生物学生化试剂产品及临床意义介绍 .pptx

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1、产品分类：1、临床化学检验试剂 生化全系列2、临床化学检验仪器 蓝宝石600全自动生化分析仪 （Sapphire 600-Audit Diagnostics）国内临床生化试剂最齐全之一含已注册和正在申报中：已注册已注册ALTASTALPGGTCHEAFU(试)TBA-ITBA-VTPALBTBILDBILPAADA (试)CR-苦CR-酶BUNUAB2-MG(试)GLU-HKGLU-OXGSPAMYTGTCHHDL-CLDL-CAPOA1APOBLPaCKCKMBLDHHBDHCaMgPCu(试)ZnFeCO2ASO(试)CRP(试)RF (试)申报中申报中5-NTGPDAAFPNAGCSFC

2、YS-CMALBHbA1cD3-HACELDH1C3C4IgAIgGIgMTRF生化试剂分类：酶类：AMY，CK，CK-MB，HBDH，LDH，LDH1，ALT，AST，ALP，GGT，AFU，CHE，5-NT，ADA，NAG，ACE，GPDA基质类：TP，ALB，GLU，GSP，TBIL，DBIL，UA，BUN，CR，TBA 1,5-AG，D3-H，CSF，CYS-C，TRP，血脂类：TG，TCH，HDL-C，LDL-C，APOA1，APOB，LP（a）电解质：Ca，Mg，P，Cl，Cu，Fe，Zn，CO2免疫类：ASO，RF，CRP，B2-MG，HBA1C，C3，C4，IgA，IgG，Ig

3、M，PA，MALB，AFP生化试剂临床应用肝功能TP,ALB,TBIL,DBIL,ALT,AST,ALP,GGT;TBA,AFU,AFP,ADA,CHE,5-NT,GPDA,PA肾功能UA,BUN,CR,B2-MG,NAG，mALB,UP,CSF,CYC心肌酶谱LDH-L，HBDH，CK，CK-MB,LDH1血脂TG，TCH，HDL-C，LDL-C，APOA1，APOB，LP（a）风湿三项ASO,RF,CRP血糖GLU,GSP,HBA1C,1,5-AG,D3-H心血管HS-CRP，ACE电解质CA，MG，P，CL，CU，FE，ZN，CO2胰腺AMY其他C3,C4,IgA,IgG,IgM肝胆疾病

4、肝胆疾病的生物化学检测的生物化学检测1.1.肝脏的生理功能肝脏的生理功能1.1.代谢功能：代谢功能：三大物质（糖、蛋白质和脂类）的三大物质（糖、蛋白质和脂类）的同化、储存和异化；核酸代谢、维生素的活化同化、储存和异化；核酸代谢、维生素的活化和储藏；激素的灭活及排泄；胆红素、胆酸的和储藏；激素的灭活及排泄；胆红素、胆酸的生成；铁、铜等金属的代谢生成；铁、铜等金属的代谢2.2.排泄功能：排泄功能：对胆红素和某些染料的排泄对胆红素和某些染料的排泄3.3.解毒功能：解毒功能：生物转化功能（同化、异化）生物转化功能（同化、异化）4.4.物质合成功能物质合成功能：凝血和纤溶因子、纤溶抑制因：凝血和纤溶因子

5、、纤溶抑制因子的生成及对活性凝血因子的灭活清除子的生成及对活性凝血因子的灭活清除2.2.肝功能实验的内容肝功能实验的内容蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查 (TP(TP、ALBALB、PAPA、AFP)AFP)胆红素代谢检查（胆红素代谢检查（TBILTBIL、DBILDBIL）胆汁酸代谢检查（胆汁酸代谢检查（TBATBA）摄取、排泄功能检查摄取、排泄功能检查血清肝酶谱的检查（血清肝酶谱的检查（ALTALT、ASTAST、ALPALP、GGTGGT、）、）蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查肝脏是蛋白质代谢的主要的器官，许多蛋白质如白蛋肝脏是蛋白质代谢的主要的器官，许多蛋白质如白蛋白、糖蛋白、

6、凝血因子、纤溶因子及各种转运蛋白等白、糖蛋白、凝血因子、纤溶因子及各种转运蛋白等都由肝细胞合成，当肝细胞受损时，合成上述蛋白的都由肝细胞合成，当肝细胞受损时，合成上述蛋白的功能降低，蛋白质的合成量就减少；功能降低，蛋白质的合成量就减少；-球蛋白虽然不是肝细胞合成，但当肝实质细胞受损，球蛋白虽然不是肝细胞合成，但当肝实质细胞受损，间质细胞增生时，球蛋白的生成增加；间质细胞增生时，球蛋白的生成增加；因此，在肝脏疾病时，可表现出血液中蛋白质质和量因此，在肝脏疾病时，可表现出血液中蛋白质质和量的改变；的改变；其主要表现为白蛋白减少，纤维蛋白原减少，球蛋白其主要表现为白蛋白减少，纤维蛋白原减少，球蛋白的

7、增多等；的增多等；因此，测定血清中蛋白质含量和分析其组分的变化，因此，测定血清中蛋白质含量和分析其组分的变化，可以了解肝脏蛋白质代谢的功能。可以了解肝脏蛋白质代谢的功能。1.1.总蛋白、白蛋白的检测总蛋白、白蛋白的检测 总蛋白的检测总蛋白的检测双缩脲法双缩脲法蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结合而成的，二价铜离子在碱性溶液中与合而成的，二价铜离子在碱性溶液中与蛋白中的肽发生反应形成紫红色络合物，蛋白中的肽发生反应形成紫红色络合物，在在540540nmnm有吸收峰，并与蛋白含量有吸收峰，并与蛋白含量 成正成正比。比。蛋白蛋白+CuCu2+2+Cu Cu 蛋白络合

