免疫学实验343008实验教学大纲.docx

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1、01.教学单位名称：生命科学学院02.实验中心名称：吉林大学国家级生物实验教学示范中心.03.课程名称：免疫学实验04.课程代码：34300805.课程类别：学科基础课06.课程性质：必修（生物科学、理科实验班）选修（生物技术、制药工程、药物制剂）.07.课程学时：3208.课程学分：109.面向专业：生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、理科实验班10 .实验课程的教学任务、要求和教学目的10.1 教学任务：使学生掌握和了解免疫学的主要研究方法与技术，巩固和加深基础理论知识， 提高分析、解决问题的能力和开拓创新能力，培养学生严肃、严密、严格、求实的 科学态度，为从事免疫学的研究和应用打下基

2、础。10.2 教学要求：要求学生掌握免疫学实验的基本操作和基本技能，特别是动物免疫、抗原抗体 结合反应、外周血淋巴细胞的分离，酶联免疫吸附等技术。10.3 教学目的：培养学生独立解决问题的能力，同时掌握和初步了解先进的免疫学技术和方法, 如免疫印迹、免疫共沉淀等，并且进行创新实验的设计。11 .学生应掌握的实验技术及实验能力通过本实验课程，学生应熟练掌握免疫动物的方法和程序，掌握抗体效价的测 定方法，掌握免疫组织化学试验、NK细胞功能检测、免疫沉淀实验、酶联免疫吸附 实验、免疫印迹实验、细胞因子检测技术及单克隆抗体制备的操作方法。12 .开设实验项目.多克隆抗体的制备项目，主要实验内容包括首先

3、进行抗原的制备和纯化，然后 用该抗原免疫Balb/c小鼠；免疫结束一周后摘眼球取血，进行免疫血清的分离和纯 化；最后用El isa法检测血清的抗体效价。淋巴细胞功能检测实验项目，主要实验内容包括从人外周血中分离淋巴细胞并 计数；用非特异性有丝分裂原或特异性抗原刺激T淋巴细胞使其向淋巴母细胞转化 并用MTT法对其进行检测；用溶血空斑实验检测特异性抗原免疫的小鼠脾细胞中的B 淋巴细胞产生抗体的能力。凝集实验（示教）项目，主要实验内容包括讲授相关理论知识；进行直接凝集 法检测血清抗体效价的示范教学，包括实验目的及意义、原理、材料和仪器、实验 步骤的讲授等。免疫组织化学实验项目，主要实验内容包括首先选

4、取特定的组织材料，然后进 行石蜡包埋组织、切片、组织切片的脱蜡至水、抗原修复、血清封闭、加一抗、加 二抗、显色、复染、脱水、透明、封片、镜检。NK细胞功能检测项目，主要实验内容包括取小鼠脾细胞，制备效应细胞并计数, 靶细胞计数，将效应细胞与靶细胞按照一定比例加板，37孵育2h,取上清，加入No字段名填写内容1课程名称免疫学实验2课程编号3430083实验项目名称补体介导的细胞毒实验4实验项目编号5网络实验06每组人数27计划学时数88实验性质选做9实验目的了解补体介导的细胞毒试验；掌握补体介导的细胞毒试验的操作方法10实验内容用抗Thy-1血清与小鼠胸腺细胞相互作用，可直接激活补体产 生膜攻击

5、复合体，引起靶细胞膜损伤，进而引起细胞死亡，台 盼蓝可使其染成蓝色，而活细胞不着色，通过显微镜计数算出 细胞死亡率，即补体介导的细胞毒作用的强度。11实验原理特异性抗体与细胞膜上相应抗原结合后，在补体的参与下，可 产生细胞膜损伤，细胞死亡；不带相应抗原的细胞仍然存活。 利用染料排斥实验判定淋巴细胞死活状态，活细胞不着色，具 有折光性，大小也正常。死细胞着色，体积增大。12实验类型1 .演示性口； 2.验证性口； 3.综合性回；4.设计性口； 5.研究 性口。13实验者层次本科生14实验仪器设备高速冷冻离心机8台，1007000 口!_可调式微量移液器20套， 酶标测定仪2台，摇床10台。15实

