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1、2022年医学微生物学各章节技术总结 医学微生物学 微生物:存在于自然界的一大群体形微小、结构简洁、肉眼干脆看不见,必需借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍。甚至数万倍才能视察到的微小生物。 微生物的分类: 种类细胞结构核酸特点代表非细胞型微物无典型细胞结构构DNA或RNA,两者不同时存在无产生能量的酶系统,只能在活细胞内生长增值病毒原核细胞型微生物无核膜、核仁,仅有核糖体DNA和RNA古生菌、细菌(细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体和放线菌)真核细胞型微生物细胞核分化程度很高,有核膜核仁,细胞器完整DNA和RNA真菌3、病原微生物:少数具有致病性,能引起人类、植物病害的微生物。
2、机会致病性微生物:在正常状况下不致病,只有在特定状况下导致疾病的微生物。 4,郭霍法则:特别的病原菌应在同一种疾病中查见,在健康人中不存在;该特别病原菌能被分别培育得纯种;该纯培育物接种至易感动物,能产生同样病症;自人工感染的试验动物体内能重新分别得到该病原菌纯培育。 郭霍法则的特别状况 5、免疫学:主动免疫;被动免疫。 第一篇 细菌学 第一章 细菌的形态与结构 第一节 细菌的大小与形态 1、视察细菌常采纳光学显微镜,一般以微米为单位。 2、按细菌外形可分为: 球菌(双球菌、链球菌、葡萄球菌、四联球菌、八叠球菌) 杆菌(链杆菌、棒状杆菌、球杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌) 螺形菌(弧菌、螺菌、螺杆菌
3、) 其次节 细菌的结构 1、基本结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、核质 特别结构:荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞(填空) 2、革兰阳性菌(G+):显紫色;革兰阴性菌(G-):显红色。 3、 细胞壁结构革兰阳性菌 G+革兰阴性菌 G-肽聚糖组成由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥(填空)构成坚韧三维立体结构 由聚糖骨架、四肽侧链构成疏松二维平面网络结构肽聚糖厚度2080nm1015nm肽聚糖层数可达50层仅12层肽聚糖含量占胞壁干重5080%仅占胞壁干重520%磷壁酸有无外膜无有溶菌酶能切断糖苷键之间的连接,破坏聚糖骨架,青霉素和头孢菌素能抑制五肽交联桥的连接。 4、G-菌的外膜 脂蛋白、脂多糖(LPS)、脂质
4、双层、 脂多糖(LPS):即G-菌的内毒素。LPS是G-菌的重要致病物质,使白细胞增多,直至休克死亡;另一方面,LPS也可增加机体非特异性反抗力,并有抗肿瘤等有益作用。 脂质A:内毒素的毒性和生物学活性的主要成分,无种属特异性,不同细菌的脂质A骨架基本一样,故不同细菌产生的内毒素的毒性作用均相像。 核心多糖:有属特异性,位于脂质A的外层。 特异多糖:即G-菌的菌体抗原(O抗原),是脂多糖的最外层。 G-菌的外膜是一种有效的屏障结构,使细菌不易受到机体的体液杀菌物质、肠道的胆盐及消化酶等的作用。 G+菌的外模磷壁酸、特别的表面蛋白 5、细胞壁的功能:维持菌体固有的形态,并爱护细菌反抗低渗环境。
5、6、细菌细胞壁缺陷型(细菌L型):细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的干脆破坏或合成被抑制,这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活者称为细菌细胞壁缺陷型。 原生质体:G+菌细胞壁缺失后,原生质层仅被一层细胞膜包住 原生质球:G-菌肽聚糖层受损后尚有外膜爱护 细菌L型的诱发因素,如:溶菌酶,青霉素,溶葡萄球菌素,胆汁,抗体,补体等。 溶菌酶:能裂解肽聚糖中N-乙酰葡萄胺和N-乙酰胞壁酸之间的-1,4糖苷键,破坏聚糖骨架,引起细菌裂解。 青霉素:能与细菌竞争合成肽聚糖过程中所需的转肽酶,抑制四肽侧链上D-丙氨酸与五肽桥间的联结,使细菌不能合成完整的肽聚糖,在一般渗透压环境中科导致细菌死亡。
