验药理学实验三、吗啡镇痛实验实验目的实验目的：掌握镇痛药的实验方法掌握镇痛药的实验方法 （热板法、扭体法）（热板法、扭体法）观察药物的镇痛作用观察药物的镇痛作用实验原理：实验原理：热刺激或者化学刺激物使小鼠热刺激或者化学刺激物使小鼠 产生不同的疼痛反应，观察给产生不同的疼痛反应，观察给 药前后小鼠疼痛反应的变化。药前后小鼠疼痛反应的变化。（痛阈值、扭体次数）（痛阈值、扭体次数）实验目的及原理实验目的及原理1p 实

19、验动物：小鼠实验动物：小鼠（热板法中小鼠为（热板法中小鼠为雌性雌性）p 实验药物：实验药物：0.1%吗啡吗啡p 实验试剂：实验试剂：0.1酒石酸锑钾（或酒石酸锑钾（或0.7%冰醋酸）、冰醋酸）、生理盐水生理盐水p 主要仪器：热板测痛仪（主要仪器：热板测痛仪（RB-200智能热板仪智能热板仪）主要实验材料主要实验材料23主要实验过程主要实验过程（热板法）（热板法）打开实验仪器、设定温度（打开实验仪器、设定温度（55）动物初筛动物初筛（选出四只）（选出四只），称重，合格动物分二组称重，合格动物分二组测定测定药前痛阈值药前痛阈值。给药组：腹腔注射给药组：腹腔注射0.1%吗啡吗啡 0.1ml/10g体

20、重体重对照组：腹腔注射对照组：腹腔注射生理盐水生理盐水 0.1ml/10g体重体重 给药后给药后15min、30min、45min再次测定各组再次测定各组小鼠痛阈值小鼠痛阈值1次。次。实验数据记录、整理、分析实验数据记录、整理、分析二组二组痛阈值痛阈值即小鼠出现疼痛反应的时间。即小鼠出现疼痛反应的时间。（以小鼠添后足作为出现疼痛观察指标。）（以小鼠添后足作为出现疼痛观察指标。）筛选指标筛选指标以痛阈值大于以痛阈值大于5秒，小于秒，小于30秒，秒，做为筛选合格动物。做为筛选合格动物。药前痛阈值药前痛阈值测定测定2次痛阈值，次痛阈值，2次间隔时间次间隔时间5min，取平均值，取平均值，为给药前正常

21、痛阈值。为给药前正常痛阈值。注释：注释：返回返回吗啡热板法镇痛结果 用药后平均痛阈值用药后平均痛阈值-用药前平均痛阈值用药前平均痛阈值 用药前平均痛阈值用药前平均痛阈值组别剂量（mg/kg）动物数药前痛阈值（s）药后痛阈值(s)药后痛阈值提高百分率(%)15min30min45min 15min30min45min生理盐水组0.1ml/10g20.1%吗啡组0.1ml/10g2痛阈值提高百分率痛阈值提高百分率=100%b3主要实验过程主要实验过程（扭体法）（扭体法）四只小鼠随机分二组四只小鼠随机分二组给药组：腹腔注射给药组：腹腔注射0.1%吗啡吗啡 0.1ml/10g体重体重对照组：腹腔注射对

22、照组：腹腔注射生理盐水生理盐水 0.1ml/10g体重体重 各组小鼠均腹腔注射各组小鼠均腹腔注射0.7%冰醋酸（冰醋酸（0.1%酒石酸锑钾）酒石酸锑钾）0.2ml/只只记录各组小鼠记录各组小鼠潜伏期潜伏期、15min内的内的扭体次数扭体次数小小鼠鼠扭扭体体反反应应（给药（给药出现扭体时间）出现扭体时间）30min后后吗啡对小鼠的镇痛作用（扭体法）组别鼠号体重药物与剂量疼痛潜伏期（s）潜伏期均值(s)15min内扭体次数15min内扭体次数均值吗啡组12对照组12注：疼痛潜伏期超过15mim，以15mim（900s）计。热板仪温度设定：热板仪温度设定：550.5 室温室温:以以15 20C为宜为