6、验套数2016开出时间20090917教学单位名称生命科学学院18教学单位编号111319实验单位名称吉林大学国家级生物实验教学示范中心20实验中心编号11130121实验地名称普通生物学基础实验室22实验地编号唐敖庆楼C区335室23一次性材料品名1640培养基125mL, 5nli注射器1个，EP管0. 2袋，大张滤纸0. 1 张，称量纸0. 2米，各个量程的枪头0.2袋，96孔板1块，Ba I b/c 小鼠2只，台酚蓝6. 5mg,抗Thy-1血清1.5mL24一次性材料94元25面向专业生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、理科实验班26实验项目卡制定人王迪于彬王飞27实验项目卡审核

7、人滕利荣No字段名填写内容1课程名称免疫学实验2课程编号3430083实验项目名称细胞因子检测技术4实验项目编号5网络实验06每组人数27计划学时数88实验性质选做9实验目的了解细胞因子检测技术的原理； 掌握细胞因子检测技术的操作方法10实验内容向CTLL-2细胞中加入倍比稀释的含有IL-2的待测样品及IL-2 标准品培养16-24小时，加入3H-TdR继续培养4-6小时,用B闪 烁计数仪测定3H-TdR的参入量，以检测待测样品中IL-2的含Xo11实验原理细胞因子在免疫应答过程中，细胞因子在免疫调节、炎症应答、 肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不 仅是基础免疫研究的有较手

8、段，在临床疾病诊断等方面同样具 有重要价值12实验类型1 .演示性口； 2.验证性口； 3.综合性回；4.设计性口； 5.研究 性口。13实验者层次本科生14实验仪器设备高速冷冻离心机4台，1007000 口!_可调式微量移液器20套， 闪烁计数仪5台，摇床10台，超纯水系统1套。15实验套数2016开出时间20090917教学单位名称生命科学学院18教学单位编号111319实验单位名称吉林大学国家级生物实验教学示范中心20实验中心编号11130121实验地名称普通生物学基础实验室22实验地编号唐敖庆楼C区335室23一次性材料品名EP管0.1袋，大张滤纸0.1张，称量纸0. 2米，1000|

9、iL枪头0.3 袋，96孔板2块，EMDM细胞培养基650mL,胎牛血清65mL, CTLL-2 细胞1个瓶,含IL-2的待测样品1.5mL24一次性材料117元25面向专业生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、理科实验班26实验项目卡制定人王迪于彬王飞27实验项目卡审核人滕利荣No字段名填写内容1课程名称免疫学实验2课程编号3430083实验项目名称酶联免疫吸附实验4实验项目编号5网络实验06每组人数27计划学时数48实验性质选做9实验目的掌握酶联免疫吸附实验的原理； 掌握酶联免疫吸附实验的操作方法10实验内容首先将已知的抗原或抗体吸附固定在固相载体表面，然后封 闭，加入酶标记的抗原或抗体

10、，最后直接加入酶反应底物和显 色剂进行显色反应。此抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤 法将液相中的游离成分洗除。11实验原理酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合，此种结合不会改变抗体 的免疫学特性，也不影响酶的生物学活性。利用颜色反应，将 酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来，使其 成为一种既特异又敏感的检测方法。12实验类型1 .演示性口； 2.验证性口； 3.综合性四；4.设计性口； 5.研究 性口。13实验者层次本科生14实验仪器设备酶标仪2台，恒温培养箱2台，洗板机4台，可调式微量移液 器20套，全波长酶标仪1台，自动洗板机1台。15实验套数2016开出时间20030917教学

