第十一章-生物性检材的个人识别(课堂PPT).ppt
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1、第十一章第十一章 生物性检材个人识别生物性检材个人识别PERSONAL IDENTIFICATIONl第一节第一节 概述概述l第二节第二节 血痕检验血痕检验l第三节第三节 精斑检验精斑检验l第四节第四节 其他生物性检材的检验其他生物性检材的检验主讲:泰山医学院主讲:泰山医学院 吴开柱吴开柱1l第五节第五节 毛发检验毛发检验l第六节第六节 骨骼检验骨骼检验l第七节第七节 牙齿检验牙齿检验l第八节第八节 其他组织检验其他组织检验l第九节第九节 个人识别的结果评估个人识别的结果评估2第一节第一节 概概 述述 l分析生物性检材以揭示个体身份的工作分析生物性检材以揭示个体身份的工作称个人识别。称个人识别
2、。l生物性检材:生物性检材:人体组织与器官,体液、分泌物、排人体组织与器官,体液、分泌物、排 泄物及由它们组成的生物性斑痕。泄物及由它们组成的生物性斑痕。3一、生物性检材意义一、生物性检材意义v为破案提供线索和证据。为破案提供线索和证据。凶杀、抢劫、殴斗、强奸、盗窃凶杀、抢劫、殴斗、强奸、盗窃 财财、色色、仇仇v交通事故多人死亡:安葬、抚恤无名交通事故多人死亡:安葬、抚恤无名尸、毁损碎尸、年幼失散儿童认亲、尸、毁损碎尸、年幼失散儿童认亲、遗产继承人的身份确定等。遗产继承人的身份确定等。4二、生物性检材的特点:二、生物性检材的特点:因环境条件的作用,使它具有因环境条件的作用,使它具有某些某些 不
3、确定性,如是否为血,有不确定性,如是否为血,有时需要化验后才知道。时需要化验后才知道。三、分析生物性检材的策略:三、分析生物性检材的策略:由简单到复杂。由简单到复杂。5四、生物性检材的取材过程四、生物性检材的取材过程 1.检材的寻找:检材的寻找:多在现场发现,也可在罪犯、受害人身上发现。血痕血痕:地面、凶器等处,地板缝、甲缝,鲁米诺喷射若为血痕则发出荧光。精斑精斑:衣裤、被褥、床单、卫生纸,腹部、阴部、大腿等处。紫外线照射,精斑发出银白色带淡紫晕的荧光。6毛发毛发:强奸案中内衣、外阴、大腿间和床上等处。唾液唾液:香烟头、口香糖、牙签、咬痕和饮料容器上。皮肤及其他组织碎片皮肤及其他组织碎片:甲缝
4、内、车轮和车底盘等处。7 2.生物性检材的收集:生物性检材的收集:首先要拍照、录象、绘图、测量和记录 其原始状态。血液:血液:尸体血液冷藏4,或纱布浸后凉干保存。整块地剪、挖、刮取,尽量原样。整块地剪、挖、刮取,尽量原样。8体液:体液:女尸,棉签或纱布提取直肠、口腔或 阴道分泌物。活体,咽拭子凉干后入信封。毛发,用镊子夹取。皮屑、碎骨、血肉和烟头,带手套用镊子。93.包装和运送:包装和运送:尽早尽快,低温或凉干。1)按检材的性质和特点,用纸袋、纱布、玻璃瓶等分别包装。2)注明名称、来源、数量、采集日期等。3)附送对照标本,血、毛发等。4)委托书:送检机关,送检物品清单,案情介绍,目的和要求,发
5、文日期,单位及联系人。105.检验程序和要求检验程序和要求1)根据委托书验收检材2)指定不同的检验方案和步骤3)采取有效措施防止污染4)最后提交鉴定书,鉴定书由绪言(送检单位、日期、目的、案情摘要、检材、送检日期)、检验方法和结果、分析说明和结论等。最后由二名以上鉴定人签名,鉴定单位盖章。剩余检材应妥善保管,或退还委托单位。11第二节第二节 血痕检验血痕检验(BLOODSTAINSBLOODSTAINS)1.血痕:血痕:血液在体外干燥后形成的斑痕。2.要求要求1)是否是血。2)是人血还是动物血3)个人识别(遗传标记)4)其他检验123.程序程序 肉眼观 预实验确证实验 种属鉴定遗传标记测定性别
6、鉴定出血部位、出血量、血痕陈旧度等推断。13预试验 阴性不是血痕或被坏 阳性可能是血痕确证试验(有时可省)肉眼检验14 阴性 不是血痕 或量太少 或被破坏 阳性肯定是血痕种属试验 阴性不是人血或量太少或被破坏 阳性肯定是人血痕各种动物 血鉴定个人识别非遗传标记测定出血部位出血时间出血量出血者年龄出血性别一人血或多人血15遗传标记测定红细胞血型 血清型 红细胞酶型 HLA DNA多态性ABO MN P Rh Hp Gc Tf Gm PGM EsD GLOI EAP A B DR DQ DNA指纹 VNTR STR RAPD 16血痕检验(血痕检验(BLOODSTAINS)一、肉眼观一、肉眼观二、
