年最新高中生物精品教学血红蛋白的提取和分离人教版选修省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx

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1、第1页 本课题学习目标本课题学习目标 体验从复杂体系中提取生物大分子基本过程和方法，并了体验从复杂体系中提取生物大分子基本过程和方法，并了解色谱法、电泳法等分离生物大分子基本原理。解色谱法、电泳法等分离生物大分子基本原理。1 1 1 1、主要概念：、主要概念：、主要概念：、主要概念：凝胶色谱法凝胶色谱法 电泳法电泳法 缓冲溶液缓冲溶液 它们在它们在血红蛋白提取中分别起到什么作用。血红蛋白提取中分别起到什么作用。2.2.2.2.主要原理：主要原理：主要原理：主要原理：凝胶色谱法分离蛋白质原理凝胶色谱法分离蛋白质原理 电泳法分离样品原理电泳法分离样品原理 缓冲溶液组成和作用机理缓冲溶液组成和作用机

2、理3 3 3 3、课题重点：、课题重点：、课题重点：、课题重点：凝胶色谱法原理和方法凝胶色谱法原理和方法 4 4 4 4、课题难点：课题难点：课题难点：课题难点：样品处理样品处理 色谱柱填料处理和色谱柱装填。色谱柱填料处理和色谱柱装填。第2页1.1.分离生物大分子基本思绪：分离生物大分子基本思绪：选取一定选取一定物理或化学物理或化学方法分离含有不一样物理方法分离含有不一样物理或化学性质或化学性质生物大分子生物大分子。2.2.蛋白质分离和提取原理：蛋白质分离和提取原理：依据蛋白质依据蛋白质各种特征各种特征差异，如差异，如分子形状和大小、分子形状和大小、所带电荷性质和多少、溶解度、吸附性质和对其它

3、所带电荷性质和多少、溶解度、吸附性质和对其它分子亲和力分子亲和力等等，能够用来分离等等，能够用来分离不一样种类蛋白质。不一样种类蛋白质。一、血红蛋白提取和分离一、血红蛋白提取和分离3 3、提取分离方法、提取分离方法凝胶色谱法凝胶色谱法 凝胶电泳法凝胶电泳法 第3页（一）（一）凝胶色谱法（凝胶色谱法（分配色谱法分配色谱法）2.2.凝胶：凝胶：大多数凝胶是由大多数凝胶是由多糖类化合物多糖类化合物（如葡聚糖或琼脂（如葡聚糖或琼脂糖）组成多孔小球体糖）组成多孔小球体，内部有许多贯通内部有许多贯通通道。通道。依据被分离物质依据被分离物质蛋白质相对分子质量大蛋白质相对分子质量大小，小，利用含有利用含有网状

4、结构网状结构凝胶，来进行分离。凝胶，来进行分离。1.1.概念：概念：第4页3.3.凝胶色谱法原理凝胶色谱法原理当相对分子量不一样蛋白质经过凝胶时，当相对分子量不一样蛋白质经过凝胶时，相对相对分子量较小蛋白质分子量较小蛋白质轻易轻易进入凝胶内部通道，旅程进入凝胶内部通道，旅程较长，移动速度较慢较长，移动速度较慢;相对分子量相对分子量较大较大蛋白质蛋白质无法进入凝胶内部通道，无法进入凝胶内部通道，只能在凝胶外部移动，旅程较短，移动速度较快。只能在凝胶外部移动，旅程较短，移动速度较快。依据特征是：依据特征是：蛋白质分子量大小。蛋白质分子量大小。第5页4.4.凝胶色谱法分离蛋白质分离蛋白质原理和详细过

5、程详细过程第6页凝胶色谱法分离蛋白质过程动画演示凝胶色谱法分离蛋白质过程动画演示第7页（二）缓冲溶液（二）缓冲溶液 1.1.概念概念:在一定范围内，凡是能够抵制在一定范围内，凡是能够抵制外加少许强外加少许强酸或强碱酸或强碱影响使原来溶液影响使原来溶液PHPH值基本保持值基本保持不变混不变混合溶液。合溶液。能够抵制外界酸和碱对溶液能够抵制外界酸和碱对溶液PHPH值影响，值影响，维持维持PHPH基本不变。基本不变。2.2.作用作用:思索：说出人体血液中缓冲对。思索：说出人体血液中缓冲对。NaHNaH2 2POPO4 4/Na/Na2 2HPOHPO4 4H H2 2COCO3 3/NaHCO/Na