6、 细菌L型需在高渗低琼脂含血清的培育基中生长。多形性、生长繁殖缓慢、荷包蛋样菌落、有些可复原 G+菌细胞壁缺损形成的原生体,在一般培育基中很简单胀裂死亡,必需保存在高渗环境中。 7、细胞膜: 细胞膜的主要功能:物质转运;呼吸和分泌;生物合成;参加细菌分裂:细菌部分细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状物,称为中介体。 8、细胞质: 核糖体:链霉素(与细菌核糖体的30S亚基结合)和红霉素(与细菌核糖体的50S亚基结合)均能干扰其蛋白质合成,从而杀死细菌,但对人体核糖体无害。 质粒:染色体外的遗传物质,为闭合环状的双链DNA 胞质颗粒:贮藏有养分物质。异染颗粒(也成迂回体,嗜碱性强,用甲基蓝染色时着色较
7、深呈紫色)常见于白喉棒状杆菌。 9、核质:细菌的遗传物质。 10、细菌的特别结构 荚膜:包绕在细胞壁外的一层粘液性物质,为多糖或蛋白质的多聚体,用理化方法去除后并不影响菌细胞的生命活动。 厚度0.2微米边界明显的称为荚膜或大荚膜;厚度0、2微米的为微荚膜。 若粘液物质疏松地附着于菌细胞表面,边界不明显且易被洗脱者成为粘液层。 大多数细菌的荚膜为多糖,多糖分子组成和构型的多样化使其结构极为困难,成为血清学分型的基础。 荚膜对一般碱性染料亲和力低,不易着色。 荚膜的功能:抗吞噬作用;粘附作用;抗有害物质的损伤作用。 鞭毛:包括:单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌 鞭毛由基础小体、钩状体、丝状体三部分组
8、成。 鞭毛的功能:使细菌能在液体中自由游动,速度快速。细菌的运动有化学趋向性,常向养分物质处前进,而逃离有害物质。有些细菌的鞭毛与致病性有关。 菌毛:必需用电子显微镜视察 一般菌毛:与细菌粘附有关。 性菌毛:仅见于少数G-菌。具有传递遗传物质作用。 芽胞:细菌的休眠形式,养分缺乏尤其是C、N、P元素不足时,细菌生长繁殖减速,启动芽胞形成的基因。 细菌的芽胞由内向外依次是:核心、内膜、芽胞壁、皮质、外膜、芽胞壳和押宝外衣。 芽胞的形成与发芽:芽胞具有完整的核质、酶系统和合成菌体组分的结构,能保存细菌的全部生命必需物质,芽胞形成后细菌即失去繁殖实力。一个细菌只形成一个芽胞,一个芽胞也只能生成一个菌
9、体。 芽胞的功能:细菌的芽胞对热力、干燥、辐射、化学消毒剂等理化因素均有强大的反抗力。此外,当芽胞成为繁殖体后,能快速大量繁殖而致病。 其次章 细菌的生理 第一节 细菌的理化性质 1、细菌的化学组成:水、无机盐、蛋白质、糖类、脂肪、核酸 2、细菌的物理性状:光学性质;表面积;细菌的相对表面积大,有利于同外界进行物质交换;带电现象;半透性:细菌的细胞膜和细胞壁都有半透性,有利于汲取养分和解除代谢产物;渗透压:细菌所处一般环境相对低渗。 其次节 细菌的养分和生长繁殖 一、细菌的养分类型 1、自养菌:化能自养菌、光能自养菌 2、异养菌:腐生菌、寄生菌 全部的病原菌都是异养菌,大部分属寄生菌。 二、细
10、菌的养分物质 1、水 2、碳源 3、氮源:作为菌体成分的原料 4、无机盐:常用元素(P、S、K、Na、Mg、Ga、Fe)微量元素(Zn、Cu、Mn、钴) 各类无机盐的公用:构成有机化合物,成为菌体的成分;作为酶的组成成分,维持酶的活性;参加能量的储存和转运;调整菌体内外渗透压;某些元素与细菌的生长繁殖和致病作用亲密相关。 5、生长因子:生长因子是指,某些细菌细菌生长所必需的但自身又不能合成,必需由外界供应的物质。 三、细菌摄取养分物质的机制 1、被动扩散: 2、主动转运系统:依靠于周浆间隙结合蛋白的转运系统; 化学渗透趋势转运系统; 基团转移。 四、影响细菌生长的环境因素(简答) 1、养分物质
