菊花组织培养和月季花药培养(课堂PPT).ppt
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1、课题课题1 1 菊花的组织培养菊花的组织培养1 通过必修课的学习,我们已经了解到通过必修课的学习,我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么,有没有不用种子来培育植物的方法呢?么,有没有不用种子来培育植物的方法呢?组织培养组织培养营养繁殖营养繁殖扦插扦插嫁接嫁接压条压条 2扦插扦插嫁接嫁接压条压条 3是指在人工培养是指在人工培养基上,离体培养植物的器基上,离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质官、组织、细胞和原生质体,并使其生长、增殖、体,并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。分化以及再生植株的技术。组织培养组织培养(一)植物组织培养的基本
2、过程(一)植物组织培养的基本过程4(1 1)基础知识)基础知识细胞离体细胞离体必要条件:必要条件:一定的营养物质、激素和其他一定的营养物质、激素和其他外界条件外界条件原理原理:细胞的全能性细胞的全能性植物细胞具有全能性,即已分化的植物细胞具有全能性,即已分化的细胞,具有使后代细胞形成完整个细胞,具有使后代细胞形成完整个体的潜能。体的潜能。原理:原理:定义:定义:生物体的每一个细胞都包含有该物种所生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因整个体所必需的全部基因5细胞的分化细胞的分化概念:概念:在个体发育中,相同细胞
3、的后代在形在个体发育中,相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程异的过程 结果:结果:形成不同的细胞和组织形成不同的细胞和组织原因:原因:基因在特定的时间和空间条件下的选基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果择性表达的结果6离体的植物离体的植物器官、组织、器官、组织、细胞细胞脱分化脱分化愈愈伤伤组组织织再分化再分化根根芽芽植植物物体体植物组织培养的基本过程植物组织培养的基本过程7愈伤组织愈伤组织8(二)影响植物组织培养的因素(二)影响植物组织培养的因素1.不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。例
4、如,烟草和胡萝卜的组织培养较为容易,例如,烟草和胡萝卜的组织培养较为容易,而枸杞愈伤组织的芽诱导就比较难。因此,而枸杞愈伤组织的芽诱导就比较难。因此,植物植物材料的选择直接关系到实验的成败。对于同一种材料的选择直接关系到实验的成败。对于同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短等也会植物材料,材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。影响实验结果。菊花的组织培养,一般选择未开菊花的组织培养,一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。花植株的茎上部新萌生的侧枝。92.离体的植物组织和细胞,对营养、环境等条件离体的植物组织和细胞,对营养、环境等条件的要求相对特殊,需要配制适宜的培养基。的要求相对
5、特殊,需要配制适宜的培养基。常用的一种培养基是常用的一种培养基是MSMS培养基。其主要成分包括:培养基。其主要成分包括:大量元素,如大量元素,如N N、P P、K K、CaCa、MgMg、S;S;微量元素,如微量元素,如B B、MnMn、CuCu、ZnZn、FeFe、MoMo、I I、CoCo;有机物,如甘氨酸、;有机物,如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素,以及蔗糖等。在配制好的烟酸、肌醇、维生素,以及蔗糖等。在配制好的MSMS培培养基中,常常需要添加植物激素。养基中,常常需要添加植物激素。与培养细菌的培养基有何不同?与培养细菌的培养基有何不同?10MS固体培养基成分及比例固体培养基成分及比例11微
6、生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,同,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。阅读课文,思考以下问题阅读课文,思考以下问题1.1.同微生物培养基相比,同微生物培养基相比,MSMS培养基的配方有哪些明显的不培养基的配方有哪些明显的不同?同?2 2、你认为组织培养过程中,成功的关键有哪些?这些步骤的、你认为组织培养过程中,成功的关键有哪些?这些步骤的适宜条件是什么?适宜条件是什么?组织的脱分化及愈伤组织的再分化。