8、物（紫红色）蛋白络合物（紫红色）白蛋白的检测白蛋白的检测溴甲酚绿终点法溴甲酚绿终点法 血清中白蛋白与溴甲酚绿（血清中白蛋白与溴甲酚绿（BCGBCG）在）在pH4.15pH4.15环境中结合生成绿色复合物，溶环境中结合生成绿色复合物，溶液由黄色变为绿色，在液由黄色变为绿色，在6 600nm00nm有吸收峰，有吸收峰，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，从而其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，从而测出白蛋白含量。测出白蛋白含量。白蛋白白蛋白+溴甲酚绿溴甲酚绿白蛋白白蛋白-BCG-BCG复合物复合物与溴甲酚紫法的比较与溴甲酚紫法的比较溴甲酚绿法操作简单、快速，既可手工溴甲酚绿法操作简单、快速，既可手工操作，也能

9、自动化分析，是目前国内最操作，也能自动化分析，是目前国内最常用方法。常用方法。溴甲酚绿法除与白蛋白结合外，还与部溴甲酚绿法除与白蛋白结合外，还与部分球蛋白结合，对血清白蛋白特异性较分球蛋白结合，对血清白蛋白特异性较溴甲酚紫法稍差溴甲酚紫法稍差溴甲酚绿法测定白蛋白具有高灵敏度溴甲酚绿法测定白蛋白具有高灵敏度临床意义临床意义血清总蛋白与白蛋白升高血清总蛋白与白蛋白升高急性失水、肾上腺皮质功能亢进急性失水、肾上腺皮质功能亢进血清总蛋白与白蛋白降低血清总蛋白与白蛋白降低肝细胞损害合成减少：肝炎、肝硬化、肝癌肝细胞损害合成减少：肝炎、肝硬化、肝癌总蛋白总蛋白6060g/L,g/L,白蛋白白蛋白25 25

10、 g/Lg/L，低蛋白血低蛋白血症症营养不良：摄入不足营养不良：摄入不足丢失过多：肾病、烧伤、大出血丢失过多：肾病、烧伤、大出血消耗增加：结核、甲亢、恶性肿瘤消耗增加：结核、甲亢、恶性肿瘤血清总蛋白与白蛋白升高血清总蛋白与白蛋白升高 TPTP80g/L80g/L（高蛋白血症）高蛋白血症）A A 35g/L35g/L（高球蛋白血症）高球蛋白血症）慢性肝病、慢性肝病、M M蛋白血症、自身免疫性疾病、慢性炎蛋白血症、自身免疫性疾病、慢性炎症和感染如结核、麻风、慢性血吸虫病症和感染如结核、麻风、慢性血吸虫病血清血清TPTP降低降低生理性减少（生理性减少（e.g.3ye.g.3y）、）、免疫功能抑制、先

11、天性免疫功能抑制、先天性低低TPTPA/GA/G倒置倒置肝功能损伤、肝功能损伤、M M蛋白血症。如慢性肝炎、肝硬化、蛋白血症。如慢性肝炎、肝硬化、肝癌、多发性骨髓瘤肝癌、多发性骨髓瘤血清前白蛋白测定血清前白蛋白测定免疫比浊法免疫比浊法 标标本本中中PABPAB与与特特异异性性抗抗体体反反应应形形成成不不溶溶性性复复合合物物，可可在在340340nmnm测测定定该该复复合合物物的的浊浊度度，与与同同样样处处理理的的标标准准品品比比较较，得得出出标标本本中中PABPAB的含量。的含量。临床意义临床意义降低：见于慢性感染、肿瘤、肝炎、肝降低：见于慢性感染、肿瘤、肝炎、肝硬化、肝癌，硬化、肝癌，(因为

12、半衰期比因为半衰期比ALBALB短，短，PAPA的变化远较的变化远较ALBALB敏感敏感)，故对早期肝炎、，故对早期肝炎、急性重肝具有特殊诊断价值急性重肝具有特殊诊断价值升高：升高：HodgkinHodgkin病（恶性淋巴瘤的一种独病（恶性淋巴瘤的一种独特类型特类型）胆红素代谢检查胆红素代谢检查胆红素主要是在网状内皮系统中，由衰胆红素主要是在网状内皮系统中，由衰老老RBCRBC的血红蛋白分解后形成的血红蛋白分解后形成生成后在血液中与白蛋白聚合，此时尚生成后在血液中与白蛋白聚合，此时尚未与其它化合物结合，称为未与其它化合物结合，称为非结合胆红非结合胆红素素（间接胆红素间接胆红素IBILIBIL或

13、游离胆红素或游离胆红素）非结合胆红素被转运到肝脏，经肝细胞非结合胆红素被转运到肝脏，经肝细胞摄取后，通过肝脏的生物转化作用，与摄取后，通过肝脏的生物转化作用，与葡萄糖醛酸结合后葡萄糖醛酸结合后 称为称为结合胆红素结合胆红素（直直接胆红素接胆红素DBILDBIL）胆红素代谢检查胆红素代谢检查结合胆红素由胆道排入肠腔，被细菌还原成结合胆红素由胆道排入肠腔，被细菌还原成尿尿胆原胆原尿胆原一部分被肠粘膜吸收进入体内被肝细胞尿胆原一部分被肠粘膜吸收进入体内被肝细胞摄取，其中大部分又转变成胆红素随胆汁排入摄取，其中大部分又转变成胆红素随胆汁排入肠腔，形成肠腔，形成“肝肠循环肝肠循环”残留肠腔的尿胆原氧化后