23、宜热板法中动物性别的选择：热板法中动物性别的选择：雌性雌性痛阈值判定指标：痛阈值判定指标：添后足添后足初筛：初筛：（5s 痛阈值时间痛阈值时间 30s）。）。超过超过60s动物未添足，将动物取动物未添足，将动物取出，痛阈值以出，痛阈值以60s计算计算实验中保持小鼠实验中保持小鼠足底及热板内干净、干燥。足底及热板内干净、干燥。热板仪测量中注意：热板仪测量中注意：及时盖鼠盒盖，避免温度散失。及时盖鼠盒盖，避免温度散失。扭体法实验中观察：扭体法实验中观察：潜伏期：以注射刺激物到出现疼痛反应（开始腹潜伏期：以注射刺激物到出现疼痛反应（开始腹部凹陷或扭体）计时。扭体次数：只数扭体反应的次数。部凹陷或扭体

24、）计时。扭体次数：只数扭体反应的次数。酒石酸锑钾、冰醋酸酒石酸锑钾、冰醋酸现用现配现用现配实验注意事项实验注意事项4两种镇痛模两种镇痛模型的区别？型的区别？吗啡药理学吗啡药理学作用、机制作用、机制？问题与思考问题与思考？药理学实验药理学实验 八、药物对家兔动脉血压的影响八、药物对家兔动脉血压的影响1.1 实验目的：实验目的：学习麻醉动物急性血压实验的方法。观察传出神经药物对动物血压的影响。1.2 实验原理：实验原理：u盐酸肾上腺素溶液、酚妥拉明溶液等药物能与心肌或者血管平滑肌上的相应受体结合，从而影响家兔的血压。实验目的及原理实验目的及原理1和 实验动物：家兔实验动物：家兔 实验药物：实验药物

25、：肝素生理盐水液肝素生理盐水液(500ml 生理盐水加肝生理盐水加肝素素12ml)、1.5%戊巴比妥钠溶液、戊巴比妥钠溶液、0.01%肾上腺素溶液、肾上腺素溶液、0.1%酚妥拉明溶液。酚妥拉明溶液。2主要实验材料主要实验材料和主要仪器：主要仪器：压力换能器压力换能器1台、台、BL-420生物机能实验系统生物机能实验系统1套、手术刀套、手术刀1把、手术剪把、手术剪1把、止血钳把、止血钳2把、把、眼科剪眼科剪1把、三通把、三通2个、气管插管个、气管插管1个、动脉个、动脉插管（留置针）插管（留置针）1根、动脉夹根、动脉夹1个、输液针个、输液针1根、根、20ml注射器注射器1个、个、5ml注射器注射器

26、1个、个、1ml注射器注射器3个、烧杯个、烧杯1个、纱布个、纱布1块、丝线等。块、丝线等。2主要实验材料主要实验材料 家兔称重，找到耳缘静脉，用输液针，耳缘静脉注射家兔称重，找到耳缘静脉，用输液针，耳缘静脉注射1.5%戊巴比妥钠戊巴比妥钠2ml/kg，麻醉。（固定输液针，建立静，麻醉。（固定输液针，建立静脉输液通道）注入适量肝素生理盐水液（冲洗管道并防凝脉输液通道）注入适量肝素生理盐水液（冲洗管道并防凝血）。血）。将动物背位固定于手术台上，剪去颈部的毛，颈正中将动物背位固定于手术台上，剪去颈部的毛，颈正中切口，分离气管，（作一倒切口，分离气管，（作一倒“T”形切口，插入气管插管，形切口，插入气