6、HCO3 3第8页 通常由通常由1 12 2 种缓冲剂种缓冲剂溶解于水中配制而成。调整溶解于水中配制而成。调整缓冲剂缓冲剂使用百分比使用百分比就能够制得在就能够制得在不一样不一样PHPH范围内使用范围内使用缓冲液。缓冲液。4.4.提问：在本课题中使用缓冲液是提问：在本课题中使用缓冲液是:_,:_,利用缓冲液利用缓冲液模拟细胞内模拟细胞内PHPH环境环境，确保，确保 血红蛋白正常结构和功效血红蛋白正常结构和功效，便于观察，便于观察(红色红色)和科和科 学研究学研究(活性活性)磷酸缓冲液磷酸缓冲液3.3.缓冲溶液配制缓冲溶液配制:其目是:第9页 （三）（三）电泳：电泳：1.1.概念：概念：带电粒子

7、在电场作用下发生迁移过程。带电粒子在电场作用下发生迁移过程。2.2.原理：原理：许多主要生物大分子，如多肽、核酸等都含有可许多主要生物大分子，如多肽、核酸等都含有可解离基团，在解离基团，在一定一定PHPH下，这些基团会带上正下，这些基团会带上正 电或电或负电。负电。在电场作用下，这些带电分子会向着与其所带电在电场作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷荷相反相反电极移动。电极移动。分离样品中各种分子分离样品中各种分子带电性质差异以及分子本身带电性质差异以及分子本身大小，形状不一样，使带电分子产生不一样迁移速大小，形状不一样，使带电分子产生不一样迁移速度，度，从而实现样品中各种分子分离。从而实现样

8、品中各种分子分离。第10页影响蛋白质分子运动速度原因影响蛋白质分子运动速度原因决定决定运动方向运动方向形成形成库仑力库仑力形成形成阻力阻力决定决定运动速率运动速率电荷性质电荷性质电荷量电荷量分子形状分子形状分子大小分子大小3.3.类型类型:琼脂糖琼脂糖凝胶电泳、凝胶电泳、聚丙稀酰胺聚丙稀酰胺凝胶电泳。凝胶电泳。第11页 在在在在电场电场电场电场作用下，作用下，作用下，作用下，这这这这些些些些带电带电带电带电分子分子分子分子会会会会向着向着向着向着与与与与其所其所其所其所带电带电带电带电荷相荷相荷相荷相反反反反电电电电极极极极移移移移动动动动琼脂糖凝胶电泳示意图琼脂糖凝胶电泳示意图琼脂糖凝胶电泳

9、示意图琼脂糖凝胶电泳示意图第12页 聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳 1 1、测定蛋白质分子量、测定蛋白质分子量:惯用惯用十二烷基硫酸钠十二烷基硫酸钠（SDSSDS）聚丙烯酰胺聚丙烯酰胺凝胶电泳。凝胶电泳。聚丙烯酰胺凝胶是由聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺单体丙烯酰胺和和交联剂交联剂N,N-N,N-亚亚甲基双丙烯酰胺甲基双丙烯酰胺在在引发剂引发剂和和催化剂催化剂作用下聚合交联成含有作用下聚合交联成含有三维网状结构凝胶。三维网状结构凝胶。N,N-亚甲基双丙烯酰胺（形成交联）亚甲基双丙烯酰胺（形成交联）丙烯酰胺和交联剂丙烯酰胺和交联剂N,N-亚甲基双丙烯酰胺交联共聚反应亚甲基双丙烯酰胺交联共聚反

10、应第13页 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中迁移率迁移率取决取决于它所带于它所带净电荷多少净电荷多少以及以及分子大小分子大小等原因。等原因。2.2.原理：原理：SDSSDS能使能使蛋白质发生完全变性。解聚成单条蛋白质发生完全变性。解聚成单条肽链肽链，所以测定结果只是，所以测定结果只是单条肽链分子量单条肽链分子量。SDSSDS能与各种蛋白质形成能与各种蛋白质形成蛋白质蛋白质SDSSDS复合物复合物，SDSSDS所所带负电荷量大大超出了蛋白质分子带负电荷量大大超出了蛋白质分子原有电荷量原有电荷量。因而因而掩盖了不一样种蛋白质间电荷差异，掩盖了不一样种蛋白质间电荷差异，使使电泳电泳迁