14、，以残留肠腔的尿胆原氧化后，以粪胆素粪胆素排出排出因此，当胆红素生成过多或肝细胞的摄取、结因此，当胆红素生成过多或肝细胞的摄取、结合、转运、排泄等过程发生障碍，可导致血中合、转运、排泄等过程发生障碍，可导致血中胆红素增高，形成胆红素增高，形成黄疸。黄疸。总胆红素总胆红素(T-BIL)T-BIL)改良化学氧化法改良化学氧化法总胆红素在表面活性剂存在下，被化学总胆红素在表面活性剂存在下，被化学氧化剂氧化，生成胆绿素，测定氧化剂氧化，生成胆绿素，测定450nm450nm处处吸光度的减少与总胆红素的浓度成正比。吸光度的减少与总胆红素的浓度成正比。化学氧化剂化学氧化剂 pH8.2pH8.2 胆红素胆红素

15、胆绿素胆绿素 表面活性剂表面活性剂直接胆红素直接胆红素(D-BIL)D-BIL)改良化学氧化法改良化学氧化法直接胆红素在间胆抑制剂和表面活性剂的存在直接胆红素在间胆抑制剂和表面活性剂的存在下，被化学氧化剂氧化，生成胆绿素，测定下，被化学氧化剂氧化，生成胆绿素，测定450nm450nm处吸光度的减少与直接胆红素的浓度成处吸光度的减少与直接胆红素的浓度成正比。正比。化学氧化剂化学氧化剂 pH3.0pH3.0 胆红素胆红素 胆绿素胆绿素 间胆抑制剂间胆抑制剂与重氮盐法的比较与重氮盐法的比较重氮法中的改良重氮法中的改良J-GJ-G法有较高的灵敏度、法有较高的灵敏度、精密度和较宽的线性，但试剂无法长期精

16、密度和较宽的线性，但试剂无法长期稳定，溶血有负干扰，且叠氮钠作为防稳定，溶血有负干扰，且叠氮钠作为防腐剂时能破坏偶氮试剂，导致呈色不完腐剂时能破坏偶氮试剂，导致呈色不完全；全；改良化学氧化法与改良化学氧化法与J-GJ-G法有很好的相关性法有很好的相关性（R=0.994R=0.994）；抗溶血（）；抗溶血（HbHb7.47.4）；不）；不受脂肪乳、受脂肪乳、VitCVitC、肝素等干扰因素的影、肝素等干扰因素的影响；双试剂可以长期保持稳定响；双试剂可以长期保持稳定临床意义 增增高高：见见于于肝肝脏脏疾疾病病，如如原原发发性性胆胆汁汁性性肝肝硬硬化化、急急性性黄黄疸疸性性肝肝炎炎、慢慢性性活活动动

17、性性肝肝炎炎、病病毒毒性性肝肝炎炎、阻阻塞塞性性黄黄疸疸、肝肝硬硬化化；肝肝外外疾疾病病如如溶溶血血性性黄黄疸疸、新新生生儿儿黄黄疸疸、胆胆石石症症、胰胰头头癌癌、输输血血错错误误等等也也可可见总胆红素也增高。见总胆红素也增高。胆汁酸测定胆汁酸测定酶循环法酶循环法 （第五代胆汁酸测定方法学）（第五代胆汁酸测定方法学）胆汁酸被胆汁酸被3 3-羟基类固醇脱氢酶及羟基类固醇脱氢酶及Thio-Thio-NADNAD特异性地氧化，生成特异性地氧化，生成3-3-酮类固醇及酮类固醇及Thio-NADHThio-NADH，3-3-酮类固醇在酮类固醇在3 3-羟基类固羟基类固醇脱氢酶及醇脱氢酶及NADHNADH

18、存在下，生成胆汁酸和存在下，生成胆汁酸和NADNAD+，循环往复从而放大微量的胆汁酸量，循环往复从而放大微量的胆汁酸量，测定生成的测定生成的Thio-NADHThio-NADH的吸光度与标准比的吸光度与标准比较，得出胆汁酸含量。较，得出胆汁酸含量。酶循环法测定反应式酶循环法测定反应式Thio-NAD+Thio-NADH+H+胆汁酸 3-羟基类固醇脱氢酶 3-酮类固醇 NAD+NADH+H+临床意义临床意义总胆汁酸升高总胆汁酸升高肝损害：肝炎、肝硬化、肝癌肝损害：肝炎、肝硬化、肝癌胆道阻塞：胆管梗阻引起的胆汁淤积胆道阻塞：胆管梗阻引起的胆汁淤积小肠污浊综合症小肠污浊综合症 l与第一代胆汁酸测定试

19、剂相比与第一代胆汁酸测定试剂相比 成倍提高了测定灵敏度，克服了第一代酶成倍提高了测定灵敏度，克服了第一代酶比色法试剂在测定低值标本时的重复性差的问比色法试剂在测定低值标本时的重复性差的问题。题。同时由于灵敏度提高的原因，循环酶法试同时由于灵敏度提高的原因，循环酶法试剂更加容易受到其他试剂中所含胆酸盐的交叉剂更加容易受到其他试剂中所含胆酸盐的交叉污染。应该在通道或者测定顺序设置上与那些污染。应该在通道或者测定顺序设置上与那些试剂隔离开来。试剂隔离开来。血清酶学检查血清酶学检查肝脏是酶含量最丰富的器官，肝细胞损肝脏是酶含量最丰富的器官，肝细胞损伤时，许多酶如伤时，许多酶如ALTALT、ASTAST