11、:水、碳源、氮源、无机盐及生长因子为细菌的代谢及生长繁殖供应必需的原料和足够的能量 2、酸碱度(pH):多数病原菌最适pH为7.2-7.6,而结核杆菌最适pH值为6.5-6.8,霍乱弧菌最适pH值为8.4-9.2。 3、温度:病原菌最适温度为37度。 4、气体: O2:依据细菌代谢时对氧气的须要与否分四类:(填空) 专性需氧菌:具有完善的呼吸酶系统,须要分子氧作为受氢体以完成需氧呼吸,仅能在有氧环境下生长。 微需氧菌:在低氧压(5%-6%)生长最好。 兼性厌氧菌:兼有有氧呼吸和无氧发酵两种功能,在有氧、无氧环境中均能生长,但以有氧时 生长较好。大多数病原菌属于此。 专性厌氧菌:缺乏完善的呼吸酶
12、系统,只能进行无氧发酵,必需在无氧环境中生长。 CO2:对细菌生长也很重要,大部分细菌在代谢中产生的CO2可满意须要,个别细菌初次分别时需人工供应5-10%CO2。 5、渗透压: 五、细菌的生长繁殖 1、细菌个体的生长繁殖: 繁殖方式-细菌以简洁的二分裂方式进行无性繁殖。 繁殖速度-繁殖一代所需时间(代时)约20-30min。但少数细菌代时较长,如结核分枝杆菌代时为18小时。 2、细菌群体的生长繁殖:迟缓期、对数期、稳定期、衰退期 繁殖规律-生长曲线 迟缓期:细菌被接种培育基的最初一段时间,主要是适应新环境,同时为分裂繁殖作物质打算,此时细菌体积比较大,含有丰富的酶和中间代谢产物。 对数期:细
13、菌分裂繁殖最快的时期,菌数以几何级数增长,探讨细菌的最佳时期。 稳定期:由于养分物质的消耗,代谢产物的积累,繁殖数与死亡数几乎相等。活菌数保持稳定。一些细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物大多在稳定期产生。 衰退期:繁殖变慢,死菌数超过活菌数。细菌形态发生变更,生理活动趋于停滞。 第三节 细菌的新陈代谢和能量转换 一、细菌的能量代谢 细菌能量代谢活动中主要涉及ATP形式的化学能。细菌的有机物分解或无机物氧化过程中释放的能量通过底物的磷酸化或氧化磷酸化合成ATP。 生物体能量代谢的基本生化反应是生物氧化,其方式包括:加氧、脱氢和脱电子反应,细菌则以脱氢或氢的传递更为常见。 发酵:以有机物为受氢体
14、的生物氧化。呼吸:以无机物为受氢体的生物氧化。以分子氧为受氢体的是有氧呼吸,以其他无机物为受氢体的是厌氧呼吸。 病原菌合成细胞组分和获得能量的基质主要为糖类,通过糖的氧化或酵说明放能量,并以高能磷酸键的形式(ATP/ADP)储存能量。 1、EMP途径,又称糖酵解。大多数细菌共有的基本代谢途径,有些专性厌氧菌产能的唯一途径。 2、磷酸戊糖途径,又称一磷酸己糖途径。为生物合成供应前提和还原能。 3、需氧呼吸,需氧菌和兼性厌氧菌进行需氧反应。 4、厌氧呼吸,专性厌氧菌和兼性厌氧菌都能进行厌氧呼吸。 二、细菌的代谢产物 分解代谢产物和细菌的生化反应 合成代谢产物及其医学上的意义 1、热原质(致热源):
15、是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。产生热致源的细菌大都为格兰阴性菌,热致源即其细胞壁的脂多糖。 2、毒素及侵袭性酶:外毒素:多数G+菌和少数G-菌在生长繁殖过程中释放菌体外的蛋白质; 内毒素:G-菌细胞壁的脂多糖;外毒素毒性强于内毒素。 侵袭性酶:某些细菌产生的,能损伤机体组织,促使菌体的侵袭和扩散,是细菌重要的致病物质。 3、色素:水溶性;脂溶性。 4、抗生素:某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。抗生素大多由放线菌和真菌产生。 5、细菌素:某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质。细菌素仅对与产生菌有亲缘关系的细菌有杀伤作用。 6、维
