邻菲罗啉分光光度法测定铁.ppt

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1、（一）（一）邻菲罗啉分光光度法测定铁邻菲罗啉分光光度法测定铁陈睿婷陈睿婷E-mail:ruiting_仪器分析实验仪器分析实验1紫外紫外-可见分光光度法可见分光光度法 紫外紫外-可见分光光度法是研究物质分子在紫外可见分光光度法是研究物质分子在紫外-可见光区分子吸收可见光区分子吸收光谱的分析方法。光谱的分析方法。入射光入射光I0透射光透射光It吸光度：吸光度：2单光束紫外可见分光光度计主要部件单光束紫外可见分光光度计主要部件原理：原理：由光源发出的连续光谱，进入单色器经色散元件分光，由光源发出的连续光谱，进入单色器经色散元件分光，获得的单色光分别通过参比溶液和样品溶液，进行光强度（吸获得的单色光

2、分别通过参比溶液和样品溶液，进行光强度（吸收）的测定。收）的测定。0.575光源光源单色器单色器吸收池吸收池检测器检测器显示显示3（一）、掌握分光光度法测定铁的原理及方法（一）、掌握分光光度法测定铁的原理及方法（二）、通过测定铁的条件试验，掌握分光光度法测定铁的条（二）、通过测定铁的条件试验，掌握分光光度法测定铁的条件及方案的拟定。件及方案的拟定。（三）、掌握分光光度计的组成部分，操作注意事项和如何使（三）、掌握分光光度计的组成部分，操作注意事项和如何使用它实现对物质的检测。用它实现对物质的检测。（四）、掌握（四）、掌握7200型分光光度计的使用方法。型分光光度计的使用方法。一、实验目的一、实

3、验目的4Lamber-Beer定律定律 Lambert-Beer定定律律是是说说明明物物质质对对单单色色光光的的吸吸光光度度（A）与与吸吸光光物物质质的的浓浓度度（c）和和 液液层层厚厚度度（l）间间的的关关系系的的定定律律，是是光光吸吸收收的基本定律，是紫外的基本定律，是紫外-可见光度法定量的基础。可见光度法定量的基础。Sample(conc.C)Path length l入射光入射光 I0透射光透射光 It A Ecl浓度浓度（比尔定律）（比尔定律）厚度厚度(朗伯定律）朗伯定律）吸光系数吸光系数 吸吸光光度度5二、实验原理二、实验原理 在在pH=29的条件下，的条件下，Fe2+与邻菲罗啉（

4、邻二氮菲）生成很与邻菲罗啉（邻二氮菲）生成很稳定的橙红色的络合物，其反应如下：稳定的橙红色的络合物，其反应如下：此络合物的此络合物的logK稳稳=21.3，=11000。显色反应：使得无色物质通过反应生成有色物质，提高测显色反应：使得无色物质通过反应生成有色物质，提高测定灵敏度和选择性。定灵敏度和选择性。6邻菲罗啉邻菲罗啉-Fe2+配合物的紫外吸收光谱配合物的紫外吸收光谱510nm青绿色青绿色橙红色橙红色74Fe3+2NH2OHHCl4Fe2+N2+H2O+4H+2Cl-在显色前，首先用在显色前，首先用盐酸羟胺盐酸羟胺把把Fe3+还原为还原为Fe2+：测定时，测定时，控制溶液酸度在控制溶液酸度

5、在pH=29较适宜，酸度过高，反较适宜，酸度过高，反应速度慢，酸度太低，则应速度慢，酸度太低，则Fe2+水解，影响显色。通常在水解，影响显色。通常在pH值值5的缓冲液介质中测定。的缓冲液介质中测定。本试验中用本试验中用HAc-NaAc缓冲溶液缓冲溶液8三、仪器和试剂三、仪器和试剂7200型可见分光光度计、型可见分光光度计、pHS-3B型酸度计型酸度计仪器：仪器：铁标准溶液（铁标准溶液（CFe3+=10 g/ml）10%盐酸羟胺水溶液盐酸羟胺水溶液0.1邻菲罗啉水溶液邻菲罗啉水溶液1mol/L NaAc缓冲溶液缓冲溶液C(HCl)=0.1mol/L溶液溶液 C(NaOH)=0.4mol/L溶液溶

6、液试剂：试剂：9四、实验步骤四、实验步骤（一）条件试验（一）条件试验F 1、测定波长选择、测定波长选择：吸收曲线：吸收曲线(A-l l曲线曲线)的绘制，选择最大的绘制，选择最大吸收波长作为测定波长；吸收波长作为测定波长；F 2、反应时间选择、反应时间选择：邻菲罗啉铁配合物的稳定性，绘制：邻菲罗啉铁配合物的稳定性，绘制A-t曲线；曲线；F 3、显色剂用量、显色剂用量：显色剂浓度的影响，绘制：显色剂浓度的影响，绘制A-V曲线；曲线；F 4、pH选择选择：溶液酸度对配合物的影响，绘制：溶液酸度对配合物的影响，绘制A-pH曲线。曲线。10 1、吸收曲线的绘制、吸收曲线的绘制试样配制：试样配制：铁标液铁