20、、GGTGGT、ALPALP释释放入血，导致血浆酶水平升高放入血，导致血浆酶水平升高1.1.肝脏疾病时酶活力改变的机制肝脏疾病时酶活力改变的机制酶合成异常酶合成异常肝细胞释放增加肝细胞释放增加 2.2.对肝脏疾病诊断意义的分类对肝脏疾病诊断意义的分类反映肝细胞病变和坏死的酶（反映肝细胞病变和坏死的酶（ALTALT，ASTAST）反映肝、胆淤滞的酶反映肝、胆淤滞的酶反映肝纤维化的酶反映肝纤维化的酶反映肝细胞合成功能的酶（反映肝细胞合成功能的酶（CHECHE）反映肝细胞病变和坏死的酶反映肝细胞病变和坏死的酶 谷氨酸氨基转移酶（谷丙转氨酶，谷氨酸氨基转移酶（谷丙转氨酶，ALTALT）连续监测法连续监

21、测法 （IFCCIFCC）ALTALT催化催化L-L-丙氨酸的氨基转移，生成丙酮丙氨酸的氨基转移，生成丙酮酸。丙酮酸与酸。丙酮酸与NADHNADH在在LDHLDH的催化下反应生的催化下反应生成乳酸和成乳酸和NADNAD+。NADHNADH在在340340nmnm处有特异吸处有特异吸收峰，其被氧化的速率与血清中收峰，其被氧化的速率与血清中ALTALT的活的活性成正比，在性成正比，在340340nmnm处测定处测定NADHNADH下降速率，下降速率，即可测出即可测出ALTALT活性。活性。天门冬氨酸氨基转移酶（谷草转氨酶，天门冬氨酸氨基转移酶（谷草转氨酶，ASTAST）连续监测法连续监测法 （IF

22、CCIFCC）ASTAST催化催化L-L-天冬氨酸的氨基转移与天冬氨酸的氨基转移与MDHMDH催催化的反应偶联，使化的反应偶联，使NADHNADH氧化生成氧化生成NAD+NAD+。NADHNADH在在340340nmnm处有特异吸收峰，其被氧化处有特异吸收峰，其被氧化的速率与血清中的速率与血清中ASTAST的活性成正比，在的活性成正比，在340340nmnm处测定处测定NADHNADH下降速率，即可测出下降速率，即可测出ASTAST活性。活性。与赖氏法的比较与赖氏法的比较连续监测法多用于自动化生化分析仪，连续监测法多用于自动化生化分析仪，准确性好、精密度高。准确性好、精密度高。赖氏法多用于手工

23、操作，实验条件要求赖氏法多用于手工操作，实验条件要求不高，便于基层医疗单位开展，但重复不高，便于基层医疗单位开展，但重复性差，准确性差。性差，准确性差。临床意义临床意义急性病毒肝炎急性病毒肝炎ALTALT：500-1000U/L500-1000U/L，并且，并且ASTALT ASTALTASTALT多见多见 一些药物或毒物所致升高：氯丙嗪、异烟肼、一些药物或毒物所致升高：氯丙嗪、异烟肼、奎宁和酒精、铅、汞、四氯化碳、有机磷中毒奎宁和酒精、铅、汞、四氯化碳、有机磷中毒腺苷脱氨酶（腺苷脱氨酶（ADAADA）酶比色法酶比色法 ADAADA腺嘌呤核苷腺嘌呤核苷+H+H2 2O O次黄嘌呤核苷次黄嘌呤核

24、苷+NH+NH3 3 PN PN 次黄嘌呤核苷次黄嘌呤核苷+Pi+Pi次黄嘌呤次黄嘌呤+磷酸核糖磷酸核糖 XODXOD 次黄嘌呤次黄嘌呤+2H+2H2 2O+2OO+2O2 2 2H2H2 2O O2 2+尿酸尿酸 PODPOD 2H 2H2 2O O2 2+4-AAP+TOOS+4-AAP+TOOS醌化合物醌化合物 在波长在波长546nm546nm处测定醌化合物生成速率，计算处测定醌化合物生成速率，计算出出ADAADA活力。活力。临床意义临床意义 类似类似ALTALT，对反映急性肝损害的残存病变，对反映急性肝损害的残存病变和慢性肝损害比和慢性肝损害比ALTALT为先，（并且为先，（并且ADA

25、ADA在在鉴别结核性和非结核性胸腹腔积液上也鉴别结核性和非结核性胸腹腔积液上也有应用）有应用）。反映肝细胞合成功能的酶反映肝细胞合成功能的酶胆碱酯酶（胆碱酯酶（CHE)CHE)硫代丁酰胆碱法硫代丁酰胆碱法硫代丁酰胆碱在胆碱酯酶的作用下生成硫代丁酰胆碱在胆碱酯酶的作用下生成丁酸和硫代胆碱，硫代胆碱再与丁酸和硫代胆碱，硫代胆碱再与5 5、5 5二二硫代硫代-2-2-硝基苯甲酸反应生成硝基苯甲酸反应生成5-5-巯基巯基-2-2-硝基苯甲酸，通过在硝基苯甲酸，通过在405nm405nm处测定处测定5-5-巯基巯基-2-2-硝基苯甲酸的增高速率，可以计算出硝基苯甲酸的增高速率，可以计算出胆碱酯酶的活力。