16、生素: 第四节 细菌的人工培育 一、培育基 液体培育基 固体培育基 菌落:单个细菌分裂繁殖成肉眼可见的细菌基团。 1、光滑型菌落 2、粗糙型菌落 3、粘液型菌落 半固体培育基 第三章 消毒灭菌与病原微生物试验室生物平安 第一节 消毒灭菌的常用术语 1、灭菌(disinfection):杀灭生物体上全部微生物的方法。 2、消毒(sterilization):杀死物体上或环境中的病原 微生物,并不肯定能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。 3、防腐:防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。 4、无菌:无菌即不存在活菌,多是灭菌的结果。无菌操作:防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。 5、清洁:削减微生
17、物数量的过程。 其次节 消毒灭菌的方法 一、物理消毒灭菌法:热力、辐射、滤过、干燥和低温等。 热力灭菌法:分为干热灭菌和湿热灭菌 1、干热灭菌法:一般细菌繁殖体在干燥状态下,80-100经1小时可被杀死,芽胞则须要更高温度才能被杀死。 焚烧:废弃物、尸体 灼烧:接种环、试管口 干烤:(160170,2h)利用干烤箱灭菌,一般加热至171经1h或160 2h或121 16h。适用于高温下不变质、不损害、不蒸发的器皿(如:玻璃器皿)。 红外线(0.71000um波长的电磁波):医疗器械 2、湿热灭菌法:最常用,在相同温度下湿热灭菌法比干热灭菌法效果更好,因为:湿热中细菌菌体蛋白较易凝固变性;湿热的
18、穿透力比干热大;湿热的蒸汽有潜热效应存在。 巴氏消毒法:用较低的温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物,以保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法(61.1-62.8 30min 或71.715-30s,主要用于牛乳消毒和酒类)。 煮沸法(100 ,5min)食具、注射器等消毒 高压蒸汽灭菌法: *压力103.4KPa(1.05Kg/cm2) *温度121.3 *时间15-20min *效果杀灭包括芽孢在内全部微生物 *应用全部耐高温、高压、耐湿的物品 辐射杀菌法: 外线:波长240300nm的紫外线具有杀菌作用,其中以265266nm最强。紫外线杀菌机理是使相邻胸腺嘧啶形成二聚体干扰细菌DN
19、A合成,导致细菌变异和死亡。手术室空气消毒常采纳紫外线消毒 电离辐射:高速电子、X射线、射线 微波:波长为11000mm的电磁波,不能穿透金属表面。微波主要靠热效应发挥作用,且必需在有肯定含水量条件下才能显示出来。 二、化学消毒灭菌法 原理(填空):使菌体蛋白凝固变性;干扰细菌酶的活性;损害细胞膜的的结构。 乙醇:70%-75%,使细菌蛋白质凝固。 苯扎溴铵(新洁尔灭):破坏细胞膜 3、高锰酸钾:氧化作用 第四节 影响消毒灭菌效果的因素 微生物的种类 微生物对消毒灭菌的敏感性凹凸排序大致如下:真菌、细菌繁殖体、有包膜病毒、无包膜病毒、分枝杆菌、细菌芽胞。 微生物的物理状态 微生物的数量 消毒剂
20、的性质、浓度及作用时间 温度:消毒剂的杀菌作用速度随温宿上升而加快。 酸碱度 有机物 第五节 病原微生物试验室生物平安 一、病原微生物的分类 第一类:能够引起人类或动物特别严峻疾病的微生物,以及我国尚未发觉或已经宣布歼灭的微生物。 其次类:能够引起人类或动物严峻疾病,比较简单干脆或间接在人与人、动物与动物、动物与人间传播的微生物。 第三类:能够引起人类或动物疾病,但一般状况下对人、动物或环境不构成严峻危害,传播风险有限,试验室感染后很少引起严峻疾病并且具备有效治疗和预防措施的微生物。 第四类:通常状况下不会引起人类或动物疾病的微生物。 二、病原微生物试验室的分级:依据生物平安防护水平(BSL)
