【经管励志】HPLC培训教程.pptx
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1、【经管励志】HPLC培训教程 制作人:制作者PPT时间:2024年X月目录第第1 1章章 HPLC HPLC简介简介第第2 2章章 HPLC HPLC实验准备实验准备第第3 3章章 HPLC HPLC定量分析定量分析第第4 4章章 HPLC HPLC应用拓展应用拓展第第5 5章章 HPLC HPLC实验技巧和问题解决实验技巧和问题解决第第6 6章章 HPLC HPLC实验总结实验总结 0101第1章 HPLC简介 HPLC的定义和发展高效液相色谱法(HPLC)是一种高效的分析技术,用于测定药物、食品、环境样品中的化学成分。自20世纪70年代问世以来,HPLC经历了长期的发展和优化,已经成为现代
2、实验室的必备技术之一。HPLC的优点和缺点高分离效能优点宽适用范围优点快速分析速度优点对样品纯度要求高缺点 0202第2章 HPLC实验准备 实验材料和设备在进行HPLC实验前,需要准备合适的流动相、安装和清洗色谱柱,以及校准和维护检测器。这些准备工作对于实验结果的准确性和重复性至关重要。样品制备和处理固相萃取、液-液萃取等提取和净化方法避免样品污染,控制样品量注意事项避光、低温、密封保存储存和运输 色谱柱的操作色谱柱的操作保护色谱柱保护色谱柱避免过载避免过载检测器的操作检测器的操作校准检测器校准检测器调整检测灵敏度调整检测灵敏度 实验操作流程泵的操作泵的操作调节流速调节流速检查泵的稳定性检查
3、泵的稳定性数据处理和分析实验完成后,需要对色谱图进行解读和分析,计算峰面积和峰高,评估结果的准确性和重复性。这些数据处理和分析的能力,是衡量HPLC实验人员专业水平的重要标准。0303第3章 HPLC定量分析 标准曲线的制备和绘制标准曲线是通过对一系列已知浓度的标准溶液进行分析,得到相应的响应信号,然后以浓度为横坐标,响应信号为纵坐标绘制曲线。制备标准曲线时,需要选择合适的检测器,确保其灵敏度和线性范围符合要求。绘制标准曲线时,要保证曲线的线性、最小二乘法拟合,以及相关系数大于0.99。校准方法和条件选择根据样品性质和分析要求,选择合适的校准方法,如线性校准、非线性校准等。方法选择校准条件包括
4、流动相组成、流速、柱温等,需要根据样品和检测器的要求进行选择。条件选择校准次数一般选择3-5次,以保证校准曲线的准确性和可靠性。次数选择 定量限和检测限的确定定量限是指样品中能被准确测定的最低浓度,而检测限是指样品中能被检测到的最低浓度。确定定量限和检测限需要通过实验进行,通常通过分析样品空白和标准曲线来确定。样品的测定和计算样品的测定主要包括样品处理、进样、分析等步骤。计算时,需要根据标准曲线和样品响应信号进行计算,得到样品的浓度。结果的报告和评价结果报告应包括样品名称、分析日期、浓度、相对标准差等基本信息。报告格式结果评价可以通过回收率、相对标准差等指标进行。评价方法需要对结果的不确定度进
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