26、胆碱酯酶的活力。临床意义临床意义 CHECHE活力降低：肝实质细胞损害活力降低：肝实质细胞损害反映胆道梗阻的酶反映胆道梗阻的酶 碱性磷酸酶（碱性磷酸酶（ALPALP）的测定的测定连续监测法连续监测法 （IFCCIFCC）无无色色的的对对-硝硝基基苯苯磷磷酸酸二二钠钠在在ALPALP作作用用下下，生生成成在在405405nmnm处处有有特特异异吸吸收收峰峰的的淡淡黄黄色色对对-硝硝基基苯苯酚酚，通通过过测测定定在在405405nmnm处处吸吸光光度度的变化速率计算的变化速率计算ALPALP活性。活性。临床意义临床意义肝胆系统疾病：阻塞性黄疸、急、慢肝胆系统疾病：阻塞性黄疸、急、慢性黄疸肝性黄疸肝

27、 炎、肝癌炎、肝癌黄疸的鉴别黄疸的鉴别骨骼疾病：纤维性骨炎、佝偻病、骨骨骼疾病：纤维性骨炎、佝偻病、骨软化病、骨转移癌、骨折愈合期软化病、骨转移癌、骨折愈合期生理性升高：生长期的儿童和青少年生理性升高：生长期的儿童和青少年 -谷氨酰转肽酶（谷氨酰转肽酶（GGTGGT）连续监测法连续监测法 -谷谷氨氨酰酰-3-3-羧羧基基-对对硝硝基基苯苯胺胺和和双双甘甘肽肽在在-GTGT作作用用下下，生生成成对对硝硝基基苯苯胺胺及及 -谷谷氨氨酰酰双双甘甘肽肽，所所释释放放出出的的对对硝硝基基苯苯胺胺与与-GTGT活活性性成成正正比比，通通过过在在405405nmnm处处测测定定对对硝硝基苯胺的变化，可求出基

28、苯胺的变化，可求出-GTGT活力。活力。临床意义临床意义胆道阻塞性疾病胆道阻塞性疾病急、慢性病毒性肝炎、肝硬化急、慢性病毒性肝炎、肝硬化酒精性肝炎酒精性肝炎其他：脂肪肝、胰腺炎、前列腺肿瘤其他：脂肪肝、胰腺炎、前列腺肿瘤其它酶类其它酶类酶类肿瘤标志物检测酶类肿瘤标志物检测 -L-L-岩藻糖苷酶（岩藻糖苷酶（AFUAFU）与原发性肝癌诊断与原发性肝癌诊断标志（标志（81.2%81.2%），），与甲胎蛋白（与甲胎蛋白（AFPAFP）联合）联合检测可提高肝癌检出率检测可提高肝癌检出率肝纤维化的酶学检查肝纤维化的酶学检查单氨氧化酶单氨氧化酶腺苷脱氨酶腺苷脱氨酶 （ADAADA）思考题思考题1.1.肝损

29、害蛋白检查的意义。肝损害蛋白检查的意义。2.2.血清酶学在肝胆疾病检查的意义。血清酶学在肝胆疾病检查的意义。名词解释名词解释1.1.结合胆红素结合胆红素2.2.非结合胆红素非结合胆红素肾脏疾病肾脏疾病的生物化学检测的生物化学检测肾脏的生理功能肾脏的生理功能1.排泄水分、代谢产物、废物，保留有用物质2.调节水分和渗透压3.调节电解质及酸碱平衡4.制造某些重要的生理活性物质第一节第一节肾小球功能检查肾小球功能检查肾小球滤过率（肾小球滤过率（GFRGFR）是反映肾小球滤过功能的客观指标，用是反映肾小球滤过功能的客观指标，用单位时间内两肾生成的超滤液量即原尿单位时间内两肾生成的超滤液量即原尿的生成量来

30、表示的生成量来表示肾清除率肾清除率是指双肾于单位时间（是指双肾于单位时间（minmin）内，能将多）内，能将多少毫升血浆所含的某物质全部清除，结少毫升血浆所含的某物质全部清除，结果以果以ml/minml/min或或L/24HL/24H表示表示肾清除率肾清除率肾清除率可分别测定肾小球滤过率、肾血流量、肾清除率可分别测定肾小球滤过率、肾血流量、肾小管对各种物质的重吸收和分泌作用肾小管对各种物质的重吸收和分泌作用1.全部由肾小球滤出，肾小管不吸收、不分泌，全部由肾小球滤出，肾小管不吸收、不分泌，如菊粉：如菊粉：可作为肾小球滤过率测定的理想物可作为肾小球滤过率测定的理想物质，能完全反映肾小球滤过率质，

31、能完全反映肾小球滤过率2.由肾小球滤出，肾小管也排泌，如尿素、肌由肾小球滤出，肾小管也排泌，如尿素、肌酐等：酐等：反映肾小球滤过率不如菊粉准确反映肾小球滤过率不如菊粉准确3.全部由肾小球滤出，又被肾小管全部吸收，全部由肾小球滤出，又被肾小管全部吸收，如葡萄糖，可作为肾小管最大吸收率的测定如葡萄糖，可作为肾小管最大吸收率的测定4.除肾小球滤过外，大部分通过肾小管分泌排除肾小球滤过外，大部分通过肾小管分泌排出，如对氨马尿酸等，可作为肾血流量的测出，如对氨马尿酸等，可作为肾血流量的测定定1.1.内生肌酐清除率（内生肌酐清除率（CcrCcr）肌酐肌酐为肌肉中磷酸肌酸的代谢产物，是反映肾为肌肉中磷酸肌酸