27、管插管，结扎固定。据情况可免）。结扎固定。据情况可免）。实验主要步骤实验主要步骤3麻醉与手术麻醉与手术分离气管气管插管l留置针管与压力换能器相连（充满肝素生理盐水）留置针管与压力换能器相连（充满肝素生理盐水）并连接在生物信号采集系统一通道上；并连接在生物信号采集系统一通道上；l在气管一侧的在气管一侧的颈动脉鞘内颈动脉鞘内分离颈总动脉（分离颈总动脉（注意注意有有迷走神经伴行，应将其与颈总动脉分离）。迷走神经伴行，应将其与颈总动脉分离）。l颈总动脉近心、远心端各穿一根线，颈总动脉近心、远心端各穿一根线，远心端结扎远心端结扎；然后用动脉夹夹住近心端，在靠近远心结扎处，然后用动脉夹夹住近心端，在靠近远

28、心结扎处，向心方向向心方向，剪一剪一V V字型口，插入充满肝素生理盐水字型口，插入充满肝素生理盐水液动脉插管，结扎近心端，固定于动脉插管小叉液动脉插管，结扎近心端，固定于动脉插管小叉上。上。l慢慢松开颈总动脉夹，描记正常血压曲线。慢慢松开颈总动脉夹，描记正常血压曲线。动脉插管动脉插管实验主要步骤实验主要步骤3麻醉与手术麻醉与手术在气管一侧的颈动脉鞘内分离颈总动脉，进行在气管一侧的颈动脉鞘内分离颈总动脉，进行颈总动脉插管颈总动脉插管分离得到颈总动脉分离得到颈总动脉颈总动脉插管颈总动脉插管 连接压力换能器后，打开电脑，点击桌面上的连接压力换能器后，打开电脑，点击桌面上的BL-420图标，进入血压实

29、验系统。图标，进入血压实验系统。实验主要步骤实验主要步骤3连接实验仪器连接实验仪器描记正常血压曲线描记正常血压曲线静脉注射静脉注射0.01%肾上腺素肾上腺素0.15ml/kg，描记血压曲线。描记血压曲线。恢复正常后，静脉注射恢复正常后，静脉注射0.1%酚妥拉明酚妥拉明（0.15ml/kg)，描记血压曲线。，描记血压曲线。恢复正常后，恢复正常后，再次静脉注射再次静脉注射0.01%肾上肾上腺素腺素0.15ml/kg，描记血压曲线。，描记血压曲线。注：每次注射药物后都需推注适量肝素生注：每次注射药物后都需推注适量肝素生理盐水液冲洗。理盐水液冲洗。作用于作用于、受体受体的药物的药物实验主要步骤实验主要

30、步骤3依次给予药物依次给予药物建立静脉通道时，输液针一定要固定好，防止建立静脉通道时，输液针一定要固定好，防止动物挣扎时滑脱，每次给药后都药用适量肝素动物挣扎时滑脱，每次给药后都药用适量肝素生理盐水液冲洗。生理盐水液冲洗。随时注意插管位置，特别在挣扎时，避免扭转随时注意插管位置，特别在挣扎时，避免扭转而阻塞血流或刺破血管。而阻塞血流或刺破血管。两次给药之间须等待血压恢复正常。两次给药之间须等待血压恢复正常。实验注意事项实验注意事项41、何为肾上、何为肾上腺素的翻转作腺素的翻转作用？用？2、实验中加、实验中加肝素的目的是肝素的目的是什么？什么？问题与思考问题与思考？3、先加入酚妥、先加入酚妥拉明

31、再加入肾拉明再加入肾上腺素，血压上腺素，血压的变化情况与的变化情况与第一次加入肾第一次加入肾上腺素有何变上腺素有何变化？为什么？化？为什么？五、传出神经系统药物五、传出神经系统药物对小鼠胃肠推进实验的影响对小鼠胃肠推进实验的影响实验目的：掌握小鼠胃肠推进实验基本方法。实验目的：掌握小鼠胃肠推进实验基本方法。比较拟胆碱药、抗胆碱药的作用。比较拟胆碱药、抗胆碱药的作用。实验原理：胃肠兴奋，蠕动增强，小肠中的碳实验原理：胃肠兴奋，蠕动增强，小肠中的碳墨运行长；反之运行短。墨运行长；反之运行短。实验目的及原理实验目的及原理1实验动物：小鼠（实验动物：小鼠（各半）各半）实验药品、器材：实验药品、器材：0

