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1、血栓与止血检验血栓与止血检验临床临床血液血液学和学和血液血液检验检验【学习目的和要求学习目的和要求】1 1掌握血栓止血的筛选试验、血掌握血栓止血的筛选试验、血小板检验、凝血因子检验和纤溶小板检验、凝血因子检验和纤溶活性检验。活性检验。2 2了解血液流变学检验。了解血液流变学检验。.了解纤维蛋白溶解系统及血液流变学。第一节第一节 血栓与止血筛选检验血栓与止血筛选检验一期止血筛选检验一期止血筛选检验二期止血缺陷的筛选检验二期止血缺陷的筛选检验共同途径筛选检验共同途径筛选检验纤溶活性增强筛选检验纤溶活性增强筛选检验 一期止血一期止血出血时间(出血时间(BTBT)血小板计数(血小板计数(PLTPLT)
2、检验检验一期止血筛选检验一期止血筛选检验出血时间出血时间【原理原理】是指刺伤毛细血管后自然出血到是指刺伤毛细血管后自然出血到自然止血所需的时间。自然止血所需的时间。主要用于检测毛细血管结构和功主要用于检测毛细血管结构和功能、血小板数量和质量以及两者之间能、血小板数量和质量以及两者之间相互作用的影响。相互作用的影响。出血时间(出血时间(Bleeding time,BT)一期止血筛选检验一期止血筛选检验出血时间出血时间【方法】血压血压4040mmHgmmHg,刀片刀片长长6 6mmmm,刺入皮肤刺入皮肤深度深度1 1mmmm,肘前窝肘前窝下下5 5cmcm尺侧皮肤。尺侧皮肤。一期止血筛选检验一期止
3、血筛选检验出血时间出血时间【参考值参考值】6.886.882.082.08minmin【临床意义】BTBT延长见于延长见于血管性血友病;血管性血友病;血血管壁结构异常;管壁结构异常;血小板明显减少或增血小板明显减少或增多症;多症;血小板功能异常;血小板功能异常;严重缺乏严重缺乏血浆某些凝血因子、血浆某些凝血因子、DICDIC等;等;纤溶亢进纤溶亢进症症;药物干扰,如乙酰水杨酸、潘生药物干扰,如乙酰水杨酸、潘生丁等。丁等。BTBT缩短见于缩短见于血栓前状态和血栓性疾血栓前状态和血栓性疾病;病;药物如促红细胞增多症等。药物如促红细胞增多症等。一期止血筛选检验一期止血筛选检验出血时间出血时间【原理原
4、理】计数单位容积内血小板的含量计数单位容积内血小板的含量【方法方法】普通光镜直接计数法普通光镜直接计数法 相差显微镜直接计数法相差显微镜直接计数法 参考方参考方法法 血分析仪法血分析仪法血小板计数血小板计数(platelet count,PLT 或或blood platelet count,BPC)一期止血筛选检验一期止血筛选检验血小板计数血小板计数【参考值】参考值】100 100300300G/LG/L 【临床意义】【临床意义】减低见于减低见于血小板生成减少;血小板生成减少;血小血小板破坏过多;板破坏过多;血小板消耗过多。血小板消耗过多。增多见于增多见于慢性粒细胞性白血病、真性慢性粒细胞性白
5、血病、真性红细胞增多症、急性化脓性感染、急性红细胞增多症、急性化脓性感染、急性出血后及脾切除手术后等。出血后及脾切除手术后等。一期止血筛选检验一期止血筛选检验血小板计数血小板计数 一期止血的筛检试验临床意义一期止血的筛检试验临床意义 BT PLT BT PLT 原因原因延长延长 减少减少 血小板减少血小板减少 延长延长 增多增多 血小板增多血小板增多 延长延长 正常正常 血小板功能缺陷血小板功能缺陷 延长延长 正常正常 血管异常血管异常 正常正常 正常正常 血管脆性增加血管脆性增加一期止血筛选检验一期止血筛选检验临床意义临床意义 二期止血二期止血一期止血一期止血二期止血筛选检验二期止血筛选检验
6、 TF +Ca2+TF+Ca2+PF3 +Ca2+PF3 APTT内源性凝血途径内源性凝血途径外源性凝血途径外源性凝血途径共同途径共同途径二期止血筛选检验二期止血筛选检验 二期止血缺陷的筛选检验二期止血缺陷的筛选检验全血凝固时间全血凝固时间活化部分凝血活酶时间活化部分凝血活酶时间凝血酶原时间凝血酶原时间 离体静脉血发生凝固所需要的离体静脉血发生凝固所需要的时间反映内源凝血途径功能。时间反映内源凝血途径功能。活化凝血时间(活化凝血时间(activated activated clotting time,ACTclotting time,ACT)(最敏感)(最敏感)硅管法(较敏感)硅管法(较敏感)
