本生阐述：ELISA方法如何检测带抗体的相关指标.docx

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1、本生阐述：ELISA方法如何检测带抗体的相关指标本生阐述：ELISA方法如何检测带抗体的相关指标在运用ELISA方法测定抗体方面，通常所用的方法称为间接法，也是目前 常用的方法，其原理：间接法首先用抗原包被于固相载体，这些包被的抗原必 须是可溶性的，或者至少是极微小的颗粒，经洗涤，加入含有被测抗体之标 本，再经孵育洗涤后，加入酶标记抗抗体，（对人的标本来说即加酶标抗人球蛋 白IgG、IgM）,再经孵育洗涤后，加底物显色，底物降解的量，即为欲测抗体 的量，其结果可用目测或用分光光度计定量测定。ELISA试剂盒操作步骤：1 .将抗原按5 ug/ml稀释于碳酸盐缓冲液（pH 9.6）, 100U1

2、/孔，4c过 夜。2 .次H PBS-T清洗4次（快1慢3,间隔5分钟）。3 .加2%BSA封闭室温lh, 200 ul /孔。4 .阳性对照从lOug/ml,做倍必稀释，待测血清从1： 50做倍比稀释，预 试验后确定稀释倍数及阳性对照的起始浓度及稀释数量（以可以做标准曲线为参 数），室温lh。5 . PBS-T清洗4次（快1慢3,间隔5分钟）。6 .加入1： 3000（不同公司有不同的推荐稀释度）PBS-T稀释的HRP标记的 山羊抗人IgG, 100 ul /孔，室温lh。7 . PBS-T清洗4次（快1慢3,间隔5分钟）。8 .显色，100口1 /孔，颜色变深后中止显色，2M硫酸在BIO-RAD酶标仪 上读数，可用ABTS, OPD, TMB等。ELISA试剂盒 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断 提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的 企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度 的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙 伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。