32、.05%阿托品、阿托品、0.001%新斯的明、新斯的明、10%活性炭混悬液、生理盐水。活性炭混悬液、生理盐水。1ml注射器注射器3支、灌胃针支、灌胃针1支、直尺支、直尺1把、手把、手术剪术剪1把、培养皿把、培养皿1个、苦味酸及棉签。个、苦味酸及棉签。主要实验材料主要实验材料2 取取6只小鼠（只小鼠（各半），称重、标记、分三组各半），称重、标记、分三组 甲组：甲组：ip 0.05阿托品阿托品 0.2ml/只只 乙组：乙组：ip 0.001%新斯的明新斯的明 0.2ml/只只 丙组：丙组：ip 生理盐水生理盐水 0.2ml/只只 灌胃灌胃 10%活性炭悬液活性炭悬液0.2ml/只只 处死动物，打开

33、腹腔，取出小肠处死动物，打开腹腔，取出小肠测量小肠全长和碳末运行距离测量小肠全长和碳末运行距离3主要实验过程主要实验过程10min后后15min后后幽幽门门4计算结果计算结果碳末运行率碳末运行率=幽门至远端碳末处距离幽门至远端碳末处距离小肠全长小肠全长100%【结果结果】组组 别别剂剂 量量小肠全长（小肠全长（cm)碳末运行距离碳末运行距离(cm)碳末运行率碳末运行率0.05%阿托品组0.2ml/只0.001%新斯的明组0.2ml/只生理盐水组0.2ml/只1、碳末灌胃量、小鼠处死时间必须准确。2、取出小肠后，先用水浸湿，平铺在桌上可免与台面粘连。3、剪取肠道时必须避免强行牵拉，否则将影响长度

34、的准确性。5注意事项注意事项药理学实验药理学实验六、利多卡因抗氯化钡六、利多卡因抗氯化钡 诱发家兔心律失常诱发家兔心律失常1.1 实验目的：实验目的：l家兔心电图导联的实验方法.l观察利多卡因的抗心律失常作用。1.2 实验原理：实验原理：u氯化钡具有加速钠离子内流的作用，自律性，引起心律失常。利多卡因抑制钠离子内流自律性，抗心律失常。实验目的及原理实验目的及原理1和 实验动物：实验动物：家兔，体重23kg 实验药物：实验药物：20%乌拉坦、0.2%利多卡因、0.5%氯化钡、150U/ml肝素生理盐水。主要仪器：主要仪器：电脑、BL-420E生物机能实验系统、三心线、三通1个、输液针1根、5ml

35、注射器2支、20ml10ml注射器各1支、胶布。2主要实验材料主要实验材料1、取家兔1只，称重。用输液针经耳缘静脉注射20%乌拉坦6ml/kg，并推注适量肝素生理盐水液，麻醉。固定在兔板上。实验主要步骤实验主要步骤32、用三线心电连线，分别在右前肢（白色），左后肢（红色），右后肢（黑色）皮下插入针形电极（肢体导联）。3、在1通道插口连接计算机，并开机。选择输入信号通道1动物心电（G=1000T=0.1SF=300HZ）。4、描记正常心电图。作药物（利多卡因）的准备。实验主要步骤实验主要步骤45、由静脉注射0.5氯化钡0.5ml/kg。立即描记心电图，心律失常出现后，立即静脉注射0.2利多卡因1

36、ml/kg，描记心电图的变化。记录、分析结果。实验主要步骤实验主要步骤5附：常见心电图表现附：常见心电图表现1、正常窦性心律2、阵发性室性心动过速3、扭转性室性心动过速4、房室完全传导阻滞5、心室扑动与心室颤动1】每次给药后，用适量肝素生理盐水液冲洗,并防凝血堵塞针头。2】针形电极不能插入肌肉，否则肌电干扰。注意事项注意事项6九、药物对动物自发活动的影响九、药物对动物自发活动的影响目的：1、观察安定对小白鼠自发活动的影响。2、掌握小白鼠自发活动的实验方法。材料1、同性别小白鼠4只2、1ml注射器2支3、ZZ-6小白鼠自发活动测试仪1台4、药品：0.05%安定、生理盐水、苦味酸溶液ZZ-6小白鼠