7、普通试管法普通试管法二期止血筛选检验二期止血筛选检验全血凝固时间全血凝固时间全血凝固时间(全血凝固时间(coagulation time,CT)【原理】原理】向血浆中加入足量激活剂(白向血浆中加入足量激活剂(白陶土)和部分凝血活酶(脑磷脂)陶土)和部分凝血活酶(脑磷脂)和和CaCa2+2+,从加入到血浆凝固所需的从加入到血浆凝固所需的时间。时间。二期止血筛选检验二期止血筛选检验活化部分凝血活酶时间活化部分凝血活酶时间活化部分凝血活酶时间活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)【方法】【方法】手工法手工法参考方法参考方法 仪器法
8、:光学法(比浊法)、电仪器法:光学法(比浊法)、电流法、磁珠法流法、磁珠法二期止血筛选检验二期止血筛选检验活化部分凝血活酶时间活化部分凝血活酶时间【质量控制】质量控制】标本采集和处理标本采集和处理 患者准备患者准备停药停药1 1周以上周以上;抗凝剂:抗凝剂:0.1090.109M M枸椽酸钠,枸椽酸钠,1:9;1:9;采血:止血带、采血:止血带、容器、一针见血容器、一针见血;立即分离血浆、室温立即分离血浆、室温F F 易失活,易失活,2h2h内完成。内完成。激活剂:白陶土激活剂:白陶土(此时(此时APTTAPTT又称又称kaolin kaolin partial partial thrombo
9、plastinthromboplastin time,KPTT time,KPTT),硅藻土、鞣花酸。硅藻土、鞣花酸。部分凝血活酶(脑磷脂)部分凝血活酶(脑磷脂)二期止血筛选检验二期止血筛选检验活化部分凝血活酶时间活化部分凝血活酶时间【参考值】参考值】25253535s s【临床意义】【临床意义】APTT APTT结果超过正常对照结果超过正常对照1010s s以上的即为延长。以上的即为延长。是目前推荐应用的内源性凝血系统的筛选试是目前推荐应用的内源性凝血系统的筛选试验。是监测肝素的首选指标。治疗时验。是监测肝素的首选指标。治疗时APTTAPTT维持维持在正常对照在正常对照1.51.53 3。0
10、 0 延长:内源性凝血途径和共同途径因子减少延长:内源性凝血途径和共同途径因子减少或缺乏;血中含有抗凝物质;纤溶亢进等。或缺乏;血中含有抗凝物质;纤溶亢进等。缩短:见于高凝状态,如缩短:见于高凝状态,如DICDIC的高凝血期等;的高凝血期等;血栓性疾病。血栓性疾病。二期止血筛选检验二期止血筛选检验活化部分凝血活酶时间活化部分凝血活酶时间【原理】原理】向血浆中加入足量的组织凝血活酶向血浆中加入足量的组织凝血活酶(TFTF)和和CaCa2+2+,从加入到血浆凝固所需从加入到血浆凝固所需的时间。的时间。二期止血筛选检验二期止血筛选检验凝血酶原时间凝血酶原时间凝血酶原时间凝血酶原时间(prothrom
11、bin time,PT)PTR=病人病人PT值(秒)值(秒)平均正常平均正常PT值(秒)值(秒)ISIINR=PTR【方法】【方法】手工法手工法参考方法参考方法 仪器法:光学法(比浊法)、电仪器法:光学法(比浊法)、电流法、磁珠法流法、磁珠法二期止血筛选检验二期止血筛选检验凝血酶原时间凝血酶原时间【质量控制】质量控制】1 1、标本采集和处理、标本采集和处理 患者准备:停药患者准备:停药1 1周以上周以上;抗凝剂:抗凝剂:0.1090.109M M枸椽酸钠,枸椽酸钠,1:9;1:9;采血:止血带、容器、一针见血采血:止血带、容器、一针见血;立即分离血浆、室温立即分离血浆、室温F F 易失活,易失
12、活,2h2h内完成。内完成。二期止血筛选检验二期止血筛选检验凝血酶原时间凝血酶原时间【质量控制】质量控制】2 2、组织凝血活酶试剂质量、组织凝血活酶试剂质量3 3、国际敏感指数(、国际敏感指数(ISIISI):):表示标准品表示标准品组织凝血活酶与每批组织凝血活酶组织凝血活酶与每批组织凝血活酶PTPT校校正曲线的斜率。正曲线的斜率。4 4、报告方式、报告方式 病人病人PTPT(s s)及正常对照及正常对照PTPT(s s)PTR PTR;INRINR二期止血筛选检验二期止血筛选检验凝血酶原时间凝血酶原时间【参考值】参考值】PTPT:111115s 15s;PTRPTR:0.850.851.15