11、移率完全取决于分子大小迁移率完全取决于分子大小。3.SDS3.SDS作用机理作用机理:第14页用用SDSSDS测定蛋白质分子量方法测定蛋白质分子量方法 使用使用SDSSDS聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋测定蛋白质分子量时，可选取一组白质分子量时，可选取一组已知分子量标已知分子量标准蛋白准蛋白同时进行电泳，依据已知分子量标同时进行电泳，依据已知分子量标准蛋白准蛋白电泳区带位置电泳区带位置，能够测定，能够测定未知蛋白未知蛋白质质分子量。分子量。市场上有高分子量、次高分子市场上有高分子量、次高分子量及低分子量标准蛋白试剂出售。量及低分子量标准蛋白试剂出售。第15页 二、试验操作二、试验操

12、作样品处理样品处理粗分离粗分离纯化纯化纯度判定纯度判定1.1.样品处理：样品处理：（一）蛋白质提取和分离步骤（一）蛋白质提取和分离步骤（二）操作过程（二）操作过程 可选取猪、牛、羊或其它脊椎动物血液来分可选取猪、牛、羊或其它脊椎动物血液来分离血红蛋白。离血红蛋白。第16页血血液液血浆血浆水水 分分固体物质：固体物质：血浆蛋白、血浆蛋白、无机盐、磷脂、葡萄糖等无机盐、磷脂、葡萄糖等血细胞血细胞白细胞白细胞血小板血小板红细胞红细胞（最多）（最多）血红蛋白血红蛋白（9090）两个两个肽链肽链两个两个一肽链一肽链四个亚铁血红素基团四个亚铁血红素基团2.提问：提问：血液有哪些成份？血液有哪些成份？1.1

13、.提问：提问：用鸡红细胞提取用鸡红细胞提取DNADNA，用猪、牛、羊红细，用猪、牛、羊红细胞提取血红蛋白原因是什么？胞提取血红蛋白原因是什么？鸡红细胞含有细胞核，含有鸡红细胞含有细胞核，含有DNADNA，便于进行，便于进行DNADNA提提取；人红细胞无细胞核，结构简单，血红蛋白含量取；人红细胞无细胞核，结构简单，血红蛋白含量丰富，便于提取血红蛋白。丰富，便于提取血红蛋白。第17页血红蛋白血红蛋白两个两个肽链肽链两个两个一肽链一肽链四个亚铁四个亚铁血血红素基团红素基团每个肽链围绕一个每个肽链围绕一个亚铁血红素基团，亚铁血红素基团，此基团可携带此基团可携带一分子一分子O2或一分子或一分子CO2，血

14、红蛋白因含有血红蛋白因含有血红素血红素而而呈呈红色红色。血红蛋白特点：血红蛋白特点：第18页(1)(1)红细胞洗涤红细胞洗涤:去除杂质蛋白，利于后续血红蛋白分离纯化去除杂质蛋白，利于后续血红蛋白分离纯化.1 1、采集血样、采集血样2 2、低速短时间离心、低速短时间离心（速度越高和时间越长，会使白细（速度越高和时间越长，会使白细 胞等一同沉淀，达不到分离效果）胞等一同沉淀，达不到分离效果）3 3、吸收血浆：、吸收血浆：上层透明黄色血浆。上层透明黄色血浆。4 4、盐水洗涤：、盐水洗涤：下层暗红色红细胞下层暗红色红细胞+五倍体积五倍体积0.90.9 NaClNaCl溶液洗涤，搅拌溶液洗涤，搅拌10m