37、自发活动测试仪测试仪使用方法1、取同性别，活动度相近小鼠4只。称重、编号，分成甲乙2组。2、分别放入自发活动测试仪反应箱的4个格内，使其适应5min。按“定时”按钮，设为5min。按“启动”按钮，测试给药前正常小鼠5min内活动值。3、取出小鼠，甲组:ip0.05%安定0.2ml/10g。乙组:ip等量生理盐水。4、再放回自发活动测试仪反应箱格内，同样方法每隔5min一次（测试5min内活动次数）。连续观察5次。5、记录结果。组组别别 鼠鼠号号 体体重重（g）药物药物及剂及剂量量5min5min内活动计数内活动计数给药前给药前给给 药药 后后第一个5min第二个5min第三个5min第四个5m

38、in第五个5min甲甲12乙乙12注意事项1、测试过程中保持安静，别震动台面。2、各组测试中记住每次的数据。3、统计数据时，可以算出减少或增加的百分率。4、实验完成后，打扫卫生的同学，将测试仪的反应箱取出、洗净、擦干，放回机内。5、实验环境要求安静。有条件可在隔音室内进行。6、动物活动与饮食条件、昼夜及生活环境等有密切关系、观察自发活动最好各方面条件相近。7、动物宜事先禁食12小时，以增加觅食活动。十、动物盐酸肾上腺素半数致死量（LD50）测定寇氏改良法【实验目的实验目的】通过实验，学习测定药物LD50的方法、步骤和计算方法。【实验原理实验原理】药物的致死量的对数值在50%致死量的上下形成正态

39、分布，因此通过药物的对数剂量-动物的死亡率可求出LD50。从而反应药物的安全性。【实验材料实验材料】动物：小鼠药品：0.1%盐酸肾上腺素器材：注射器、天平、量筒、刻度吸管。实验内容1、预试验：预试验：以一个实验小组为单位完成。（约10只小鼠）（1）剂量范围（找出0%和100%死亡率的剂量范围）：全死量全死量Dmax（30内），每次取2只小鼠，用0.1%肾上腺素腹腔注射（全死参考剂量0.14ml/10g）,如全死，剂量减小1.2倍直到不全死，则上一剂量为Dmax。如非全死，剂量增加1.2倍直到全死，此剂量为Dmax。全活量全活量Dmin（30内），每次取2只小鼠，用0.1%肾上腺素腹腔注射（全活

40、参考剂量0.05ml/10g）,如全活，剂量增加1.2倍直到非全活，则上一剂量为Dmin。如非全活，剂量减小1.2倍，直到全活，此剂量为Dmin。（取本实验室6个组的全死量、全活量的平均值为最后值）实验内容确定公比：-公比；Dmax-最大剂量；Dmin-最小剂量；n-动物组数（6）。=(Dmax/Dmin)1/n-1配制等比稀释液：C母液=Dmax/药的容积数（ml）按公比逐级稀释成n组（6）。实验内容2、正式试验：（以实验室为单位，每小组完成一个剂量组。）每组取小鼠10只（各半），腹腔注射肾上腺素各稀释液，药的容积数（ml）/10g，记录30分钟内小鼠死亡数。完成后，各实验室统计全实验室各组

41、的数据绘表、按公式计算。组别剂量（mg/10g）对数剂量相邻对数剂量之差动物数n（只）死亡数（只）死亡率P（小数表示）死亡率平方（P）123456总和（）PPLD50的计算LD50=（P：用小数表示的死亡率；Xm:最大剂量对数值；：相邻两组剂量对数值之差；P:各组动物死亡率之和）LD50的标准误Sx50=（n:为每组动物数）LD50的95%可信限=LD504.5LD50Sx50修正计算当最小剂量组的死亡率大于0而又小于30，或最大剂量组的死亡率小于100而又大于70时，可按下列校正公式计算：（式中Pm最大剂量组的死亡率；Pn最小剂量组的死亡率。）LD50的标准误Sx50=（n:为每组动物数）L

