《基因工程导论G》课件.pptx
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1、基因工程导论基因工程导论G G 制作人:时间:2024年X月目录目录第第1 1章章 基因工程导论基因工程导论G G第第2 2章章 基本技术基本技术第第3 3章章 应用研究应用研究第第4 4章章 总结总结 0101第第1章章 基因工程基因工程导论导论G 课程背景课程背景基因工程导论G课程旨在介绍基因工程的基本理论、技术和应用,帮助学生了解基因组学、生物信息学和基因工程领域的最新进展和研究方向。该课程适合生命科学、农业科学、医学等相关专业的本科生和研究生学习。课程目标课程目标通过学习本课程,学生将掌握基础的基因工程理论和技术,了解基因表达调控、基因编辑、基因治疗等前沿技术的应用,培养科学研究和工程
2、应用的能力。课程内容课程内容本课程主要包括基因工程的基础理论、技术和应用。具体涉及基本概念、基因表达调控、基因编辑、基因治疗、人工合成DNA等方面的内容。基本概念基本概念基因的定义和基本结构基因基因DNA的化学结构和功能DNADNARNA的种类和功能RNARNA DNA复制的原理和过程DNADNA复制复制0103蛋白质合成的机制和过程翻译翻译02RNA合成的机制和过程转录转录DNADNADNADNA克隆技术克隆技术克隆技术克隆技术DNADNA克隆技术的原理和步骤克隆技术的原理和步骤DNADNA克隆技术在基因工程中的应克隆技术在基因工程中的应用用基因编辑技术基因编辑技术基因编辑技术基因编辑技术基
3、因编辑技术的原理和步骤基因编辑技术的原理和步骤基因编辑技术在基因治疗中的基因编辑技术在基因治疗中的应用应用人工合成人工合成人工合成人工合成DNADNADNADNA人工合成人工合成DNADNA的原理和方法的原理和方法人工合成人工合成DNADNA在基因工程中的应在基因工程中的应用用基因工程技术基因工程技术PCRPCRPCRPCR技术技术技术技术PCRPCR技术的原理和步骤技术的原理和步骤PCRPCR技术在基因工程中的应用技术在基因工程中的应用基因表达调控基因表达调控基因表达调控基因表达调控基因表达调控是指细胞在不同的生理和病理状态下,调控基因表达调控是指细胞在不同的生理和病理状态下,调控基因的转录
4、和翻译水平,从而实现基因的正常表达和功能。基因的转录和翻译水平,从而实现基因的正常表达和功能。基因表达调控涉及到基因表达调控涉及到DNADNA序列、转录因子、启动子、转录后序列、转录因子、启动子、转录后修饰等多个层面,是基因工程研究的重要方向之一。修饰等多个层面,是基因工程研究的重要方向之一。转录因子转录因子转录因子的功能和分类定义定义转录因子的基本结构和作用结构结构转录因子的调控机制和调控网络调控调控 启动子的结构和功能定义定义0103启动子的调控机制和调控网络调控调控02启动子中的哪些元件参与调控元件元件RNARNARNARNA修饰修饰修饰修饰RNARNA修饰的种类和功能修饰的种类和功能R
5、NARNA修饰在疾病中的作用修饰在疾病中的作用蛋白质修饰蛋白质修饰蛋白质修饰蛋白质修饰蛋白质修饰的种类和功能蛋白质修饰的种类和功能蛋白质修饰在细胞信号传导中蛋白质修饰在细胞信号传导中的作用的作用表观遗传学表观遗传学表观遗传学表观遗传学表观遗传学的基本概念和方法表观遗传学的基本概念和方法表观遗传学在疾病研究中的应表观遗传学在疾病研究中的应用用转录后修饰转录后修饰RNARNARNARNA剪接剪接剪接剪接RNARNA剪接的机制和调控剪接的机制和调控RNARNA剪接在基因表达中的重要性剪接在基因表达中的重要性 0202第第2章章 基本技基本技术术 DNADNADNADNA提取提取提取提取DNADNA提
6、取是从生物体的细胞中提取出提取是从生物体的细胞中提取出DNADNA的技术。其目的是的技术。其目的是为了从样品中获得足够的为了从样品中获得足够的DNADNA片段来进行后续的分析。片段来进行后续的分析。DNADNA提取的步骤包括:细胞破碎、裂解、纯化、沉淀等。常见提取的步骤包括:细胞破碎、裂解、纯化、沉淀等。常见的的DNADNA提取方法包括:酚提取方法包括:酚/氯仿提取、离心纯化法、盐溶液氯仿提取、离心纯化法、盐溶液法等。法等。DNADNA提取方法提取方法优缺点、操作步骤酚酚/氯仿提取氯仿提取法法优缺点、操作步骤离心纯化法离心纯化法优缺点、操作步骤盐溶液法盐溶液法 PCRPCRPCRPCR技术技术
7、技术技术PCRPCR技术是一种体外扩增技术是一种体外扩增DNADNA的技术。其原理是利用的技术。其原理是利用DNADNA聚聚合酶在适宜的温度和缓冲液中,在目标合酶在适宜的温度和缓冲液中,在目标DNADNA的模板上进行的模板上进行DNADNA链的扩增。链的扩增。PCRPCR反应的步骤包括:变性、退火、延伸。反应的步骤包括:变性、退火、延伸。PCRPCR技术在医学、生物科研、法医学等领域有着广泛的应用。技术在医学、生物科研、法医学等领域有着广泛的应用。PCRPCR技术应用领域技术应用领域病毒、细菌、寄生虫等疾病的检测医学诊断医学诊断基因克隆、重组DNA构建、基因序列分析等生物科研生物科研犯罪嫌疑人
8、身份鉴定等法医学法医学 PCRPCR反应关键因素反应关键因素引物长度、GC含量、Tm值等引物的设计引物的设计纯度、浓度、杂质含量等模板模板DNADNA的质的质量量缓冲液、酶、dNTPs等PCRPCR反应体系反应体系 PCR扩增、限制酶切、连接、转化等重组重组DNADNA技术技术0103电击、热激、化学转化等转化转化02载体选择、启动子、选择标记等质粒构建质粒构建基因组编辑技术基因组编辑技术基因组编辑技术基因组编辑技术基因组编辑技术是指对细胞或生物体的基因组进行特定的基因组编辑技术是指对细胞或生物体的基因组进行特定的编辑和修改。其中,最为常见的基因编辑技术之一是编辑和修改。其中,最为常见的基因编
9、辑技术之一是CRISPR-Cas9CRISPR-Cas9系统。系统。CRISPR-Cas9CRISPR-Cas9技术原理是通过人工设技术原理是通过人工设计计RNARNA来导引蛋白来导引蛋白Cas9Cas9与靶与靶DNADNA发生酶切反应,从而实现基发生酶切反应,从而实现基因组编辑。因组编辑。CRISPR-Cas9CRISPR-Cas9系统的操作系统的操作sgRNA设计、靶DNA序列选择设计引物设计引物载体构建、细胞培养、蛋白纯化等Cas9Cas9蛋白表达蛋白表达和纯化和纯化细胞选择、转染方法、转染效率等细胞转染细胞转染 0303第第3章章 应应用研究用研究 基因诊断基因诊断基因诊断基因诊断PC
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