32、的代谢产物，是反映肾小球的滤过功能的较好指标小球的滤过功能的较好指标原理原理血浆肌酐种类：内源性和外源性血浆肌酐种类：内源性和外源性血浆肌酐的代谢：大部分从肾小球滤过，不血浆肌酐的代谢：大部分从肾小球滤过，不被肾小管重吸收，且肾小管的排泌量很少被肾小管重吸收，且肾小管的排泌量很少条件：在严格控制饮食和肌肉活动相对稳定条件：在严格控制饮食和肌肉活动相对稳定的情况下，血浆肌酐的生成量和在尿中的排的情况下，血浆肌酐的生成量和在尿中的排出量较恒定，其含量的变化主要受内源性肌出量较恒定，其含量的变化主要受内源性肌酐的影响酐的影响内生肌酐清除率（内生肌酐清除率（CcrCcr）：指肾单位时间内，：指肾单位时

33、间内，清除多少毫升血浆中的内生肌酐清除多少毫升血浆中的内生肌酐病人检查前的准备病人检查前的准备 病人连续进食低蛋白食物病人连续进食低蛋白食物3 3天，每天蛋白质摄天，每天蛋白质摄入量入量40g40g，禁食肉类，禁食肉类,禁饮浓茶、咖啡，避禁饮浓茶、咖啡，避免剧烈运动免剧烈运动标本采集标本采集 第四天早晨第四天早晨8 8时开始收集时开始收集2424小时尿液（加入甲小时尿液（加入甲苯防腐），当日内任何时间抽血苯防腐），当日内任何时间抽血2ml2ml与尿液与尿液（测量尿液的总体积）同时送检（测量尿液的总体积）同时送检计算公式计算公式 每分钟肌酐清除率每分钟肌酐清除率=尿肌酐浓度尿肌酐浓度每分钟尿量每

34、分钟尿量/血浆肌酐浓度（单位：血浆肌酐浓度（单位：ml/minml/min）正常参考值正常参考值 80-120 ml/min 80-120 ml/min临床意义临床意义判断肾小球损害的敏感指标，可较早判断肾小判断肾小球损害的敏感指标，可较早判断肾小球损害球损害对肾功能的初步估价，可作为观察肾移植成功对肾功能的初步估价，可作为观察肾移植成功与否的客观指标，移植成功，该指标逐步回升，与否的客观指标，移植成功，该指标逐步回升，发生排斥，则下降发生排斥，则下降慢性肾炎临床分型的参考慢性肾炎临床分型的参考对临床治疗的指导意义对临床治疗的指导意义药物使用的参考药物使用的参考2.2.血尿素氮和血肌酐的测定血

35、尿素氮和血肌酐的测定原理原理 血尿素氮（血尿素氮（BUNBUN）和血肌酐（）和血肌酐（CREACREA）主要经肾）主要经肾小球滤过而随尿液排出，在肾实质受损时，肾小球滤过而随尿液排出，在肾实质受损时，肾小球滤过率降低，导致小球滤过率降低，导致BUNBUN和和ScrScr在血中的浓度在血中的浓度增加。增加。参考值参考值BUN 1.4BUN 1.47.1 mmol/L7.1 mmol/LCERA CERA 男性男性 44 44 97 97 mol/Lmol/L 女性女性 35 35 80 80 mol/Lmol/L尿素氮尿素氮(BUN/UREA)(BUN/UREA)的测定的测定临床实验室常采用脲酶

36、速率法、离子选临床实验室常采用脲酶速率法、离子选择电极法等。择电极法等。脲酶速率法脲酶速率法 脲酶催化尿素水解产生脲酶催化尿素水解产生NHNH3 3和和COCO2 2。在谷氨。在谷氨酸脱氢酶催化下，酸脱氢酶催化下，NHNH3 3与与-酮戊二酸和酮戊二酸和NADHNADH反应生成反应生成NADNAD+。NADHNADH在在340nm340nm处有特处有特异性吸收峰，通过测定异性吸收峰，通过测定NADHNADH下降速率与下降速率与同样处理的标准比较，得出尿素含量。同样处理的标准比较，得出尿素含量。肌酐肌酐(CREA)(CREA)的测定的测定氧化酶比色法氧化酶比色法 肌肝肌肝 +H+H2 2O O

37、肌酸肌酸 肌酸肌酸 +H+H2 2O O 肌氨酸肌氨酸+尿素尿素 肌氨酸肌氨酸+H+H2 2O+OO+O2 2氨基乙酸氨基乙酸+H+H2 2O O2 2+HCHO+HCHO H H2 2O O2 2+笨酚笨酚 +4-+4-氨基安替比林氨基安替比林 醌醌 亚胺（红色）亚胺（红色）4H4H2 2O O醌亚胺在醌亚胺在546nm 546nm 处有最大吸收峰，其吸处有最大吸收峰，其吸光度值与光度值与CREACREA含量成正比。含量成正比。与碱性苦味酸法（与碱性苦味酸法（Jaffe法法）比较）比较氧化酶法测定血肌酐的特异性大大提高，可消氧化酶法测定血肌酐的特异性大大提高，可消除假肌酐如除假肌酐如VitC