21、及试验室生物平安国家标准 一级: 二级: 三级:对人体、植物、动物或环境具有高度危急性,主要通过气溶胶使人类传染上严峻的甚至是致命的疾病,或对动物植物或环境具有高度危急的致病因子。通常有预防治疗措施。 四级:对人体、植物、动物或环境具有高度危急性,主要通过气溶胶途径传播或传播途径不明或未知的危急的致病因子。没有预防治疗措施。 第四章 噬菌体 噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒; 具有病毒的基本特性:个体微小,可以通过细菌滤器; 无细胞结构,主要由衣壳(蛋白质)和核酸组成; 只能在活的微生物细胞内复制增殖,是一种专性胞内寄生的微生物。 噬菌体分布极广。 第一节 噬菌体的生物学性
22、状 1、形态与结构: 噬菌体很小,在光镜下看不见,需用电镜视察。不同的噬菌体在电镜下有三种形态:蝌蚪形、微球形和细杆形,多数噬菌体呈蝌蚪形,由头部和尾部两部分组成。 2、结构及化学组成: 3、抗原性:噬菌体具有抗原性,能刺激机体产生特异性抗体。 4、反抗力:噬菌体对理化因素及多数化学消毒剂的反抗力比一般细菌的繁殖体强,75 30min灭活。噬菌体能耐受低温柔冰冻,但对紫外线和X射线敏感。 其次节 毒性噬菌体 1、噬菌体感染细菌有两种结果: 毒性噬菌体(virulent phage):能在宿主细胞内复制增殖,产生很多子代噬菌体,并最终裂解细菌,建立溶菌周期。 温柔噬菌体(temperate ph
23、age):噬菌体基因与宿主染色体整合,成为前噬菌体,细菌变成溶原性菌,不产生子代噬菌体,但噬菌体DNA能随细菌DNA复制,并随细菌的分裂而传代,建立溶原周期。温柔噬菌体在某些因素的影响下可转变为毒性噬菌体。 2、毒性噬菌体 毒性噬菌体在宿主菌内以复制方式进行增殖,增殖过程包括:吸附、穿入、生物合成、成熟和释放。 液体培育基噬菌现象可使浑浊菌液变得澄清。 固体培育基若用适量的噬菌体和宿主菌液混合后接种培育,培育基表面可有透亮的溶菌空斑出现。一个空斑系由一个噬菌体复制增殖并裂解细菌后形成,称为噬斑(plaque),不同噬菌体噬斑的形态与大小不尽相同。 若将噬菌体按肯定倍数稀释,通过噬斑计数,可测定
24、肯定体积内的噬斑形成单位(plaque forming units,pfu)数目,即噬菌体的数目。 第三节 温柔噬菌体 前噬菌体(prophage)温柔噬菌体的基因组能与宿主菌基因组整合,并随细菌分裂传至子代细菌的基因组中,不引起细菌裂解。整合在细菌基因组中的噬菌体基因组称为前噬菌体(prophage)。带有前噬菌体基因组的细菌称为溶原性细菌。 溶原性转换(lysogenic conversion):噬菌体的DNA整合到宿主菌的染色体DNA后,使细菌的基因型发生变更从而获得新的遗传性状。例如白喉棒状杆菌产生白喉毒素的机理 。 第五章 细菌的遗传与变异 遗传(heredity):使微生物的性状保
25、持相对稳定,子代与亲代生物学的性状基本相同,且代代相传。 变异(variation):在肯定条件下,子代与亲代之间以及子代与子代之间的生物学性状出现的差异,有利于物种的进化。 基因型(genotype):细菌的遗传物质。 表型(phenotype):基因表现出的各种性状。 遗传性变异:是细菌的基因结构发生了变更,故又称基因型变异。常发生于个别的细菌,不受环境因素的影响,变异发生后是不行逆的,产生的新性状可稳定地遗传给后代。 非遗传性变异:细菌在肯定的环境条件影响下产生的变异,其基因结构未变更,称为表型变异。易受到环境因素的影响,凡在此环境因素作用下的全部细菌都出现变异,而且当环境中的影响因素去
26、除后,变异的性状又可复原,表型变异不能遗传。 细菌的遗传与变异的物质基础 细菌的遗传物质:染色体、质粒、转座因子等(填空题) 一 、染色体(chromosome) 一条环状双螺旋DNA长链,按肯定构型反复回旋形成松散的网状结构; 缺乏组蛋白,无核膜包袱; 约含有5000个基因; 二、质粒是细菌染色体以外的遗传物质,是闭合环状的双链DNA。 1、质粒的特征: 质粒具有自我复制的实力。 质粒DNA所编码的基因产物给予细菌某些性状特征。 质粒可自行丢失与消退。 质粒的转移性。 质粒可分为相容性与不相容性两种。 2、质粒的分类 致育质粒(fertility plasmid、F质粒)编码性菌毛,介导细菌