7、标液CFe3+=10g/mL盐酸羟胺盐酸羟胺10%NaAc缓冲液缓冲液1mol/L邻菲罗啉邻菲罗啉0.1%参比溶液参比溶液0.00mL1mL5mL5mL试液试液5.00mL1mL5mL5mL吸收曲线（吸收曲线（A-）波长波长(nm)450460470480490500510吸光度吸光度A波长波长(nm)520530540550560570吸光度吸光度A用蒸馏水定容至用蒸馏水定容至50mL静置静置10分钟，测试分钟，测试11 2、邻菲罗啉配合物的稳定性、邻菲罗啉配合物的稳定性试样配制：与实验试样配制：与实验1一样，可共用。一样，可共用。铁标液铁标液CFe3+=10g/mL盐酸羟胺盐酸羟胺10%N

8、aAc缓冲液缓冲液1mol/L邻菲罗啉邻菲罗啉0.1%参比溶液参比溶液0.00mL1mL5mL5mL试液试液5.00mL1mL5mL5mL曲线（曲线（A-t）：）：时间时间t(min)515306090吸光度吸光度A检测波长：检测波长：510nm用蒸馏水定容至用蒸馏水定容至50mL0 2 4 6 10 15 45 6012 3、显色剂浓度影响、显色剂浓度影响试样配制：试样配制：铁标液铁标液CFe3+=10g/mL盐酸羟胺盐酸羟胺10%NaAc缓冲液缓冲液1mol/L邻菲罗啉邻菲罗啉0.1%试液试液10.00mL1mL5mLx mL曲线（曲线（c-A）邻菲罗啉邻菲罗啉0.1%0.10mL0.30

9、mL0.50mL1.00mL3.00mL5.00mL10.00mL吸光度吸光度A参比：蒸馏水；检测波长：参比：蒸馏水；检测波长：510nm静置静置10分钟，测试分钟，测试用蒸馏水定容至用蒸馏水定容至50mL13 4、溶液酸度对配合物的影响、溶液酸度对配合物的影响试样配制：试样配制：铁标液铁标液10g/mL盐酸羟盐酸羟胺胺10%pH调节调节溶液溶液邻菲罗啉邻菲罗啉0.1%pH值值吸光度吸光度110.00mL2mL5mL 0.4mol/LNaOH5mL210.00mL2mL5mL 0.1mol/LHCl5mL310.00mL2mL5mL NaAc缓冲缓冲5mL参比：蒸馏水作参比；检测波长：参比：蒸

10、馏水作参比；检测波长：510nm溶液反应溶液反应5分钟后测量，分钟后测量，加样顺序从左到右加样顺序从左到右，看溶液，看溶液pH值对配值对配合物稳定性和配位反应的速度的影响。合物稳定性和配位反应的速度的影响。用蒸馏水定容至用蒸馏水定容至50mL141、移液管的使用、移液管的使用常见移液管：标有常见移液管：标有温度和容量温度和容量(注意是注意是否标有否标有吹吹)用途：用途：准确移取一准确移取一定体积的液体定体积的液体操作：操作：洗涤洗涤(蒸馏水蒸馏水)、润洗润洗(3次次)、移液、移液、洗涤干净洗涤干净注意事项：注意事项：1、整个操作过程中，保持移液管的垂直；、整个操作过程中，保持移液管的垂直；2、

11、读数、读数时视线与凹液面平齐；时视线与凹液面平齐；3、每次移液后，锥形瓶壁用蒸馏水冲、每次移液后，锥形瓶壁用蒸馏水冲洗（洗瓶的头不要碰到瓶壁）洗（洗瓶的头不要碰到瓶壁）15容量瓶的使用容量瓶的使用注意事项：注意事项：1、使用前要检漏。加水至刻度，、使用前要检漏。加水至刻度，塞上瓶塞，倒立，检查是否漏水，塞上瓶塞，倒立，检查是否漏水，瓶塞旋转瓶塞旋转180，如上操作。，如上操作。2、使用过程中，防止瓶塞被混、使用过程中，防止瓶塞被混淆污染，不能随意放置桌上。淆污染，不能随意放置桌上。3、洗涤时洗至不挂水珠，再用、洗涤时洗至不挂水珠，再用蒸馏水润洗蒸馏水润洗3次，用铬酸洗液清次，用铬酸洗液清洗。洗

12、。4、读数时要用手前、读数时要用手前3指轻轻夹起指轻轻夹起容量瓶，使之自然垂直，再读数。容量瓶，使之自然垂直，再读数。5、容量瓶不可烘干，防止体积、容量瓶不可烘干，防止体积变化。变化。167200可见分光光度计可见分光光度计1、选择模式：、选择模式：mode 透光率（透光率（Transmittance）吸光度（吸光度（Absorbance）校正：校正：透光率模式透光率模式全黑比色皿：全黑比色皿：0%空白溶液：空白溶液：100%测试：测试：吸光度模式吸光度模式2、波长选择、波长选择转动波长旋钮转动波长旋钮每次测量前都要重新校正每次测量前都要重新校正。测试从低浓度到高浓度，测测试从低浓度到高浓度，测试前比色皿要用待测液试前比色皿要用待测液润洗润洗。17选择模式为透过率选择模式为透过率再按再按0%模式不变模式不变再按再按100%选择模式为吸光度选择模式为吸光度读取读数读取读数18数据处理数据处理用用excel作图作图电子图表班长收齐后压缩电子图表班长收齐后压缩发送到：发送到：ruiting_另外，实验报告每人一份，将图表打印出来附在末尾。另外，实验报告每人一份，将图表打印出来附在末尾。1920212223