11、单位名称生命科学学院18教学单位编号111319实验单位名称吉林大学国家级生物实验教学示范中心20实验中心编号11130121实验地名称普通生物学基础实验室22实验地编号唐敖庆楼C区335室23一次性材料品名96孔板2块，EP管0.1袋，100uL枪头0.3袋，1000 uL枪头0.1 袋,OVA （Ag） 65mg,血清抗体（一抗）0. 2支，HRP-Ab （二抗）0. 2 支，1%BSA65mL,包被缓冲液65mL,底物溶液（0PD）15mL24一次性材料76元25面向专业生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、理科实验班26实验项目卡制定人王迪于彬王飞27实验项目卡审核人滕利荣No字段名

12、填写内容1课程名称免疫学实验2课程编号3430083实验项目名称免疫沉淀(示教)4实验项目编号5网络实验06每组人数17计划学时数28实验性质选做9实验目的了解免疫沉淀实验的原理； 掌握免疫沉淀实验的操作方法10实验内容单向免疫扩散，双向免疫扩散，免疫电泳11实验原理原理：可溶性抗原与相应抗体在有电解质存在的情况下，按适 当比例所形成的可见沉淀物现象。据此现象设计的沉淀实验主 要包括絮状沉淀试验，环状沉淀试验和凝胶内的沉淀试验。12实验类型1 .演示性团；2.验证性口； 3.综合性口； 4,设计性口； 5.研究 性口。13实验者层次本科生14实验仪器设备摇床1台，天平1台，各量程可调式微量移液

13、器1套。15实验套数116开出时间20030917教学单位名称生命科学学院18教学单位编号111319实验单位名称吉林大学国家级生物实验教学示范中心20头验中心编勺11130121实验地名称普通生物学基础实验室22实验地编号唐敖庆楼C区335室23一次性材料品名毛细管3个，100uL枪头0.1袋，平皿1个，称量纸0.1米，镜头 纸3块，琼脂1.5g,抗体0.1支，抗原50mg24一次性材料61元25面向专业生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、理科实验班26实验项目卡制定人王迪于彬王飞27实验项目卡审核人滕利荣No字段名填写内容1课程名称免疫学实验2课程编号3430083实验项目名称免疫印迹

14、4实验项目编号5网络实验06每组人数27计划学时数88实验性质选做9实验目的了解免疫印迹实验的原理；掌握免疫印迹实验的操作方法10实验内容将含有目标蛋白的样品用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE)分离后，通过印迹技术将在凝胶中已经分离的条 带转移至硝酸纤维素膜上，并依次与特异性抗体和酶标二抗作 用，再加入能形成不溶性显色物的酶反应底物，显示特异性条 带。11实验原理将混合抗原样品在凝胶板上进行电泳分离，然后在固定化基 质膜的自然吸附力、电场力或其它外力作用下，使凝胶中的抗 原组份转移到印迹纸上，并且固相化，最后应用免疫覆盖液技 术，对抗原固定化基质膜进行检测和分析。12实验类型1

15、.演示性口； 2.验证性口； 3.综合性回；4.设计性口； 5.研究 性口。13实验者层次本科生14实验仪器设备电泳装置10套；电泳仪10台；107000 口1_可调式微量移液器 20套；电转移槽10台；摇床4台。15实验套数2016开出时间20090917教学单位名称生命科学学院18教学单位编号111319实验单位名称吉林大学国家级生物实验教学示范中心20实验中心编号11130121实验地名称普通生物学基础实验室22实验地编号唐敖庆楼C区335室23一次性材料品名30%聚丙烯酰胺溶液6. 5mL, EP管0.1袋,硝酸纤维素膜0.1米， 滤纸0.5米，200、1000 mL枪头各0.2袋，蛋

16、白Marker。. 2支， 血清抗体(一抗)0. 2支，HRP抗体(二抗)0. 2支，洗液 (PBS+O. 2%Tween) 65mL, PBS650mL, NBT 65 g, BCIP 65 Hg24一次性材料61元25面向专业生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、理科实验班26实验项目卡制定人王迪于彬王飞27实验项目卡审核人滕利荣No字段名填写内容1课程名称免疫学实验2课程编号3430083实验项目名称单克隆抗体的制备（示教）4实验项目编号5网络实验06每组人数17计划学时数28实验性质选做9实验目的了解单克隆抗体的制备原理；掌握制备单克隆抗体的操作方法10实验内容首先制备抗原并免疫动物