27、之间的接合传递; 耐药性质粒(resistance plasmid、R质粒)编码细菌对抗菌药物或重金属盐类的耐药性。分两类,一是接合性耐药质粒(R质粒),另一是非接合耐药性质粒(r质粒); 毒力质粒(Vi质粒) 编码与该菌致病性有关的毒力因子; 细菌素养粒:编码细菌产生细菌素; 代谢质粒:编码产生相关的代谢酶。 三、转座因子 转座因子(transposable element):是一类在细菌染色体、质粒或噬菌体之间可自行移动的一段特异的具有转位特性的核苷酸序列片段,又称移动基因。 转座子有二类: 插入序列(insertion sequence,IS):最小,不超过2kb,只携带与转座功能有关的
28、基因。 转座子(transposon,Tn):长度一般超过2kb,除携带与转位有关的基因外还携带其他基因(如耐药性、毒素基因等)。 第三节 基因的转移与重组 基因转移(gene transfer):外源性的遗传物质由供体菌进入某受体菌细胞内的过程。 基因重组(recombination):转移的基因与受体菌DNA整合在一起,使受体菌获得供体菌某些特性。 细菌的基因转移和重组方式:转化、转导、接合、溶原性转换、原生质体融合。(必考其一) 1、转化(transformation):受体菌干脆摄取供体菌游离的DNA片段获得新的遗传性状的过程称为转化。 2、接合(conjugation):是细菌通过性
29、菌毛相互连接沟通,将遗传物质(主要是质粒DNA)从供体菌转移给受体菌,受体菌获得新的遗传性状的过程。能通过结合方式转移的质粒称为接合性质粒,不能通过性菌毛在细菌间转移的质粒为非接合性质粒。 F质粒的接合 F+ 即F质粒,编码性菌毛,称雄性菌 HfrF质粒整合到细菌染色体上,使细菌能高效地转移染色体上的基因,故称高频重组菌 FHfr菌中的F质粒可从染色体上脱离下来,并带染色体上几个邻近的基因,故称F 三者均有性菌毛,均可发生接合 R质粒的接合 细菌的耐药性与耐药性的基因突变及R质粒的接合转移等有关。 R质粒有耐药传递因子和耐药确定因子两部分组成。耐药传递因子的功能与F质粒相像,可编码性菌毛的产生
30、和通过接合转移;R确定子能编码对抗菌药物的耐药性。 3、转导(transduction):是以温柔噬菌体为载体,将供体菌的一段DNA转移到受体菌内,使受体菌获得新的性状。 依据转导基因片段的范围,可将转导分为两类:普遍性转导(转导的DNA可是供菌染色体上的任何部分)、局限性转导(转导的DNA只限供菌染色体上的特定基因)。 4、溶原性转换(lysogenic conversion):噬菌体的DNA整合到宿主菌的染色体DNA后,使细菌的基因型发生变更从而获得新的遗传性状。 5、原生质体融合(protoplast fusion):G +菌形成原生质体后,在聚乙二醇(PEG)作用下,可使两种不同的细菌
31、细胞发生融合的过程。 第四节 基因突变 一、基因突变规律: 1、自发突变与诱发突变 突变可以自然发生为:自发突变,具自发性,随机性。 彷徨试验(fluctuation test,波动试验):随机的、非定向的突变是在接触噬菌体之前就已发生,噬菌体对突变仅起筛选而不是诱导作用。 人工诱导产生的突变为诱发突变,可提高突变率。 2、突变率:是指细菌生长时发生突变的频率。 3、突变与选择 影印试验(replica plating):耐药突变株在接触药物之前出现,药物的作用是选择耐药株,淘汰敏感株。 4、回复突变与抑制突变 野生型(wild type):未发生突变的菌株。 突变型(mutant type)