13、1.15,超过正常超过正常对照对照3 3s s以上的即为延长。以上的即为延长。【临床意义】【临床意义】是外源性凝血因子缺陷的筛选试验。是外源性凝血因子缺陷的筛选试验。PTPT延长或延长或PTRPTR增大:增大:外源性凝血途径和共同外源性凝血途径和共同途径因子减少或缺乏;血中含有抗凝物质;纤途径因子减少或缺乏;血中含有抗凝物质;纤溶亢进等。溶亢进等。PTPT缩短或缩短或PTRPTR降低:降低:见于先天性因子见于先天性因子增多增多症、口服避孕药和血栓前状态或血栓性疾病、症、口服避孕药和血栓前状态或血栓性疾病、DICDIC早期。早期。INRINR是监测口服抗凝剂的首选指标,国人以是监测口服抗凝剂的首
14、选指标,国人以2 23 3为宜。为宜。二期止血筛选检验二期止血筛选检验凝血酶原时间凝血酶原时间 二期止血缺陷的筛检试验二期止血缺陷的筛检试验 原原 因因 PT APTT 外源途径缺陷外源途径缺陷 A N 内源途径缺陷内源途径缺陷 N A 共同途径缺陷共同途径缺陷 A A 血中有抗凝物质血中有抗凝物质 A A二期止血筛选检验二期止血筛选检验临床意义临床意义FgFgFMFMFbFbX X、Y Y、D D、E,E,B B1-421-42,A A、B B、C C、H HX X,、Y Y,、D D、E E,B B15-4215-42,A A、B B、C C、H HX X、Y Y、D D、E,E,DDDD
15、PLPLPLPLPLPLF FaaF FPA/BPA/BF Fa a纤溶活性增强筛选检验纤溶活性增强筛选检验纤维蛋白溶解机制及产物纤维蛋白溶解机制及产物【原理】原理】胶乳凝集试验:胶乳凝集试验:纤溶活性增强筛选检验纤溶活性增强筛选检验FDP纤维蛋白(原)降解产物纤维蛋白(原)降解产物F(g)DP检测检测 FDP抗抗FDP【参考值】【参考值】血清血清FDP5mg/LFDP5mg/L;尿尿FDP2817g/L FDP2817g/L【临床意义】【临床意义】血液中血液中FDPFDP增高:原、继发纤溶亢进,增高:原、继发纤溶亢进,溶栓治疗等。溶栓治疗等。尿中尿中FDPFDP增高:见于急性肾炎、慢性肾增高
16、:见于急性肾炎、慢性肾炎、尿毒症、肾移植术后排斥反应、妊炎、尿毒症、肾移植术后排斥反应、妊娠毒血症以及娠毒血症以及DICDIC等。等。纤溶活性增强筛选检验纤溶活性增强筛选检验FDP【原理】原理】胶乳凝集试验:胶乳凝集试验:纤溶活性增强筛选检验纤溶活性增强筛选检验DD2、D-二聚体(二聚体(D-dimer,DD)DD抗DD【参考值】参考值】阴性或阴性或0.50.5mg/L mg/L【临床意义】【临床意义】DDDD在继发性纤溶症时升高,而在原发在继发性纤溶症时升高,而在原发性纤溶症时正常,这是鉴别两者的重要性纤溶症时正常,这是鉴别两者的重要依据。高凝状态、血栓性疾病和依据。高凝状态、血栓性疾病和D
17、ICDIC时、时、血浆血浆DDDD体明显升高,是诊断体明显升高,是诊断DICDIC的重要依的重要依据。据。纤溶活性增强筛选检验纤溶活性增强筛选检验DD 原发性纤溶与继发性纤溶的鉴别原发性纤溶与继发性纤溶的鉴别 原原 因因 FDP D-FDP D-dimerdimer 原发性纤溶原发性纤溶 增高增高 阴性阴性 继发性纤溶继发性纤溶 增高增高 阳性阳性 溶栓治疗溶栓治疗 增高增高 阳性阳性纤溶活性增强筛选检验纤溶活性增强筛选检验第二节第二节 血管壁(内皮)检验血管壁(内皮)检验 血管性血友病因子抗原检测血管性血友病因子抗原检测血浆内皮素血浆内皮素-1-1检测检测血浆血栓调节蛋白抗原检测血浆血栓调节
18、蛋白抗原检测【原理】原理】ELISAELISA或其它免疫学方法或其它免疫学方法【参考值】参考值】94.1%32.5%94.1%32.5%【临床意义】【临床意义】减低血管性血友病,是诊断减低血管性血友病,是诊断v vWDWD及其及其分型分型的重要指标。增高:见于血栓性疾病如心肌的重要指标。增高:见于血栓性疾病如心肌梗死、脑血栓等。梗死、脑血栓等。血管壁检验血管壁检验血管性血友病因子血管性血友病因子血管性血友病因子抗原(v vWF:Ag)检测【原理】原理】在瑞斯托霉素存在的条件下,在瑞斯托霉素存在的条件下,vWFvWF通过与通过与血小板血小板GPb/GPb/相互作用,使血小板发生相互作用,使血小板
19、发生凝集。凝集强度与受检血浆中的凝集。凝集强度与受检血浆中的vWFvWF量和量和(或)质有关。(或)质有关。【参考值】参考值】5050%150%150%【临床意义】【临床意义】血小板对瑞斯托霉素的诱导不产生聚集血小板对瑞斯托霉素的诱导不产生聚集,是是vWDvWD的特异性诊断试验之一,的特异性诊断试验之一,是诊断是诊断v vWDWD及其及其分型的重要指标。分型的重要指标。血管壁检验血管壁检验血管性血友病因子血管性血友病因子瑞斯托霉素因子瑞斯托霉素因子(vWFvWF:RcofRcof)活性检测活性检测 【原理】原理】ELISAELISA或其它免疫学方法或其它免疫学方法【参考值】【参考值】55ngn