7、预实验二、预实验(Preliminary test)1.原理:原理:HB或正铁血红素具有过氧化物酶的活性,使过氧化氢分解为水和新生态氧,后者使加入的化学物质(联苯胺、酚酞、鲁米诺)氧化成有色物质(如联苯胺蓝)。17v 联苯胺联苯胺(benzidine test)等预实验)等预实验 阴性,可排除血迹;若为阳性,则为血痕、脓、涕排泄物、植物汁等。v 方法方法:在检材上依次加入冰醋酸,联苯胺无 水乙醇饱和液,1-2分钟后无反应,再加入3过氧化氢,立即出现翠蓝色为阳性,仍无色则为阴性。18 血痕Hb或正铁血红素过氧化物酶活性过氧化氢水新生态氧无色化学物质有色物质氧化血痕预试验的基本原理:19一 联苯胺
8、试验1 原理2 试剂:冰醋酸 联苯胺无水乙醇饱和溶液 3%过氧化氢3 操作:血痕少许,置与滤纸上冰醋酸1滴联苯胺无水乙醇饱和溶液1滴3%过氧化氢1滴1-2分种不出现兰色反应立即出现兰色反应 阳性不出现 阴性20三、确证实验:三、确证实验:阳性示HB或其衍生物。又名高山氏结晶实 验v 血色原结晶实验(hemochromogen crystal test)v 原理:HB在碱性溶液中分解为正铁HB和变 形珠蛋白,在还原剂作用下,正铁血红素还原为血红素,后者与变形珠蛋白或其他含氮化合物结合,形成血色原结晶。21v方法方法:在检材上加入1-2滴高山氏试剂,加微热,室温放凉后镜检,若出现樱桃红色菊花状、星
9、状或针状结晶,阳性。22四、种属鉴定:四、种属鉴定:确定是否为人血。1.免疫学方法v环状沉淀反应(ring precipitation):血痕浸出液与抗人血红蛋白血清和抗人血清蛋白血清混合,在界面出现沉淀环。v酶联免疫吸附实验:血痕浸出液与辣根过氧化物酶标记的鼠抗人IgG单克隆抗体混合,低物显色为阳性反应。232.分子生物学方法:分子生物学方法:针对人类基因组中具有种属特异性的DNA序列(Alu序列),采用能特异扩增的异物,通过PCR方法对血痕DNA扩增,根据有无扩增产物判断是否是人血。24种属鉴定 环状沉淀反应 沉淀反应 免疫扩散试验血清学方法 对流电泳 抗球蛋白消耗试验 酶联免疫吸附试验细
10、胞学方法生化方法 血红蛋白等电聚焦 25五、个人识别五、个人识别 1.基因表达产物的遗传标记:基因表达产物的遗传标记:血型测定(吸附实验)血型测定(吸附实验):已知血清与血凝块混合一段时间后再测血清抗体的量。v若仅抗A减少A型血,v仅抗B减少B型血,抗A、B均减少AB型血,抗A、B均不减少O型血。262.DNA多态性分析:多态性分析:经PCR扩增特定人类STR基因座,产物与人类等位基因分型标准物对照即可。3.性别鉴定:性别鉴定:PCR扩增人类牙釉质蛋白的基因X-Y染色体同源特异片段27282930313233343536 抗人血红蛋白环状沉淀反应(1、2号管阳性3号管阴性,4号管空白)371)
11、红细胞凝集反应阳性(十)2)红细胞凝集反应阴性(一)38第三节第三节 精斑检验精斑检验(SEMINAL STAIN)1)精子射入阴道后,4-5分钟到宫颈,30分-宫体,60分-输卵管伞部;2)活体阴道,精子检出期限1.5-2天,而尸体阴道,为2周;3)被奸后行走,精子检出时间短;被奸后即死则长;4)可检出活体精子的时间性交后阴道内3-8小时,宫颈2-5天,宫体2-7天。39一、肉眼检查:一、肉眼检查:灰白色(深底),黄白色(浅底)新鲜精斑有特殊臭味,有硬感,在紫外线下,精斑中心银白色荧光,周缘紫兰色紫兰色 。二、预实验二、预实验(磷酸苯二钠实验)(磷酸苯二钠实验):查酸性磷酸酶,灵敏度高。原理
12、:精液中的酸性磷酸酶,分解磷酸苯二钠,产生萘酚,后者经铁氰化钾作用与氨基安替比林结合,产生红色醌类化合物。40 精斑预试验1.紫外线检查原理:紫外线 黄素 银白色荧光 400-500nm方法及结果412.Acp实验原理 Acp 磷酸苯二钠 萘酚 +氨基安替比林结果 铁氢化钾 红色醌类42床单上的精斑酸性磷酸酶试验(由左至右为:强阳性、阳性、弱阳性、阴性43三、确证实验三、确证实验v精子检出法:一个完整典型精子、几个典型精子头部,可确诊。v免疫学实验:精斑中P30抗原与抗-P30血清反应出现沉淀。四、种属鉴定:四、种属鉴定:P30抗原仅在人中存在。44精虫(美蓝品红染色400)4546五、精斑的
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