32、:相对于野生型,某一性状发生变更的菌株。 回复突变(reverse mutation):有时突变株经过又一次突变可复原为野生型的性状。 第七章 细菌的感染与免疫 第一节 正常菌落与机会致病菌 1、正常菌群:人体体表与外界相通的腔道中存在大量的细菌及其它微生物群,当人体免疫功能正常时,对宿主无害的,某些还对人有利,是为正常微生物群。 正常菌群对宿主的生理学作用:(问答) 生物拮抗,其作用机制为:受体竞争;产生有害代谢产物;养分竞争;合成细菌素。 养分作用:参加宿主的物质代谢、养分物质转化和合成。 免疫作用 抗苍老作用 抗肿瘤作用:降解致癌物质;激活巨噬细胞抑制肿瘤细胞。 菌群失调症:机体某部位正
33、常菌群中各菌种间的比例发生较大幅度改变而超出正常范围而导致机体产生的疾病 2、机会致病菌(致病条件)-填空 正常菌群的寄生部位变更 宿主免疫功能低下 局部形成厌氧微环境 (4)菌群失调:在应用抗生素治疗感染性疾病的过程中,宿主某部位正常菌群中各菌种间的比例发生较大幅度的改变而产生的疾病。常可引起二重感染或重叠感染,即在抗菌药物治疗感染性疾病的过程中,发生了另一种新致病菌引起的感染。 其次节 细菌的致病作用(问答) 1、毒力:表示细菌致病性的强弱。 半数致死量(LD50):在肯定条件下能引起50%的试验动物死亡的细菌数量或毒素剂量。 半数感染量(ID50):在肯定条件下能引起50%的组织培育细胞
34、感染的细菌数量或毒素剂量。 2、细菌的致病作用取决于:细菌的毒力、细菌侵入的数量、细菌侵入的途径 一、细菌的毒力 侵袭力:致病菌能突破宿主皮肤、粘膜生理屏障,进入机体并在体内定植、繁殖扩散的实力。 1、黏附素 2、荚膜 3、侵袭性物质:侵袭素、侵袭性酶 4、细菌生物被膜 毒素 外毒素和内毒素的主要区分(简述) 外毒素内毒素来源G+菌和部分G-菌G-菌存在部分从活菌分泌出,少数菌崩解后释出细胞壁组分,菌裂解后释出化学成分蛋白质脂多糖稳定性6080,30分钟160,24小时毒性作用强,对组织器官有选择性毒害效应,引起特别临床表现较弱,各菌的毒性作用大致相同,引起发热、白细胞增多、微循环障碍、休克、
35、DIC等全身反应抗原性强,刺激机体产生抗毒素;甲醛液处理脱毒形成类毒素弱,刺激机体产生的中和抗体作用弱;甲醛液处理不产生类毒素特点1、大多数的化学本质是蛋白质 2、毒性作用强,对组织器官有高度选择性 3、绝大多数不耐热 4、抗原性强 5、可用人工化学方法脱去毒性(A亚基活性) 医院感染 一、医院感染(hospital acquired infection):患者在住院期间发生的感染或医院内获得而出院后发生的感染,或与前次住院有关的感染(不包括入院前已处于潜藏期的感染)。 二、医院感染的分类 1、按微生物来源: 内源性医院感染:由自身正常菌群转变成机会性致病菌所致 特定条件:借居部位变更;免疫功
36、能下降;菌群失调 外源性医院感染(交叉感染):患者遭遇医院内非自身存在的病原体侵袭而发生的感染。病人之间、医患之间、污染医护用品或诊治设备、环境空气等,也称医院内感染。 医源性感染。 第九章 球菌 G+球菌:葡萄球菌、链球菌、肠球菌 G-球菌:奈瑟菌 第一节 葡萄球菌属 一金黄色葡萄球菌 (一)生物性状 1、颜色和染色:无芽胞,无鞭毛 2、培育特性:需氧或兼性厌氧。培育养分要求不高。属内不同菌种可产生金黄色、白色、柠檬色等脂溶性色素并使菌落着色。 致病性葡萄球菌菌落呈金黄色,于血琼脂平板上生长后在菌落四周还可见完全透亮溶血环(B溶血)。 3、生化反应: 多数能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖,产酸不产
37、气。 致病性菌株能分解甘露醇,产酸。 触酶(过氧化氢酶)阳性,可与链球菌相区分。 4、抗原: 葡萄球菌A蛋白(SPA):存在于细胞壁上的表面抗原,可与IgG的Fc段结合,可进行协同凝集,并具有抗吞噬等生物学活性。 荚膜多糖:有利于黏附和抗吞噬。 多糖抗原:具有群特异性,存在于细胞壁。 5、分类: 按DNA相关性分:金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。 按有无凝固酶(血浆凝固酶)分:凝固酶阳性菌、凝固酶阴性菌。 6、反抗力: 葡萄球菌对外界反抗力强。 对碱性染料(龙胆紫)较敏感。 对青霉素、金霉素、红霉素、庆大霉素高度敏感,对链霉素中度敏感,对磺胺、氯霉素敏感性较差。 易产生耐药性,尤其