20、g/L/L【临床意义】临床意义】可了解血管内皮损伤程度,进行血栓性疾可了解血管内皮损伤程度,进行血栓性疾病流行病学研究的指标。病流行病学研究的指标。增高:见于心肌梗死、心绞痛、缺血性脑增高:见于心肌梗死、心绞痛、缺血性脑卒中、肾功能衰竭、醛固酮增多症、支气管卒中、肾功能衰竭、醛固酮增多症、支气管哮喘、妊高征等。哮喘、妊高征等。血管壁检验血管壁检验内皮素内皮素-1血浆内皮素血浆内皮素-1-1(ET-1ET-1)检测检测【原理】原理】ELISAELISA或其它免疫学方法或其它免疫学方法【参考值】【参考值】TM:Ag 25TM:Ag 2552g/L52g/L【临床意义】临床意义】是了解血管内皮损伤的
21、最好指标。增高:是了解血管内皮损伤的最好指标。增高:见于糖尿病、见于糖尿病、DICDIC、血栓性血小板减少性紫癜、血栓性血小板减少性紫癜、SLESLE、血栓性疾病如心肌梗死、脑血栓等。血栓性疾病如心肌梗死、脑血栓等。血管壁检验血管壁检验TM血浆血栓调节蛋白抗原血浆血栓调节蛋白抗原(TM:Ag)TM:Ag)检测检测第三节第三节 血小板检验血小板检验血小板相关抗体检测血小板相关抗体检测血小板粘附试验血小板粘附试验血小板聚集试验血小板聚集试验血小板膜糖蛋白检测血小板膜糖蛋白检测-血小板球蛋白和血小板第血小板球蛋白和血小板第4 4因子检测因子检测血小板血小板P P选择素检测选择素检测【原理】原理】EL
22、ISAELISA【参考值】【参考值】PAIgG PAIgG 0 078.8ng/1078.8ng/107 7血小板,血小板,PAIgMPAIgM 0 07.0 7.0 ngng/10/107 7血小板,血小板,PAIgAPAIgA 0 02 2 ngng/10/107 7血小板血小板【临床意义】【临床意义】急性和慢性原发性血小板减少性紫癜,急性和慢性原发性血小板减少性紫癜,显著增高。显著增高。血小板检验血小板检验血小板抗体血小板抗体血小板相关抗体检测血小板相关抗体检测【原理】原理】血小板检验血小板检验粘附试验粘附试验血小板粘附试验血小板粘附试验(platelet(platelet adhens
23、ion adhension test,test,PAdTPAdT)【参考值】【参考值】玻璃柱法玻璃柱法53.9%53.9%70.1%70.1%【临床意义】【临床意义】增高:见于血栓前状态和血栓性疾病。增高:见于血栓前状态和血栓性疾病。减低:见于减低:见于vDWvDW、巨大血小板综合征、巨大血小板综合征、血小板无力症、肝硬化、尿毒症、血小板无力症、肝硬化、尿毒症、MDSMDS、抗血小板药物等。抗血小板药物等。血小板检验血小板检验粘附试验粘附试验【原理【原理】在富血小板血浆中加入致敏剂,血小在富血小板血浆中加入致敏剂,血小板发生聚集,浊度减低,透光度增加。板发生聚集,浊度减低,透光度增加。记录变化
24、曲线,了解血小板聚集程度和记录变化曲线,了解血小板聚集程度和速度。速度。血小板检验血小板检验聚集试验聚集试验血小板聚集试验血小板聚集试验(platelet platelet aggrregation aggrregation test,test,PAgTPAgT)【参考值】【参考值】因方法和致聚剂而异。因方法和致聚剂而异。【临床意义】【临床意义】增高:增高:血小板聚集功能增强,见于血小板聚集功能增强,见于高凝状态和(或)血栓前状态和血栓性高凝状态和(或)血栓前状态和血栓性疾病。疾病。减低:减低:见于巨大血小板综合征、血见于巨大血小板综合征、血小板无力症、肝硬化、尿毒症、小板无力症、肝硬化、尿毒
25、症、MDSMDS、抗血小板药物等。抗血小板药物等。血小板检验血小板检验聚集试验聚集试验【参考值】【参考值】GPIaGPIa:(1.540.491.540.49)10104 4分子数分子数/血小板血小板;GPIIb GPIIb/a:/a:(5.451.195.451.19)10104 4分子数分子数/血小板血小板【临床意义】【临床意义】增增高高:反反应应血血小小板板被被活活化化,见见于于血血栓栓前状态和前状态和/或血栓性疾病。或血栓性疾病。GPI GPI缺乏见于巨大血小板综合征缺乏见于巨大血小板综合征;GPIIb GPIIb/a/a缺乏见于血小板无力症。缺乏见于血小板无力症。血小板检验血小板检验