17、，从免疫动物脾细胞中获得能合成专 一性抗体的单克隆B淋巴细胞，应用细胞杂交技术使骨髓瘤细 胞与免疫的淋巴细胞融合，筛选得到杂交瘤细胞，并将其克隆。11实验原理利用瘤细胞的无线生长特性和B细胞产生抗体的特性，通过体 外的细胞融合技术和细胞培养技术获得并筛选能产生抗体的 杂交瘤细胞，从而得到针对抗原某种表位的特异的单克隆抗 体。12实验类型1 .演示性四；2.验证性口； 3.综合性口； 4.设计性口； 5.研究 性口。13实验者层次本科生14实验仪器设备高速冷冻离心机1台，10-1000 口1_可调式微量移液器1套，酶 标测定仪1台，细胞培养箱1台，手术器械1套，冰箱1台， 全波长酶标仪1台，高通

18、量自动洗板机1台，微波炉1台。15实验套数116开出时间20030917教学单位名称生命科学学院18教学单位编号111319实验单位名称吉林大学国家级生物实验教学示范中心20实验中心编号11130121实验地名称普通生物学基础实验室22实验地编号唐敖庆楼C区335室23一次性材料品名健康小鼠1只，1000 口1_枪头各0.2袋，30%聚丙烯酰胺溶液 6. 5mL,蛋白Marker。2支，血清抗体（一抗）0.2支，HRP-Ab （二 抗）0.2支，BCIP65 u g,抗原65mg, 96孔板2块，底物溶液 （0PD）12. 5mL24一次性材料89元25面向专业生物科学、生物技术、制药工程、药

19、物制剂、理科实验班26实验项目卡制定人王迪于彬王飞27实验项目卡审核人滕利荣No字段名填写内容1课程名称免疫学实验2课程编号3430083实验项目名称免疫共沉淀4实验项目编号5网络实验06每组人数27计划学时数88实验性质选做9实验目的了解免疫共沉淀的基本原理； 掌握免疫共沉淀技术的操作方法10实验内容首先在非变性条件下裂解细胞，完整细胞内存在的许多蛋白质 -蛋白质间的相互作用不被破坏。然后，将细胞裂解液与结合 有特异性抗体的琼脂糖A共孵育，特异性抗体将此蛋白及与此 蛋白相互的其它蛋白质同时沉淀下来。11实验原理首先形成：“目的蛋白-兴趣蛋白-抗兴趣蛋白抗体-Prote i n A 或G”，经

20、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，复合物又被分开，然后 经免疫印迹或质谱检测目的蛋白。12实验类型1 .演示性口； 2.验证性口； 3.综合性团；4.设计性口； 5.研究 性口。13实验者层次本科生14实验仪器设备高速冷冻离心机，10台；可调式微量移液器，20套；细胞培养 箱，2台；摇床，4台。15实验套数2016开出时间20090917教学单位名称生命科学学院18教学单位编号111319实验单位名称吉林大学国家级生物实验教学示范中心20实验中心编号11130121实验地名称普通生物学基础实验室22实验地编号唐敖庆楼C区335室23一次性材料品名转染试剂Lipofectamine 2000 65 u L

21、, DMEM培养基25mL,小牛 血清2.5mL,蛋白酶抑制剂0.1支,1000 uL枪头0.袋，Protein A或G0.2支，蛋白Marker 0. 1支，血清抗体（一抗）0.1支，HRP 抗体（二抗）0.1支，BCIP65Hg24一次性材料88元25面向专业生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、理科实验班26实验项目卡制定人王迪于彬王飞27实验项目卡审核人滕利荣No字段名填写内容1课程名称免疫学实验2课程编号3430083实验项目名称淋巴细胞表面标志物分析4实验项目编号5网络实验06每组人数27计划学时数88实验性质选做9实验目的学习小鼠脾细胞悬液的制备流程，掌握流式细胞仪检测细胞表