15、in10min5 5、低速、低速短时间短时间离心：离心：6 6、重复、重复3 3、4 4、5 5步骤三次步骤三次 上清液中已没有黄色：红细胞洗涤洁净。上清液中已没有黄色：红细胞洗涤洁净。目:操作：操作：洗涤次数过少洗涤次数过少,无法除去血浆蛋白。无法除去血浆蛋白。第19页(2)(2)(2)(2)血红蛋白释放：血红蛋白释放：血红蛋白释放：血红蛋白释放：加蒸馏水到加蒸馏水到原血液体积原血液体积，加加40体积甲苯体积甲苯（溶解细胞膜）（溶解细胞膜）置于置于磁力搅拌器磁力搅拌器搅拌搅拌10min（加速细胞破裂）（加速细胞破裂）红细胞破裂，释放出血红蛋白红细胞破裂，释放出血红蛋白第20页(3)(3)分离

16、血红蛋白溶液：分离血红蛋白溶液：过程过程：将搅拌好混合液转移到离心管内，以将搅拌好混合液转移到离心管内，以r/minr/min速度速度离心离心10 min10 min。试管中溶液层次：试管中溶液层次：第第1层（最上层）：层（最上层）：甲苯层甲苯层（无色透明）；（无色透明）；第第2层（中上层）：层（中上层）：脂溶性物质沉淀层脂溶性物质沉淀层（白色薄层固体）；（白色薄层固体）；第第3层（中下层）：层（中下层）：血红蛋白水溶液层血红蛋白水溶液层（红色透明液体）；（红色透明液体）；第第4层（最下层）：层（最下层）：杂质沉淀层杂质沉淀层（暗红色）。（暗红色）。分离分离：滤纸过滤：除去脂溶性沉淀层，滤纸过

17、滤：除去脂溶性沉淀层，分液漏斗中静置：分出下层分液漏斗中静置：分出下层红色透明液体红色透明液体。第21页甲苯层甲苯层（无色透明）无色透明）白色薄层固体白色薄层固体 红色透明液体红色透明液体杂质沉淀层杂质沉淀层（暗红色暗红色）试管中溶液层次试管中溶液层次第22页(4)(4)透透 析：析：过程：过程：取取1ml1ml血红蛋白溶液血红蛋白溶液装入透析装入透析袋中，将透析袋放入盛有袋中，将透析袋放入盛有300ml300ml20mmol/l20mmol/l磷酸缓冲液磷酸缓冲液中中（pHpH为为7.07.0），透析），透析12h12h目标：目标：除去样品中分子量较小杂质和离子。除去样品中分子量较小杂质和离

18、子。或用于更换样品缓冲液。或用于更换样品缓冲液。20mmol/L磷酸缓冲液磷酸缓冲液1mL第23页透析过程动画演示透析过程动画演示第24页2.2.凝胶色谱操作凝胶色谱操作:（1 1）凝胶色谱柱制作：）凝胶色谱柱制作：取长取长4040厘米，内径厘米，内径1.61.6厘米玻璃管，厘米玻璃管，两端磨平。两端磨平。底塞制作：底塞制作：打孔打孔挖出凹穴挖出凹穴安装移液管头部安装移液管头部覆盖尼龙网，再用覆盖尼龙网，再用100100目尼龙纱包好，插到玻璃管目尼龙纱包好，插到玻璃管一一端端。注意事项：玻璃管上部注意事项：玻璃管上部不得超出橡皮塞凹穴底面，不然难以铺实尼龙网，还会造成液不得超出橡皮塞凹穴底面，

19、不然难以铺实尼龙网，还会造成液体残留，蛋白质分离不彻底。体残留，蛋白质分离不彻底。顶塞制作：顶塞制作：打孔打孔安装玻璃管安装玻璃管。组装：组装：将上述三者按对应位置组装成一个整体将上述三者按对应位置组装成一个整体。安装其它从属结构。安装其它从属结构。第25页（2 2）凝胶色谱柱装填）凝胶色谱柱装填凝胶选择：凝胶选择：A A、材料：、材料：交联葡聚糖凝胶（交联葡聚糖凝胶（G-75G-75）。）。B B、代表意义、代表意义：“G”G”表示凝胶交联程度，膨胀程度表示凝胶交联程度，膨胀程度 及分离范围及分离范围。75 75表示凝胶得水值，即每克凝胶膨表示凝胶得水值，即每克凝胶膨 胀时吸水胀时吸水7.5