26、膜糖蛋白膜糖蛋白血小板膜糖蛋白(血小板膜糖蛋白(GPGP)检测检测【参考值】【参考值】-TG-TG:6.66.626.2g/L26.2g/L PF PF4 4:0.90.95.5g/L5.5g/L 【临床意义】临床意义】两者临床意义相同。两者临床意义相同。增增高高:反反应应血血小小板板被被激激活活及及其其释释放放反反应应亢亢进进,见于血栓前状态和(或)血栓性疾病。见于血栓前状态和(或)血栓性疾病。减减低低:见见于于先先天天性性或或获获得得性性贮贮存存池池病病(颗颗粒缺陷症)。粒缺陷症)。血小板检验血小板检验-TG、PF4 -血小板球蛋白(血小板球蛋白(-TG-TG)和血小板第和血小板第4 4因
27、子(因子(PFPF4 4)检测检测【参考值】【参考值】(9000110090001100)分子数)分子数/血小板血小板【临床意义】【临床意义】增增高高:反反应应血血小小板板被被激激活活及及其其释释放放反反应应亢亢进进,见见于于血血栓栓前前状态和(或)血栓性疾病。状态和(或)血栓性疾病。血小板检验血小板检验P选择素选择素血小板血小板P P选择素检测选择素检测第四节第四节 凝血因子检验凝血因子检验纤维蛋白原含量检测纤维蛋白原含量检测血浆因子血浆因子、促凝活性测定促凝活性测定血浆因子血浆因子、促凝活性测定促凝活性测定血浆因子血浆因子定性试验定性试验【原理】原理】ClouseClouse法:法:在受检
28、血浆中加入凝血酶,血在受检血浆中加入凝血酶,血浆凝固所需的时间与浆凝固所需的时间与Fg含量多少呈负相关。含量多少呈负相关。【方法】【方法】ClouseClouse法:参考方法法:参考方法 其它:免疫法、比浊法、化学法其它:免疫法、比浊法、化学法【质量控制】质量控制】同同PTPT凝血因子检验凝血因子检验纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)含量检含量检测测【参考值】参考值】Clouse Clouse法:法:2 24 4g/L g/L【临床意义】【临床意义】增高:组织坏死和炎症:增高:组织坏死和炎症:AMIAMI发作期、发作期、急性感染、急性肾炎和尿毒症、结缔组急性
29、感染、急性肾炎和尿毒症、结缔组织病、大手术后、妊娠晚期和妊高症;织病、大手术后、妊娠晚期和妊高症;糖尿病、恶性肿瘤等。糖尿病、恶性肿瘤等。减少:减少:DICDIC和原发性纤溶症、重症肝炎和原发性纤溶症、重症肝炎和肝硬化等。和肝硬化等。凝血因子检验凝血因子检验纤维蛋白原纤维蛋白原凝血因子检验凝血因子检验、促凝活性促凝活性血浆因子血浆因子、促凝活性测定促凝活性测定【原理】【原理】于缺乏因子于缺乏因子、的血的血浆中,加入正常血浆或病人的受检血浆中,加入正常血浆或病人的受检血浆,再加入浆,再加入组织凝血活酶(组织凝血活酶(TFTF)和和CaCa2+2+,分别作,分别作PTPT测定。从各自的标准曲测定。
30、从各自的标准曲线中计算出结果。线中计算出结果。凝血因子检验凝血因子检验、促凝活性促凝活性血浆因子血浆因子、促凝活性测定促凝活性测定【参考值】【参考值】F:CF:C 81.0%81.0%114.4%114.4%;F:CF:C 71.5%71.5%133.3%133.3%;F:CF:C 85.7%85.7%120.3%120.3%;F:CF:C 84.0%84.0%122.0%122.0%【临床意义】临床意义】增高增高主要见于血栓前状态和血栓性疾主要见于血栓前状态和血栓性疾病。病。减低减低主要见于减低:主要见于先天性主要见于减低:主要见于先天性因子因子、缺乏症;获得性主缺乏症;获得性主要见于肝病、
31、要见于肝病、VitKVitK缺乏、缺乏、DICDIC、口服抗口服抗凝药等。凝药等。凝血因子检验凝血因子检验、促凝活性促凝活性血浆因子血浆因子、促凝活性测定促凝活性测定【原理】【原理】于缺乏因子于缺乏因子、或或的血的血浆中,加入正常血浆或病人的受检血浆中,加入正常血浆或病人的受检血浆,再加入浆,再加入白陶土脑磷脂悬液和白陶土脑磷脂悬液和CaCa2+2+,分别作分别作APTTAPTT测定。从各自的标准曲测定。从各自的标准曲线中计算出结果。线中计算出结果。凝血因子检验凝血因子检验、促凝活性促凝活性血浆因子血浆因子、促凝活性测定促凝活性测定【参考值】【参考值】F:C 77.3%F:C 77.3%128