38、、丙酮酸、丙酮、乙酰乙酸、丙酮酸、丙酮、乙酰乙酸等等物质的正干扰。因此在测得值上会较物质的正干扰。因此在测得值上会较Jaffe法偏法偏低（参考值应作相应调整）。氧化酶法试剂同低（参考值应作相应调整）。氧化酶法试剂同时还能抗胆红素和半胱氨酸等时还能抗胆红素和半胱氨酸等Jaffe法的抑制物。法的抑制物。酶法试剂也克服了苦味酸法中色素对自动生化酶法试剂也克服了苦味酸法中色素对自动生化分析仪比色杯和管路的污染，适合于临床自动分析仪比色杯和管路的污染，适合于临床自动化分析仪使用化分析仪使用。与Jaffe法相比，酶法试剂的开盖稳定性也大大法相比，酶法试剂的开盖稳定性也大大提高。避免了频繁地定标操作。提高。

39、避免了频繁地定标操作。临床意义临床意义各种严重肾脏疾病引起肾功能不全时可各种严重肾脏疾病引起肾功能不全时可增高；增高；上消化道出血、严重感染和饮食中蛋白上消化道出血、严重感染和饮食中蛋白质过多，也可导致质过多，也可导致BUNBUN暂时升高；暂时升高；由于血肌酐受其他影响较小，能反映患由于血肌酐受其他影响较小，能反映患者肾功能情况，者肾功能情况，CREACREA明显升高，提示预明显升高，提示预后差。后差。3.3.血尿酸（血尿酸（UAUA）的测定）的测定原理原理 UAUA是体内嘌呤代谢终产物，小部分经肝是体内嘌呤代谢终产物，小部分经肝分解破坏，大部分经肾小球滤过，在近分解破坏，大部分经肾小球滤过，

40、在近端肾小管中端肾小管中98-100%98-100%被重吸收，故正常情被重吸收，故正常情况下况下UAUA的清除率较低的清除率较低尿酸酶法尿酸酶法 尿酸酶催化尿酸酶催化UAUA氧化生成尿囊素和氧化生成尿囊素和H H2 2O O2 2，过氧化，过氧化氢在过氧化物酶的存在下与笨酚、氢在过氧化物酶的存在下与笨酚、4-4-氨基安替氨基安替比林氧化缩和成红色醌式化合物，在比林氧化缩和成红色醌式化合物，在546nm546nm处处有最大吸收峰，其吸光度值与有最大吸收峰，其吸光度值与UAUA含量成正比。含量成正比。临床意义临床意义 血液尿酸增高常见于肾脏疾病、痛风、子痫、血液尿酸增高常见于肾脏疾病、痛风、子痫、

41、白血病与肿瘤及其他疾病如慢性铅中毒引起的白血病与肿瘤及其他疾病如慢性铅中毒引起的肾损害、长期禁食等肾损害、长期禁食等4.2-4.2-微球蛋白微球蛋白原理原理 2-M2-M在体内主要由淋巴细胞产生的一种在体内主要由淋巴细胞产生的一种小分子蛋白，正常人血中小分子蛋白，正常人血中 2-M2-M浓度很低，浓度很低，可自由通过肾小球，然后在近端肾小管可自由通过肾小球，然后在近端肾小管几乎被全部重吸收几乎被全部重吸收免疫比浊法免疫比浊法 2-MG 2-MG与特异性抗体反应形成不溶性复与特异性抗体反应形成不溶性复合物，可在合物，可在540nm540nm测定该复合物的浊度，测定该复合物的浊度，与同样处理的标准

42、品比较，得出血清中与同样处理的标准品比较，得出血清中2-MG2-MG的含量。的含量。临床意义临床意义尿液尿液2-M2-M升高是反映近端小管受损的非常升高是反映近端小管受损的非常灵敏和特异的指标灵敏和特异的指标肾小球滤过功能下降时，血肾小球滤过功能下降时，血2-M2-M水平升高水平升高第二节第二节肾小管功能试验肾小管功能试验肾小管的功能较多，除了具有强大的重肾小管的功能较多，除了具有强大的重吸收水份与一些物质的能力外，还具有吸收水份与一些物质的能力外，还具有选择分泌和排泄一些物质的能力选择分泌和排泄一些物质的能力目前为止没有理想的功能试验适用于临目前为止没有理想的功能试验适用于临床床以尿液浓缩以

43、尿液浓缩-稀释试验和酚红排泄试验作稀释试验和酚红排泄试验作为肾小管的功能试验为肾小管的功能试验近年来尿酶和自由水清除值等的测定使近年来尿酶和自由水清除值等的测定使肾小管功能试验变得简单、灵敏、快速肾小管功能试验变得简单、灵敏、快速1.浓缩稀释试验浓缩稀释试验评价肾小管的重吸收功能评价肾小管的重吸收功能在日常或特定的饮食条件下，观察病人在日常或特定的饮食条件下，观察病人的尿量和尿比重的变化，用以判断肾浓的尿量和尿比重的变化，用以判断肾浓缩与稀释功能的方法称为缩与稀释功能的方法称为浓缩稀释试验浓缩稀释试验（concentration-dilutiontest）原理原理 肾脏调节水份和渗透压的功能决

44、定机体的肾脏调节水份和渗透压的功能决定机体的尿量和尿比重的变化。尿量和尿比重的变化。当大量饮水后，远曲小管和集合管对水的当大量饮水后，远曲小管和集合管对水的吸收减少，排尿增多，比重降低，表示其吸收减少，排尿增多，比重降低，表示其稀释功能良好；稀释功能良好；限制饮水后，对水的吸收增加，排尿减少，限制饮水后，对水的吸收增加，排尿减少，表示其浓缩功能良好。表示其浓缩功能良好。在肾脏疾病时，由于远曲小管和集合管的在肾脏疾病时，由于远曲小管和集合管的损伤，对水的重吸收功能减退，其浓缩损伤，对水的重吸收功能减退，其浓缩-稀释功能发生障碍稀释功能发生障碍方法方法莫氏（莫氏（Mosenthal)Mosenth