38、对青霉素。 (二)致病性 葡萄球菌中毒性最强的是金黄色葡萄球菌。 1、致病物质(填空) 酶 血浆凝固酶:鉴定致病性葡萄球菌的重要指标,包括游离凝血酶和结合凝血酶。 其致病机理:阻碍吞噬细胞的吞噬和细胞内消化作用。 爱护病菌不受血清中杀菌物质的破坏。 引起四周纤维蛋白沉积和凝固使感染易于局限化和形成血栓。 耐热核酸酶:由致病性葡萄球菌产生,耐热,能较强的降解DNA和RNA。耐热核酸酶是测定葡萄球菌有无致病性的重要指标之一。 纤维蛋白溶酶(葡激酶):激活纤维蛋白酶原使之成为纤维蛋白酶,导致血浆纤维蛋白的溶解,有利于病菌的扩散。 透亮质酸(扩散因子):降解结缔组织的透亮质酸。 脂酶:分解脂肪。 触酶
39、:分解过氧化氢。 毒素 葡萄球菌溶素:破坏膜的完整性导致细胞溶解,对人类有致病作用的主要为a溶素。 杀白细胞素(PV):分快(F)慢(S)两种组分,两者必需协同才能有作用。攻击中性粒白细胞和巨噬细胞,增加侵袭力。 肠毒素:一组热稳定的可溶性蛋白质,可反抗胃液中的蛋白酶的水解作用。刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的急性胃肠炎,即食物中毒。葡萄球菌肠毒素属于超抗原,即不经过抗原递呈细胞的处理能非特异性刺激T细胞增值并释放过量细胞因子致病。 表皮剥脱毒素(表皮溶解毒素):有两个血清型,A型耐热,B型不耐热。引起表皮脱落性皮炎。 毒素休克综合症毒素-1:引起多器官。多系统的功能紊乱,超抗原作用。 细胞
40、表面结构蛋白:荚膜、肽聚糖、磷酸壁、蛋白A 2、所致疾病 侵袭性疾病:以脓肿形式为主的化脓性炎症。皮肤化脓性炎症:浓汁金黄而粘稠,病灶界限清晰,多为局限性。 毒素性疾病:由外毒素引起的中毒性疾病。食物中毒;烫伤样皮肤综合症;毒性休克综合症(TSS)。 (三)免疫性 :人类对葡萄球菌有肯定的自然免疫力。 (四)微生物检查法 致病性葡萄球菌的鉴定依据:能产生金黄色色素;有溶血性;凝固酶试验阳性;耐热核酸酶试验阳性;能分解甘露醇产酸。 二、凝固酶阴性葡萄球菌CNS 生物学性状 CNS为G+菌,最常见的是表葡萄球菌和腐生葡萄球菌。 致病性 泌尿系统感染: 细菌性内膜炎: 败血症: 术后及植入医用器械引
41、起的感染: 金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的主要性状(简答题) 金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌菌落色素金黄色白色凝固酶+-溶血性溶血不溶血SPA+-甘露醇发酵+-致病性强,化脓性感染弱,医源性感染 其次节 链球菌属 链球菌属对人类致病的主要是A群链球菌和肺炎链球菌。 1、分类 按溶血现象 溶血现象性质甲型()溶血性链球菌(草绿色链球菌)菌落四周有12mm宽的草绿色溶血环多为机会致病菌乙型()溶血性链球菌(溶血性链球菌)菌落四周有24mm宽的界限分明、完全透亮的无色溶血环致病力强丙型()链球菌(不溶血性链球菌)不产生溶血素,菌落四周无溶血环一般不致病 2、对人致病的链球菌90%左右属A群,且对人致病的A群链球菌多呈现乙型溶血。 3、需氧、兼性厌氧链球菌对人有致病性。 一、A群链球菌 A群链球菌主要有化脓性链球菌或-溶血性链球菌,是人类常见的感染细菌,也是链球菌中对人类致病作用最强的细菌。 生物学性状 1、培育特性:多数菌株兼性厌氧。养分要求较高,多数菌株四周易形成较宽的透亮溶血环。 2、生化反应:分解葡萄糖,产酸不产气。链球菌一般不分解菊糖,不被胆汁溶解,可用来鉴别甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌。链球菌不产生触酶。
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