32、.7%128.7%;F:C 67.6%F:C 67.6%128.5%128.5%;F:C 81.6%F:C 81.6%118.4%118.4%;F:C 71.7%F:C 71.7%113.1%113.1%【临床意义】临床意义】增高增高主要见于血栓前状态和血栓性疾病。主要见于血栓前状态和血栓性疾病。减减低低:F:CF:C、F:CF:C、F:CF:C减减低低分分别别见见于于血血友友病病A A、血血友友病病B B和和FF缺缺乏乏症症。肝肝病病、VitKVitK缺乏、缺乏、DICDIC、口服抗凝药等。口服抗凝药等。凝血因子检验凝血因子检验定性定性血浆因子血浆因子定性试验定性试验【原理】【原理】于于受受
33、检检血血浆浆中中加加入入CaCa2+2+,将将形形成成的的纤纤维维蛋蛋白白凝凝块块置置于于5 5mol/Lmol/L的的尿尿素素溶溶液液中中,若若2424h h内内纤维蛋白凝块溶解,表示纤维蛋白凝块溶解,表示缺乏。缺乏。【参考值】【参考值】24 24h h内纤维蛋白凝块不溶解内纤维蛋白凝块不溶解【临床意义】【临床意义】若若2424h h内纤维蛋白凝块溶解,表示内纤维蛋白凝块溶解,表示缺乏。缺乏。生理性抗凝蛋白检测生理性抗凝蛋白检测 生理性抗凝蛋白检测生理性抗凝蛋白检测 生理性抗凝蛋白检测生理性抗凝蛋白检测 生理性抗凝蛋白检测生理性抗凝蛋白检测 生理性抗凝蛋白检测生理性抗凝蛋白检测 生理性抗凝蛋
34、白检测生理性抗凝蛋白检测 生理性抗凝蛋白检测生理性抗凝蛋白检测 生理性抗凝蛋白检测生理性抗凝蛋白检测 第五节第五节 生理性抗凝蛋白检测生理性抗凝蛋白检测 抗凝血酶活性检测抗凝血酶活性检测蛋白蛋白C活性检测活性检测组织因子途径抑制物检测组织因子途径抑制物检测生理性抗凝蛋白检测生理性抗凝蛋白检测抗凝血酶抗凝血酶抗凝血酶活性(抗凝血酶活性(AT:A)检测检测【原理】【原理】受受检检血血浆浆中中加加入入过过量量凝凝血血酶酶,使使ATAT与与凝凝血血酶酶形形成成1:11:1复复合合物物,剩剩余余的的凝凝血血酶酶作作用用于于发发色色底底物物S-2238S-2238,释释出出发发色色基基团团对对硝硝基基苯苯
35、胺胺(PNAPNA),显显色色深深浅浅与与剩剩余余的的凝凝血血酶酶成成正正相相关关,与与ATAT呈呈负负相相关关;根根据据A A值从标准曲线计算出值从标准曲线计算出AT:AAT:A。生理性抗凝蛋白检测生理性抗凝蛋白检测抗凝血酶抗凝血酶【参考值】【参考值】AT:A AT:A:103.2%103.2%113.8%113.8%【临床意义】临床意义】增增高高见见于于血血友友病病、白白血血病病和和再再生生障障碍碍性贫血等的急性出血期及口服抗凝药。性贫血等的急性出血期及口服抗凝药。减减低低见见于于先先天天性性或或获获得得性性ATAT缺缺乏乏症症,后后者者见见于于血血栓栓前前状状态态、血血栓栓性性疾疾病病、
36、DICDIC和肝脏疾病等。和肝脏疾病等。抗凝血酶活性(抗凝血酶活性(AT:A)检测检测生理性抗凝蛋白检测生理性抗凝蛋白检测蛋白蛋白C活性活性【原理】【原理】发发色色底底物物法法:受受检检血血浆浆中中加加入入PCPC激激活活剂剂,PCPC被被激激活活为为APCAPC,作作用用于于发发色色底底物物PCAPCA,释释出出发发色色基基团团PNAPNA,显显色色深深浅浅与与PCPC成成正正相相关关,根根据据A A值值从从标标准准曲曲线线计计算算出出PC:APC:A。蛋白蛋白C活性(活性(PC:A)检测检测生理性抗凝蛋白检测生理性抗凝蛋白检测蛋白蛋白C活性活性【参考值】【参考值】发色底物法:发色底物法:8
37、7.02%87.02%113.38%113.38%【临床意义】【临床意义】减减低低:先先天天性性或或获获得得性性PCPC缺缺乏乏症症,后后者者见见于于DICDIC、肝肝病病、手手术术后后、口口服服抗抗凝凝剂、急性呼吸窘迫综合征等。剂、急性呼吸窘迫综合征等。蛋白蛋白C活性(活性(PC:A)检测检测生理性抗凝蛋白检测生理性抗凝蛋白检测TFPT【参考值】【参考值】ELISA70.9 ELISA70.9124.1g/L124.1g/L【临床意义】临床意义】减减低低:严严重重创创伤伤、广广泛泛手手术术、脓脓毒毒血血症、休克、症、休克、DICDIC、血栓性疾病。血栓性疾病。增高:老年人、妊娠、肾衰竭等。增