20、7.5克。克。凝胶前处理：凝胶前处理：配置凝胶悬浮液：配置凝胶悬浮液：计算并称取一定量凝胶浸泡于计算并称取一定量凝胶浸泡于蒸馏水或洗脱液蒸馏水或洗脱液中中 充分溶胀后，配成充分溶胀后，配成凝胶悬浮液。凝胶悬浮液。第26页凝胶色谱柱装填方法：凝胶色谱柱装填方法：A、固定：、固定：将色谱柱装置固定在支架上。将色谱柱装置固定在支架上。B、装填：、装填：将将凝胶悬浮液一次性凝胶悬浮液一次性迟缓倒入色谱柱迟缓倒入色谱柱内，装填时轻轻敲动色谱柱，使凝胶填装均匀内，装填时轻轻敲动色谱柱，使凝胶填装均匀注意：注意：1、装填时尽可能紧密：、装填时尽可能紧密：降低凝胶颗粒之间空隙。降低凝胶颗粒之间空隙。2、装填凝

21、胶柱时不得有气泡存在：、装填凝胶柱时不得有气泡存在：因为气泡会搅乱因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质洗脱次序，降低分离效果洗脱液中蛋白质洗脱次序，降低分离效果。第27页 洗涤平衡：洗涤平衡：连接缓冲液洗脱瓶，在连接缓冲液洗脱瓶，在50cm50cm高操作高操作压下，用压下，用300ml300ml20mmol/L20mmol/L磷酸缓冲磷酸缓冲液（液（pHpH为为7.07.0）充分洗涤平衡充分洗涤平衡12h12h。注意：注意：1 1、液面不要低于凝胶表面，不然、液面不要低于凝胶表面，不然可能有气泡混入，影响分离效果可能有气泡混入，影响分离效果2 2、不能发生洗脱液流干，露出凝、不能发生洗脱液流干，露出凝

22、胶颗粒现象胶颗粒现象。（2 2）凝胶色谱柱装填）凝胶色谱柱装填50cm50cm高高高高第28页（3 3）样品加入与洗脱）样品加入与洗脱调整缓冲液面：调整缓冲液面：打开下端出口，使打开下端出口，使缓冲液下降到与凝胶面缓冲液下降到与凝胶面平齐，关闭出口平齐，关闭出口滴加透析样品滴加透析样品：吸管吸吸管吸1ml1ml样品加到色谱柱样品加到色谱柱顶端顶端，注意：注意：1 1、不要触及并破坏凝胶面。、不要触及并破坏凝胶面。2 2、贴壁加样、贴壁加样 3 3、吸管管口贴着管壁围绕移动加样、吸管管口贴着管壁围绕移动加样样品渗透凝胶床：样品渗透凝胶床：打开下端出口，使样品渗透凝胶床内，打开下端出口，使样品渗透

23、凝胶床内，样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口洗脱：洗脱：加入加入pH=7.0 pH=7.0 20mmol/l20mmol/l磷酸缓冲液到适当高度，磷酸缓冲液到适当高度，连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口进行洗脱。连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口进行洗脱。搜集：搜集：待待红色蛋白质靠近色谱柱底端红色蛋白质靠近色谱柱底端时，用试管搜集流出时，用试管搜集流出 液，每液，每5ml5ml搜集一试管，连续搜集搜集一试管，连续搜集。（假如红色区带均匀一致移动，说明色谱柱制作成功）（假如红色区带均匀一致移动，说明色谱柱制作成功）第29页（3 3）样品加入与洗脱）样品加入与洗脱注意：

24、注意：正确加样操作是：正确加样操作是：1 1、不要触及并破坏凝胶面。、不要触及并破坏凝胶面。2 2、贴壁加样。、贴壁加样。3 3、使吸管管口沿管壁围绕移动。、使吸管管口沿管壁围绕移动。第30页思索下面问题：思索下面问题：让血红蛋白处于稳定让血红蛋白处于稳定pHpH范围内，维持结构和功范围内，维持结构和功效正常。效正常。1 1、在血红蛋白纯化整个过程中不停用磷酸缓冲、在血红蛋白纯化整个过程中不停用磷酸缓冲液处理目标是什么？液处理目标是什么？2 2、与其它蛋白质相比，血红蛋白有什么特点？、与其它蛋白质相比，血红蛋白有什么特点？这一特点对你进行血红蛋白分离有什么启示？这一特点对你进行血红蛋白分离有什