22、面分子的操作方法，观察脾淋巴细胞中各种表面标志物分子的 分布情况。10实验内容首先制备小鼠脾淋巴细胞悬液，细胞经固定后用带有两种不同 荧光标记的抗体分别识别CD4和CD8分子，最后用流式细胞仪 检测这两种细胞表面标志物分子在每个细胞表面的表达情况， 并以此对脾淋巴细胞悬液进行分群分析。11实验原理各种静止淋巴细胞在表面形态上没有明显的区别，但是不同的 淋巴细胞表面表达的标志物分子的种类是不同的，根据淋巴细 胞表面标志物的种类可以对淋巴细胞进行更加细化的分群分 析。12实验类型1 .演示性口； 2.验证性口； 3.综合性团；4.设计性口； 5.研究 性口。13实验者层次本科生14实验仪器设备流式

23、细胞仪2台，超净工作台10台，高速冷冻离心机4台， 移液器20套，培养箱2台，旋转混匀仪4台，手术剪和弯头 镶子20套。15实验套数2016开出时间20140317教学单位名称生命科学学院18教学单位编号111319实验单位名称吉林大学国家级生物实验教学示范中心20实验中心编勺11130121实验地名称普通生物学基础实验室22实验地编号唐敖庆楼C区335室23一次性材料品名EP管0.2裳，15ml离心管0.2袋，称量纸0.1米，500目尼龙 滤布0.1米，1000 mL枪头0. 5袋，100uL枪头0.5袋，小白鼠 1只。24一次性材料37元25面向专业生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、

24、理科实验班26实验项目卡制定人王迪于彬王飞27实验项目卡审核人滕利荣No字段名填写内容1课程名称免疫学实验2课程编号3430083实验项目名称设计实验4实验项目编号5网络实验06每组人数17计划学时数28实验性质选做9实验目的了解免疫印迹实验的原理； 掌握免疫印迹实验的操作方法10实验内容选取一种蛋白作为抗原，免疫动物获得其特异性抗体，并用此 抗体去检测组织或细胞中给蛋白的表达情况；应用一种病毒疫苗刺激外周血单个核细胞检测其上清中细胞 因子的分泌情况；检测肿瘤组织中某些蛋白质表达的变化。11实验原理具体实验原理根据所选设计实验而定。12实验类型1 .演示性口； 2.验证性口； 3,综合性口；

25、4.设计性四；5.研究 性口。13实验者层次本科生14实验仪器设备具体实险内容根据所选设计实验而定15实验套数具体实验内容根据所选设计实验而定16开出时间20030917教学单位名称生命科学学院18教学单位编号111319实验单位名称吉林大学国家级生物实验教学示范中心20实验中心编号11130121实验地名称普通生物学基础实验室22实验地编号唐敖庆楼C区335室23一次性材料品名具体实验内容根据所选设计实验而定24一次性材料具体实验内容根据所选设计实验而定25面向专业生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、理科实验班26实验项目卡制定人王迪于彬王飞27实验项目卡审核人滕利荣No字段名填写内容1

26、课程名称免疫学实验2课程编号3430083实验项目名称酶标仪检测多克隆抗体效价4实验项目编号5网络实验06每组人数17计划学时数28实验性质必做9实验目的了解酶标仪的工作原理；掌握酶标仪的操作方法和注意事项10实验内容介绍酶标仪的工作原理、应用领域，讲解酶标仪与分光光度计 的不同之处、使用的注意事项。以ELx800型和SYNERGY 4型酶 标仪为例，介绍数据读取、程序编辑、数据分析及导出功能。 让每一位学生实际操作酶标仪后，进行仪器操作考核。11实验原理在特定波长下，检测被测物的吸光值。主要应用于酶联免疫吸 附检测反应中检测吸光度值，其用途主要应用于ELISA试剂的 测定。12实验类型1 .