42、D50的95%可信限=LD504.5LD50Sx50(perfusion of frog(perfusion of frogs heart)s heart)十一、强心苷对离体蛙心活动的影响【实验目的实验目的】1.1.学习离体蛙心的灌流方法。学习离体蛙心的灌流方法。2.2.观察强心苷对离体蛙心的作用。观察强心苷对离体蛙心的作用。【实验原理实验原理】青蛙的心脏离体后，把含有青蛙的心脏离体后，把含有任氏液的蛙心套管插入心室，任氏液的蛙心套管插入心室，用这种人工灌流的方法保持用这种人工灌流的方法保持心脏新陈代谢的顺利进行，心脏新陈代谢的顺利进行，以维持蛙心有节律地收缩和以维持蛙心有节律地收缩和舒张。通

43、过生物信号处理系舒张。通过生物信号处理系统，记录心脏搏动情况。本统，记录心脏搏动情况。本实验采用离体蛙心，观察强实验采用离体蛙心，观察强心苷的强心作用。心苷的强心作用。【实验材料实验材料】420420生物机能实验系统、张力换能器、蛙类生物机能实验系统、张力换能器、蛙类手术器械、蛙心插管、试管夹、缝合线、蛙手术器械、蛙心插管、试管夹、缝合线、蛙心夹、铁支架、滴管心夹、铁支架、滴管【实验药品实验药品】任氏液、低钙任氏液（所含任氏液、低钙任氏液（所含CaClCaCl2 2量为一般量为一般任氏液的任氏液的1/41/4，其它成分不变，其它成分不变 ）、0.02%0.02%去去乙酰毛花苷乙酰毛花苷(西地兰

44、西地兰)、1%CaCl1%CaCl2 2。【实验方法实验方法】一、离体蛙心脏标本制备一、离体蛙心脏标本制备 1.1.破坏脑和脊髓，仰位固定于蛙破坏脑和脊髓，仰位固定于蛙板上。板上。2.2.剪开胸廓、心包膜，剪开胸廓、心包膜，暴露心脏暴露心脏 3.3.蛙心插管蛙心插管1.观察心脏的解剖结构（腹面）（腹面）（背面）（背面）3.13.1 分离主分离主A A干干,在其下穿二在其下穿二条线，一条准备结扎条线，一条准备结扎A A和和蛙心插管。另一条准备结蛙心插管。另一条准备结扎后腔静脉。扎后腔静脉。3.23.2用蛙心夹夹住心尖，向用蛙心夹夹住心尖，向上翻起，结扎后腔静脉，上翻起，结扎后腔静脉，尽量向下结扎

45、，避免扎尽量向下结扎，避免扎着静脉窦。否则心脏停着静脉窦。否则心脏停搏。扎完，恢复心脏原搏。扎完，恢复心脏原位。位。蛙心插管蛙心插管3.33.3 在主动脉根部剪一在主动脉根部剪一“V V”斜口，将插管插入动脉圆斜口，将插管插入动脉圆锥，锥，在心室收缩时将插管在心室收缩时将插管插入心室，结扎固定插入心室，结扎固定(成功，成功，管内液面会上下波动管内液面会上下波动)。分。分离周围组织，在结扎处远离周围组织，在结扎处远端剪断血管及组织，使心端剪断血管及组织，使心脏离体。并用任氏液连续脏离体。并用任氏液连续换洗，至无血色。换洗，至无血色。蛙心插管蛙心插管1.1.用试管夹将蛙心管固定在铁支架上。用试管夹