38、高:老年人、妊娠、肾衰竭等。组织因子途径抑制物(组织因子途径抑制物(TFPT)检检 测测第六节第六节 病理性抗凝物质检验病理性抗凝物质检验复钙交叉试验复钙交叉试验凝血酶时间凝血酶时间凝血酶时间纠正试验凝血酶时间纠正试验病理性抗凝物质检验病理性抗凝物质检验复钙交叉试验复钙交叉试验 复复钙钙时时间间(RTRT)延延长长的的血血浆浆能能被被1/101/10正正常常血血浆浆纠纠正正,则则说说明明凝凝血血因因子子异异常常,复复钙钙时时间间不不在在正正常常范范围围之之内内(2.22.23.83.8minmin),则则认认为为受受检检血血浆浆中中存存在在异异常常抗抗凝凝物物质质。后后者者见见于于反反复复输输
39、血血的的血血友友病病患患者者、严严重重肝肝脏脏病、病、SLESLE、类风湿关节炎等。类风湿关节炎等。复钙交叉试验复钙交叉试验(cross recalcification test,CRT)【原理】原理】在受检血浆中加入凝血酶,从加入到在受检血浆中加入凝血酶,从加入到血浆凝固所需的时间。血浆凝固所需的时间。【方法】【方法】同同PTPT【质量控制】质量控制】同同PTPT病理性抗凝物质检验病理性抗凝物质检验凝血酶时间凝血酶时间凝血酶时间凝血酶时间(thrombin time,TT)【参考值】参考值】透射比浊法透射比浊法16161818s s,超过正常对照超过正常对照3 3s s以上为延长。以上为延长
40、。【临床意义】【临床意义】反映共同途径是否异常。反映共同途径是否异常。延长:低延长:低(无无)纤维蛋白原血症、纤溶纤维蛋白原血症、纤溶亢进、抗凝物质存在等。见于亢进、抗凝物质存在等。见于DICDIC、FDPFDP增多等;肝素或类肝素物质增多。增多等;肝素或类肝素物质增多。病理性抗凝物质检验病理性抗凝物质检验凝血酶时间凝血酶时间病理性抗凝物质检验病理性抗凝物质检验凝血酶时间纠正试验凝血酶时间纠正试验 TTTT延延长长的的血血浆浆中中加加入入甲甲苯苯胺胺蓝蓝后后,TTTT缩缩短短5 5秒秒以以上上,提提示示受受检检血血浆浆中中有有肝肝素素类类或或肝肝素素类类物物质质增增多多;若若不不缩缩短短,表表
41、示示受受检检血血浆浆中中存存在在其它抗凝血酶类物质或纤维蛋白原缺陷。其它抗凝血酶类物质或纤维蛋白原缺陷。在过敏性休克、应用氮芥、放疗后、严重在过敏性休克、应用氮芥、放疗后、严重肝脏病、肝叶切除术后、肝移植后患者血浆肝脏病、肝叶切除术后、肝移植后患者血浆中有肝素或类肝素增多,肝素治疗的患者,中有肝素或类肝素增多,肝素治疗的患者,其延长的其延长的TTTT也可被纠正。也可被纠正。凝血酶时间纠正试验凝血酶时间纠正试验(甲苯胺蓝纠正试验甲苯胺蓝纠正试验)第七节第七节 纤溶活性检验纤溶活性检验血浆鱼精蛋白副凝集试验血浆鱼精蛋白副凝集试验组织型纤溶酶原激活物组织型纤溶酶原激活物 测定测定纤纤溶酶原活化抑制物
42、活性测定溶酶原活化抑制物活性测定血浆纤溶酶原活性血浆纤溶酶原活性 测定测定2 2-抗抗纤溶酶活性纤溶酶活性 测定测定sctsct-PA-PAtcutcu-PA-PAscuscu-PA-PAtcttct-PA-PAPLGPLGPLPLPKPKK KF Fa aHMWKHMWKPAI-1PAI-1PAI-2PAI-2C1-C1-抑制物抑制物 2 2抗纤酶抗纤酶 2 2巨球蛋白巨球蛋白t-PA SK UKt-PA SK UK内激活途径(继发)内激活途径(继发)外激活途径(原发)外激活途径(原发)外源激活途径外源激活途径FbFb纤溶活性检验纤溶活性检验纤溶机制纤溶机制纤维蛋白溶解产物纤维蛋白溶解产物F
43、gFgFMFMFbFbX X、Y Y、D D、E,E,B B1-421-42,A A、B B、C C、H HX X,、Y Y,、D D、E E,B B15-4215-42,A A、B B、C C、H HX X、Y Y、D D、E,E,DDDDPLPLPLPLPLPLF FaaF FPA/BPA/BF Fa a纤溶活性检验纤溶活性检验纤溶活性检验纤溶活性检验3P血浆鱼精蛋白副凝集试验血浆鱼精蛋白副凝集试验(3P)【原理】【原理】FM+FDP FMFM+FDP FM FMFM自自行行聚聚合合呈呈肉肉眼眼可可见见的的纤纤维维网网状状、胶状或胶冻状,此为阳性结果胶状或胶冻状,此为阳性结果【参考值】阴性
44、参考值】阴性【临床意义】【临床意义】阳阳性性:见见于于继继发发性性纤纤溶溶,如如DICDIC的的早早期期或中期。或中期。鱼精蛋白鱼精蛋白纤溶活性检验纤溶活性检验t-PA组织型纤溶酶原激活物组织型纤溶酶原激活物(t-PA)测定测定【原理】【原理】发色底物法发色底物法【参考值】【参考值】0.3 0.30.6 0.6 U/mlU/ml【临床意义】临床意义】增高见于原发性或继发性纤溶症。增高见于原发性或继发性纤溶症。减低见于高凝状态和血栓性疾病。减低见于高凝状态和血栓性疾病。纤溶活性检验纤溶活性检验PAI:A纤纤溶酶原活化物抑制物活性(溶酶原活化物抑制物活性(PAI:A)测定测定【参考值】参考值】发色