27、演示性口； 2.验证性四；3.综合性口； 4.设计性口； 5.研究 性口。13实验者层次本科生14实验仪器设备酶标测定仪2台15实验套数316开出时间20030917教学单位名称生命科学学院18教学单位编号111319实验单位名称吉林大学国家级生物实验教学示范中心20实验中心编号11130121实验地名称普通生物学基础实验室22实验地编号唐敖庆楼C区335室23一次性材料品名96孔板2块24一次性材料20元25面向专业生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、理科实验班26实验项目卡制定人王迪于彬王飞27实验项目卡审核人滕利荣LDH底物避光作用15min,用酶标仪测定570nm光密度值，以测定N

28、K细胞的杀伤活 性。补体介导的细胞毒实验项目，主要实验内容包括用抗ThyT 血清与小鼠胸腺细 胞相互作用，可直接激活补体产生膜攻击复合体，引起靶细胞膜损伤，进而引起细 胞死亡，用台盼蓝可以使其染成蓝色，而活细胞不着色，通过显微镜计数可以算出 细胞死亡率，即补体介导的细胞毒作用的强度。细胞因子检测技术项目，主要实验内容包括向CTLL-2细胞中加入倍比稀释的含 有IL-2的待测样品及IL-2标准品培养16-24小时，加入3H-TdR继续培养4-6小时, 用B闪烁计数仪测定3H-TdR的参入量，以检测待测样品中IL-2的含量。酶联免疫吸附实验项目，主要实验内容包括首先将已知的抗原或抗体吸附固定 在固

29、相载体（聚苯乙烯微量反应板）表面，然后封闭，加入酶标记的抗原或抗体， 最后直接加入酶反应底物和显色剂进行显色反应。此抗原抗体反应在固相表面进行， 用洗涤法将液相中的游离成分洗除。免疫沉淀（示教）项目，主要实验内容包括单向免疫扩散；双向免疫扩散；兔 疫电泳。免疫印迹项目，主要实验内容包括根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中 某种蛋白的方法。首先将含有目标蛋白的样品用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） 分离后，通过印迹技术将在凝胶中已经分离的条带转移至硝酸纤维素膜上，再将印 有蛋白质条带的硝酸纤维素膜（相当于包被了抗原的固相载体）依次与特异性抗体和 酶标第二抗体作用后，加入能形成不溶

30、性显色物的酶反应底物，使区带染色。阳性 反应的条带清晰可辨，并可根据SDS-PAGE时加入的分子量标准，确定各组分的分子 量。单克隆抗体的制备项目，主要实验内容包括首先制备抗原，免疫动物，从免疫 动物脾细胞中获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞。由于这种B淋巴细胞不 能在体外生长，而骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖，应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞 与免疫的淋巴细胞融合，筛选得到杂交瘤细胞，并将其克隆。应用单克隆细胞可制 备抗一种抗原决定簇的特异单克隆抗体。这种细胞继承两种亲代细胞的特性，它既 具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞在体外培养增殖永存的特性。免疫共沉淀项目，主要实验内容包括免

31、疫共沉淀是以抗体和抗原之间的专一性 作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。首先在非变性条件下裂解细胞， 这样，完整细胞内存在的许多蛋白质一蛋白质间的相互作用不被破坏。然后，将细 胞裂解液与结合有特异性抗体的琼脂糖A共孵育，特异性抗体能将此蛋白免疫沉淀 下来，而与此蛋白在体内结合的其它蛋白质同时也能被沉淀下来。这种方法常用于 测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用伙 伴。淋巴细胞表面标志物分析实验项目，主要实验内容包括首先制备小鼠脾淋巴细 胞悬液，细胞经固定后用带有两种不同荧光标记的抗体分别识别CD4和CD8分子， 最后用流式细胞仪检测这两种细胞表面标志物