46、将蛙心管固定在铁支架上。2.2.把张力换能器固定铁支架支台上，蛙心夹上的线如图绕把张力换能器固定铁支架支台上，蛙心夹上的线如图绕过滑轮连于换能器弹簧片上，上下移动换能器或蛙心插过滑轮连于换能器弹簧片上，上下移动换能器或蛙心插管，调整线的松紧程度。换能器的信号线连于管，调整线的松紧程度。换能器的信号线连于420420生物生物机能实验系统机能实验系统1 1通道上，开机，描记曲线。通道上，开机，描记曲线。二、连接仪器和装置二、连接仪器和装置三、仪器的使用三、仪器的使用1、打开420生物机能实验系统后面的电源开关，指示灯亮。2、打开电脑，在桌面双击420生物机能实验系统图标，在工具栏中点击“输入信号”

47、，选择1通道，在子菜单中选择“张力”，再点击记录。四、描记及给药四、描记及给药1、稳定510分钟，描记正常蛙心收缩曲线。2、用低钙任氏液换洗插管内任氏液两次，描记曲线的变化。3、当蛙心收缩明显减弱时，向插管内加入0.02%去乙酰毛花苷0.04ml,描记曲线的变化。4、当作用明显时，再向套管内加入1%氯化钙溶液23滴，描记曲线的变化。【实验结果实验结果】药物剂量频率（次/分）幅度（mm）正常不加药低钙任氏液换洗去乙酰毛花苷0.04ml1%氯化钙溶液2滴注意：1、测定时，插管内液面保持相同高度，以保证心脏的固定负荷。2、随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。3、蛙心套管一定要插入心室。切勿用力过大

48、，插入过深，损伤心肌。4、结扎静脉时，要远离静脉窦（起博点）。药理学实验药理学实验七、药物的利尿作用七、药物的利尿作用1.1 实验目的：实验目的：l学习学习利尿的实验方法.l观察利尿药对尿量的影响。1.2 实验原理：实验原理：u呋塞米属高效利尿药，通过抑制髓袢升枝粗段对氯化钠的重吸收而达到利尿作用。(与尿液生成生理过程相联系。)实验目的及原理实验目的及原理1和 实验动物：实验动物：家兔，体重23kg 实验药物：实验药物：1.5%戊巴比妥钠、1%呋噻米、实验试剂：实验试剂：生理盐水 主要仪器：主要仪器：烧杯、膀胱漏斗、10ml量筒。2主要实验材料主要实验材料1、取家兔1只，称重，清水灌胃30ml

49、/kg实验主要步骤实验主要步骤32、30min后，用1.5%戊巴比妥钠2ml/kg经耳缘静脉注射麻醉3、家兔背位固定于兔台上。耻骨联合前正中切开腹部皮肤46cm，暴露膀胱。4、分离输尿管，结扎尿道内口。在膀胱游离部作荷包缝合，然后剪开小口插入膀胱漏斗并固定。5、膀胱内注入生理盐水（或清水），使其充盈。记录10分钟正常尿量。6.耳缘静脉注入药物：呋噻米0.5ml/kg，观察并记录各药给药后10min尿液滴数及尿量。家兔麻醉过程中，家兔麻醉过程中，控制麻醉药推注速度控制麻醉药推注速度，密切观察实验过程中家兔情况。密切观察实验过程中家兔情况。手术过程中，动作轻柔，以免损伤膀胱。手术过程中，动作轻柔，

50、以免损伤膀胱。准确找到输尿管，准确找到输尿管，注意输尿管的生理比邻注意输尿管的生理比邻位置。位置。实验注意事项实验注意事项4尿液生成的尿液生成的正常过程，正常过程，呋塞米强大呋塞米强大利尿作用的利尿作用的原因是什么原因是什么？问题与思考问题与思考？考试软件的使用说明考试软件的使用说明分二种题型1、单选题2、判断题双击双击输入输入01-30单击单击选择选择点击点击点击点击1234点击点击判断题判断题单选题单选题答题完成答题完成点击点击1234氯丙嗪加强麻醉药的麻醉作用氯丙嗪加强麻醉药的麻醉作用【实验目的】观察氯丙嗪加强麻醉药的麻醉作用，并联系其临床意义。【实验材料】5ml注射器2支、兔固定盒、苦