45、al)试验：病人正常饮食，试验：病人正常饮食，日食三餐，每餐含水量不超过日食三餐，每餐含水量不超过 500-500-600ml600ml，此外不再进食和饮水；注意饮食，此外不再进食和饮水；注意饮食，其中要求水含量在其中要求水含量在500-600ml500-600ml之间，早之间，早晨晨8 8时到晚上时到晚上8 8时，每时，每2 2小时收集一次，晚小时收集一次，晚8 8时到次晨时到次晨8 8时时1212小时全部收集在清洁的小时全部收集在清洁的标本瓶中标本瓶中正常参考值正常参考值24h24h尿量尿量1000-2000 ml1000-2000 ml昼夜尿量之比昼夜尿量之比3-4:13-4:112h1

46、2h夜尿夜尿750 ml0.0090.009临床意义临床意义肾功能不全时，夜间尿量可超过肾功能不全时，夜间尿量可超过750ml750ml最高比重小于最高比重小于1.0181.018表示肾浓缩功能不全表示肾浓缩功能不全尿比重相差很小，比重固定在尿比重相差很小，比重固定在1.0101.010左右，表左右，表示肾浓缩功能严重障碍示肾浓缩功能严重障碍2.2.尿渗量（渗透压）的测定尿渗量（渗透压）的测定原理原理 液体的渗透压是由溶液中溶质的毫摩尔浓度决液体的渗透压是由溶液中溶质的毫摩尔浓度决定的。尿液渗透压反映尿中物质的摩尔数。而定的。尿液渗透压反映尿中物质的摩尔数。而与物质微粒的种类及性质无关，测定尿

47、渗量比与物质微粒的种类及性质无关，测定尿渗量比测定尿比重更好地反映肾浓缩和稀释能力测定尿比重更好地反映肾浓缩和稀释能力正常参考值正常参考值 尿液为尿液为600-1000mOsm/kgH600-1000mOsm/kgH2 2O O，平均，平均800mOsm/kgH800mOsm/kgH2 2O O，血浆平均值为血浆平均值为275-305 mOsm/kgH275-305 mOsm/kgH2 2O O 尿渗量与血浆渗量比值为尿渗量与血浆渗量比值为34:134:13.3.尿液酶的测定尿液酶的测定尿液中含有数十种酶尿液中含有数十种酶血清酶进入尿液：当肾小球滤过增加而肾小管血清酶进入尿液：当肾小球滤过增加

48、而肾小管重吸收功能紊乱，血清酶进入尿液，活性增强重吸收功能紊乱，血清酶进入尿液，活性增强细胞酶释放入尿液：肾小球病变、肾小管细胞细胞酶释放入尿液：肾小球病变、肾小管细胞破坏，间质炎症等使细胞破坏，细胞酶释放入破坏，间质炎症等使细胞破坏，细胞酶释放入尿液使溶酶体酶增加尿液使溶酶体酶增加泌尿生殖系统肿瘤、炎症、红细胞、细菌等也泌尿生殖系统肿瘤、炎症、红细胞、细菌等也可使尿酶增加可使尿酶增加常见的测定酶常见的测定酶N-N-乙酰乙酰-氨基葡萄糖（氨基葡萄糖（NAGNAG）、）、LDHLDH、-谷谷氨酰转移酶、溶菌酶氨酰转移酶、溶菌酶血清脂类的血清脂类的生物化学检测生物化学检测概述概述血浆脂类包括游离胆

49、固醇（血浆脂类包括游离胆固醇（FCFC）、胆固）、胆固醇酯醇酯(CE)(CE)、磷脂（、磷脂（PLPL）、甘油三酯）、甘油三酯（TGTG）、糖脂和游离脂肪酸（）、糖脂和游离脂肪酸（FFAFFA）等）等血浆中最多的脂质为胆固醇、血浆中最多的脂质为胆固醇、PLPL和和TGTG，游离胆固醇和胆固醇酯称为总胆固醇游离胆固醇和胆固醇酯称为总胆固醇血浆脂类以脂蛋白复合体的形式存在血浆脂类以脂蛋白复合体的形式存在血浆脂蛋白分类：血浆脂蛋白分类：CMCM、VLDLVLDL、IDLIDL、LDLLDL、HDLHDL和和Lp(a)Lp(a)1.1.血清总胆固醇测定血清总胆固醇测定TCHTCH酶比色法酶比色法 胆固

50、醇酯在胆固醇酯酶的作用下分解生胆固醇酯在胆固醇酯酶的作用下分解生成胆固醇，胆固醇在胆固醇氧化酶及过成胆固醇，胆固醇在胆固醇氧化酶及过氧化物酶作用下最终生成醌亚胺，醌亚氧化物酶作用下最终生成醌亚胺，醌亚胺的颜色深浅与胆固醇的浓度成正比。胺的颜色深浅与胆固醇的浓度成正比。临床意义临床意义 胆固醇的监测用于评估罹患动脉硬化的风险胆固醇的监测用于评估罹患动脉硬化的风险以及对脂类以及对脂类/脂蛋白的代谢紊乱进行诊断和监脂蛋白的代谢紊乱进行诊断和监测治疗。测治疗。增高见于糖尿病昏迷患者，还常见于原发性增高见于糖尿病昏迷患者，还常见于原发性高胆固醇血症、动脉粥样硬化、肾病综合征、高胆固醇血症、动脉粥样硬化、