25、么启示？血红蛋白是有色蛋白，所以在凝胶色谱分离时能够经过血红蛋白是有色蛋白，所以在凝胶色谱分离时能够经过观察观察颜色颜色来判断什么时候应该搜集洗脱液。这使血红蛋来判断什么时候应该搜集洗脱液。这使血红蛋白分离过程白分离过程非常直观，大大简化了试验操作。非常直观，大大简化了试验操作。第31页 血红蛋白提取和分离程序包含：血红蛋白提取和分离程序包含：样品处理、粗分离、纯化和纯度判定样品处理、粗分离、纯化和纯度判定。样品处理：样品处理：经过洗涤红细胞、血红蛋白释放、经过洗涤红细胞、血红蛋白释放、离心等操作搜集到离心等操作搜集到血红蛋白溶液血红蛋白溶液，样品粗分离样品粗分离:透析透析去除分子量较小杂质去

26、除分子量较小杂质样品纯化：样品纯化：凝胶色谱法凝胶色谱法除去除去相对分子质量较大相对分子质量较大 杂质蛋白杂质蛋白纯度判定纯度判定:聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度判定。进行纯度判定。3 3、你能描述血红蛋白分离完整过程吗？、你能描述血红蛋白分离完整过程吗？第32页（三）（三）SDSSDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（选做）聚丙烯酰胺凝胶电泳（选做）2.2.2.2.试剂配制：试剂配制：试剂配制：试剂配制：判定血红蛋白纯度。判定血红蛋白纯度。1.目：3.方法步骤：（略）方法步骤：（略）第33页 观察处理血液样品离心后观察处理血液样品离心后是否分层，假如分层不显著，可是否分层，假如分层不显著，可

27、能是洗涤次数少、未能除去血浆蛋白原因。能是洗涤次数少、未能除去血浆蛋白原因。另外，离心速度过高和时间过长，会使另外，离心速度过高和时间过长，会使白细胞和淋巴细胞白细胞和淋巴细胞一同沉淀一同沉淀，也得不到纯净红细胞，影响后续血红蛋白提取纯度。，也得不到纯净红细胞，影响后续血红蛋白提取纯度。三、试验结果分析与评价三、试验结果分析与评价 1 1、你是否完成了对血液样品处理？你能描述处理、你是否完成了对血液样品处理？你能描述处理后样品发生了哪些改变吗？后样品发生了哪些改变吗？第34页2 2、你装填凝胶色谱柱是否有气泡产生？你色谱柱装、你装填凝胶色谱柱是否有气泡产生？你色谱柱装填得成功吗？你是怎样判断？

28、填得成功吗？你是怎样判断？1 1、因为凝胶是一个半透明介质，所以能够因为凝胶是一个半透明介质，所以能够在凝胶柱旁放一在凝胶柱旁放一支与凝胶柱垂直日光灯，检验凝胶是否装填得均匀。支与凝胶柱垂直日光灯，检验凝胶是否装填得均匀。2 2、加入大分子有色物质，、加入大分子有色物质，比如蓝色葡聚糖比如蓝色葡聚糖或红色葡聚糖或红色葡聚糖，观察色带移动情况。假如观察色带移动情况。假如色带均匀、狭窄、平整，说明凝色带均匀、狭窄、平整，说明凝胶色谱柱性能良好胶色谱柱性能良好。3 3、色谱柱出现色谱柱出现纹路或是气泡纹路或是气泡，轻轻敲打柱体以消除气泡，轻轻敲打柱体以消除气泡，消除不了时要重新装柱。消除不了时要重新装柱。第35页红色区带：均匀、狭窄、平整，伴随洗脱液迟缓流出；红色区带：均匀、狭窄、平整，伴随洗脱液迟缓流出；说明凝胶色谱柱装填得很成功、分离操作也正确说明凝胶色谱柱装填得很成功、分离操作也正确红色区带：歪曲、散乱、变宽，红色区带：歪曲、散乱、变宽，说明分离效果不好，说明分离效果不好，这与凝胶色谱柱装填相关。这与凝胶色谱柱装填相关。3 3、你能观察到蛋白质分离过程中红色区带移动吗、你能观察到蛋白质分离过程中红色区带移动吗？请描述红色区带移动情况，并据此判断分离效果？请描述红色区带移动情况，并据此判断分离效果？第36页