32、分子在每个细胞表面的表达情况，并 以此对脾淋巴细胞悬液进行分群分析。设计实验项目，主要实验内容包括（1）选取一种蛋白质作为抗原，免疫动物获 得其特异性抗体，并用此抗体去检测组织或细胞中给蛋白的表达情况；（2）应用一 种病毒疫苗刺激外周血单个核细胞检测其上清中细胞因子的分泌情况；（3）检测肿 瘤组织中，某些蛋白质表达的变化。学生在以上项目中自选一项，通过自行查阅资 料、设计实验方案、填写设计实验申请书，由指导教师评阅。酶标仪检测多克隆抗体效价，主要实验内容包括介绍酶标仪的工作原理、应用 领域，讲解酶标仪与分光光度计的不同之处、使用的注意事项。以ELx800型和SYNERGY 4型酶标仪为例，介绍

33、数据读取、程序编辑、数据分析及导出功能。开设实验项目一览表实验项目编 号实验项目名称实验类型实验性质实验学时每组 人数首次开 出年月多克隆抗体的制备综合性必做122200309淋巴细胞功能检测实验综合性必做82200309凝集实验演示性选做21200309免疫组织化学实验综合性选做82200909NK细胞功能检测综合性必做42200309补体介导的细胞毒实验综合性选做82200909细胞因子检测技术综合性选做82200909酶联免疫吸附实验综合性选做42200309免疫沉淀演示性选做21200309免疫印迹综合性选做82200909单克隆抗体的制备演示性选做21200309免疫共沉淀综合性选做

34、82200909淋巴细胞表面标志物分 析综合性选做82201403设计实验设计性选做21200309酶标仪检测多克隆抗体 效价验证性必做2120030913 .实验教材或指导书或主要参考资料1）滕利荣等，生物学基础实验教程I （第三版），科学出版社，2008年；2）黎燕等，分子免疫学实验指南，化学工业出版社，2008年；3）朱立平 陈学清，免疫学常用实验方法，人民军医出版社，2000年；4）唐建民，医学微生物学及免疫学实验指导，人民军医出版社，2004年。14 .考核要求、考核方式及成绩评定标准14.1 考核要求：以培养学生的科学态度、科学思维和实验操作能力为前提，注 重训练学生的独立动手能力

35、、思考能力，发现问题、分析问题和解决问题的能力， 实验设计能力及创新能力，教师应及时、客观、公正、如实评价每名学生实验情况 及评阅试卷、实验报告和设计实验。14.2 考核方式：采取考核与考试相结合的方式综合评定实验成绩，按百分制方 式计分。14.3 成绩评定标准：根据生物基础实验教学中心制定的学生实验成绩考评方 法进行评定。实验习惯成绩，10%；预习考试成绩，10%;实验操作成绩，40%；实 验报告成绩，20%；设计实验成绩，20%o15 .执笔人：王迪讲师于彬讲师王飞讲师16 .制定日期17 .审核人滕利荣教授18 .审核日期19 .学院审定程序说明2013年10月10日接到学校通知后成立生

36、命科学学院实践教学大纲（2013版）” 修订专项工作组并进行前期筹备工作。2013年10月14日至2013年10月16日各门 课程梯队召开生命科学学院实践教学大纲（2013版）”修订工作会议，分配修订 任务。2013年10月21日前各门课程梯队提交生命科学学院实践教学大纲（2013 版）修订稿。2013年10月25日生命科学学院教学委员会召开第一次会议审议生 命科学学院实践教学大纲（2013版）修订稿并提出整改意见。2013年10月26日 至10月28日各门课程梯队按照“整改意见”进行整改。2013年10月30日生命科 学学院教学委员会召开第二次会议审定通过生命科学学院实践教学大纲（2013

37、版）。20 .学院审定日期No字段名填写内容1课程名称免疫学实验2课程编号3430083实验项目名称多克隆抗体的制备4实验项目编号5网络实验16每组人数27计划学时数128实验性质必做9实验目的首先进行抗原的制备和纯化，然后用该抗原免疫Balb/c小鼠； 免疫结束一周后摘眼球取血，进行免疫血清的分离和纯化；最 后用El isa法检测血清的抗体效价。10实验内容首先进行抗原的制备和纯化，然后用该抗原免疫Balb/c小鼠。 免疫结束一周后摘眼球取血，进行免疫血清的分离和纯化，最 后用El isa法检测血清的抗体效价。11实验原理当将抗原注射入实验动物体内时，受抗原刺激后在血液中产生 不同类型的抗体