45、底物法:发色底物法:0.10.11.01.0抑制单位抑制单位/毫升毫升【临床意义】【临床意义】增高见于血栓前状态、血栓栓塞时。增高见于血栓前状态、血栓栓塞时。减低见于原发性或继发性纤溶症。减低见于原发性或继发性纤溶症。纤溶活性检验纤溶活性检验PLG:A血浆纤溶酶原活性血浆纤溶酶原活性(PLG:A)PLG:A)测定测定【参考值】【参考值】发色底物法:发色底物法:75%75%140%140%【临床意义】【临床意义】增高见于血栓前状态、血栓栓塞性疾病。增高见于血栓前状态、血栓栓塞性疾病。减减低低见见于于原原发发性性或或继继发发性性纤纤溶溶症症、先先天天性性PLGPLG缺乏症。缺乏症。纤溶活性检验纤溶
46、活性检验AP:A2 2-抗抗纤溶酶活性纤溶酶活性(AP:A)AP:A)测定测定【参考值】参考值】0.8 0.81.21.2抑制单位抑制单位/毫升毫升【临床意义】【临床意义】增增高高见见于于血血栓栓性性静静脉脉炎炎和和动动脉脉血血栓栓形形成、恶性肿瘤和分娩后等。成、恶性肿瘤和分娩后等。减减低低见见于于肝肝病病、DICDIC、手手术术后后以以及及先先天天性性APAP缺乏症。缺乏症。第八节第八节 血栓前状态检验血栓前状态检验血栓烷血栓烷B B2 2测定测定凝血酶原片段凝血酶原片段1+21+2测定测定纤维蛋白肽纤维蛋白肽A A测定测定血浆凝血酶血浆凝血酶-抗凝血酶复合物测定抗凝血酶复合物测定纤维蛋白肽
47、纤维蛋白肽B B1-421-42和和 B B15-4215-42测定测定血栓前状态检验血栓前状态检验血栓烷血栓烷【参考值】【参考值】28.2 28.2124.4124.4ngng/L/L【临床意义】临床意义】增增高高:反反应应血血小小板板被被激激活活及及其其释释放放反反应应亢亢进,见于血栓前状态和(或)血栓性疾病。进,见于血栓前状态和(或)血栓性疾病。减减低低:见见于于环环氧氧酶酶或或TXBTXB2 2合合成成酶酶缺缺乏乏症症,服服用用抑抑制制环环氧氧酶酶或或TXBTXB2 2合合成成酶酶的的药药物物如如阿阿司司匹匹林等。林等。血栓烷血栓烷B B2 2测定测定(thromboxanethrom
48、boxane B B2 2,TXB,TXB2 2)血栓前状态检验血栓前状态检验F1+2 【参考值】【参考值】ELISA ELISA:0.670.19nmol/L0.670.19nmol/L【临床意义】临床意义】升升高高见见于于血血栓栓前前状状态态和和血血栓栓性性疾疾病病、如如DICDIC、心心梗梗、脑脑梗梗死死、深深静静脉脉血血栓栓形形成、急性白血病等。成、急性白血病等。凝血酶原片段凝血酶原片段1+21+2(F F1+21+2 )测定测定血栓前状态检验血栓前状态检验FPA【参考值】【参考值】不吸烟男性不吸烟男性1.221.222.442.44g/Lg/L 不吸烟女性不吸烟女性1.181.183
49、.263.26g/L g/L 【临床意义】临床意义】升高主要见于急性心肌梗死、脑血管升高主要见于急性心肌梗死、脑血管疾病、疾病、DICDIC、DVT DVT、SLESLE、妊高征、肾小妊高征、肾小球肾炎、尿毒症、肺栓塞、有转移的恶球肾炎、尿毒症、肺栓塞、有转移的恶性肿瘤患者性肿瘤患者95%95%血血FPAFPA升高。升高。纤维蛋白肽纤维蛋白肽A A(FPAFPA)测定测定血栓前状态检验血栓前状态检验TAT【参考值】【参考值】1.450.4 1.450.4g/Lg/L【临床意义】临床意义】升高见于急性心肌梗死、脑梗死、升高见于急性心肌梗死、脑梗死、急性白血病、急性白血病、DVTDVT、DICDIC等。等。血浆凝血酶血浆凝血酶-抗凝血酶复合物抗凝血酶复合物(TAT)TAT)测定测定血栓前状态检验血栓前状态检验纤维蛋白肽纤维蛋白肽【参考值】【参考值】B B1-421-42:0.740.742.24nmol/L2.24nmol/L,B B15-4215-42:0.360.362.76nmol/L2.76nmol/L【临床意义】临床意义】原发性纤溶时原发性纤溶时BB1-421-42升高;升高;继发性纤溶时继发性纤溶时BB15-4215-42升高。升高。纤维蛋白肽纤维蛋白肽B B1-421-42和和 B B15-4215-42测定测定
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