38、，多克隆抗体中不同的抗体分子可以以不同的 亲和能力与抗原分子表面不同的部分一抗原决定簇相结合。12实验类型1 .演示性口； 2.验证性口； 3.综合性团；4.设计性口； 5.研究 性口。13实验者层次本科生14实验仪器设备高速冷冻离心机1台，1007000 uL可调式微量移液器20套， 酶标测定仪3台，摇床3台，眼科剪刀和镶子20套，全波长酶 标仪1台，高通量自动洗板机1台，微波炉8台。15实验套数2016开出时间20030917教学单位名称生命科学学院18教学单位编号111319实验单位名称吉林大学国家级生物实验教学示范中心20实验中心编号11130121实验地名称普通生物学基础实验室22实

39、验地编号唐敖庆楼C区335室23一次性材料品名EP管0.2袋，大张滤纸0.2张，称量纸0.1米，1000 mL枪头 0.3袋,96孔板1块,Balb/c小鼠5只，El isa试剂盒1盒, 1ml一次性注射器2支，弗式完全佐剂2ml,弗式不完全佐剂 3ml o24一次性材料85元25面向专业生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、理科实验班26实验项目卡制定人王迪于彬王飞27实验项目卡审核人滕利荣No字段名填写内容1课程名称免疫学实验2课程编号3430083实验项目名称淋巴细胞功能检测实验4实验项目编号5网络实验06每组人数27计划学时数88实验性质必做9实验目的了解淋巴细胞的分离和计数的实验原

40、理和操作方法；了解T淋 巴细胞和B淋巴细胞功能检测实验的原理和操作方法。10实验内容从人外周血中分离淋巴细胞并计数；用非特异性有丝分裂原或 特异性抗原刺激T淋巴细胞使其向淋巴母细胞转化并用MTT 法对其进行检测；用溶血空斑实验检测特异性抗原免疫的小鼠 脾细胞中的B淋巴细胞产生抗体的能力。11实验原理小鼠T细胞表面有ConA受体，T细胞在体外受ConA的刺激后能转 化为体积较大、代谢旺盛、且能进行分裂的淋巴细胞，以此测 定T细胞的功能。12实验类型1 .演示性口； 2.验证性口； 3.综合性团；4.设计性口； 5.研究 性口。13实验者层次本科生14实验仪器设备高速冷冻离心机10台，100700

41、0 |1L可调式微量移液器20套， 细胞计数板20块，C02培养箱4台，酶标测定仪2台，超净 台20个，摇床10台，闪烁计数仪5台，全波长酶标仪1台， 高通量自动洗板机1台。15实验套数2016开出时间20030917教学单位名称生命科学学院18教学单位编号111319实验单位名称吉林大学国家级生物实验教学示范中心20实验中心编号11130121实验地名称普通生物学基础实验室22实验地编号唐敖庆楼C区335室23一次性材料品名EP管0.2袋，1000 111_枪头0. 3袋，96孔板1块，Balb/c小鼠5 只，MTT 6. 5mg, Con A 35 g, DMSO 35mI,无菌纱布 0.1 包， 无酚红1640培养基650mL,胎牛血清65mL。24一次性材料116元25面向专业生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、理科实验班26实验项目卡制定人王迪于彬王飞27实验项目卡审核人滕利荣No字段名填写内容1课程名称免疫学实验2课程编号3430083实验项目名称凝集实验(示教)4实验项目编号5网络实验06每组人数17计划学时数28实验性质选做9实验目的了解凝集实验的原理；掌握凝集实验的操作方法。10实验内容讲授相关理论知识；进行直接凝集法检测血清抗体效价的示范 教学，包括实验目的及意义、原理