7、组织的脱分化及愈伤组织的再分化。植物组织培养过程中,影响植物细胞脱分化、再分植物组织培养过程中,影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是植物激素,细胞分裂素与生长素之间化的最重要因素是植物激素,细胞分裂素与生长素之间的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。123.3.植物激素浓度、使用的先后顺序以及用量的比植物激素浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等,会影响实验结果。例等,会影响实验结果。植物激素中植物激素中生长素和细胞分裂素生长素和细胞分裂素是启动细胞是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。按照分裂、脱分化和再分化的关键性激素。按照不同的顺
8、序使用这两类激素,会得到不同的不同的顺序使用这两类激素,会得到不同的实验结果。实验结果。13当同时使用这两类激素时,两者用量的当同时使用这两类激素时,两者用量的当同时使用这两类激素时,两者用量的当同时使用这两类激素时,两者用量的比例比例比例比例决定着发决定着发决定着发决定着发育的方向,是愈伤组织、长根还是长芽。如为了促进育的方向,是愈伤组织、长根还是长芽。如为了促进育的方向,是愈伤组织、长根还是长芽。如为了促进育的方向,是愈伤组织、长根还是长芽。如为了促进芽器官的分化,应除去或降低生长素的浓度,或者调芽器官的分化,应除去或降低生长素的浓度,或者调芽器官的分化,应除去或降低生长素的浓度,或者调芽
9、器官的分化,应除去或降低生长素的浓度,或者调整培养基中生长素与细胞分裂素的比例。整培养基中生长素与细胞分裂素的比例。整培养基中生长素与细胞分裂素的比例。整培养基中生长素与细胞分裂素的比例。高高高高 利于根的分化,抑制芽的形成利于根的分化,抑制芽的形成利于根的分化,抑制芽的形成利于根的分化,抑制芽的形成 生长素生长素生长素生长素/细胞分裂素细胞分裂素细胞分裂素细胞分裂素 适中适中适中适中 利于促进愈伤组织的形成利于促进愈伤组织的形成利于促进愈伤组织的形成利于促进愈伤组织的形成 低低低低 利于芽的分化,抑制根的形成利于芽的分化,抑制根的形成利于芽的分化,抑制根的形成利于芽的分化,抑制根的形成4.除
10、了上述因素外,除了上述因素外,PH、温度、光照等条件也很重要。、温度、光照等条件也很重要。不同的植物对各种条件的要求往往不同。进行不同的植物对各种条件的要求往往不同。进行 菊花的菊花的组织培养,一般将组织培养,一般将PHPH值控制在值控制在5.85.8左右,温度控制在左右,温度控制在18-18-2222,并且每日用日光灯照射,并且每日用日光灯照射12h12h。14生长素生长素/细胞分裂素细胞分裂素高高 有利于根的分化、抑制芽的形成有利于根的分化、抑制芽的形成低低 有利于芽的分化、抑制根的形成有利于芽的分化、抑制根的形成15(一)制备(一)制备MSMS固体培养基固体培养基(二)外植体消毒(二)外
11、植体消毒(三)接种(三)接种(四)培养(四)培养(五)移栽(五)移栽(六)栽培(六)栽培二、实验操作二、实验操作16二、实验操作二、实验操作(一)制备(一)制备MSMS固体培养基固体培养基1 1、配置各种母液、配置各种母液2 2、配置培养基、配置培养基3 3、灭菌、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸高压蒸汽灭菌汽灭菌171 1、选材:、选材:菊花茎段,取生长旺盛的嫩枝菊花茎段,取生长旺盛的嫩枝(二)外植体消毒(二)外植体消毒2 2、消毒、消毒流水冲洗流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉,用软刷菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉,用软刷轻轻刷洗,刷洗
12、后在流水下冲洗轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗20min20min左右左右18 酒精处理酒精处理用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体积分数为积分数为7070的酒精中摇动的酒精中摇动2 23 3次,持续次,持续6 67s7s,立即将外植体取出,在无菌水中清洗,立即将外植体取出,在无菌水中清洗 消毒液处理消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入质量分数为放入质量分数为0.10.1的氯化汞溶液中的氯化汞溶液中1 12min2min,取出后在无菌水中至少清洗,取出后在无菌水中至少清洗3 3次,漂净次,漂净消
13、毒液消毒液19(三)接种(三)接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子,接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子,接种室消毒是至关重要的。用室消毒是至关重要的。用7070的酒精喷雾使空的酒精喷雾使空气消毒,气消毒,酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射线照射2020分钟分钟1 1、接种室消毒、接种室消毒2 2、无菌操作要求、无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成,每次使用器械后,操作要在酒精灯火焰旁完成,每次使用器械后,都需要用火焰灼烧灭菌,接种后立即盖好瓶盖。都需要用火焰灼烧灭菌,接种后立即盖好瓶盖。2021(四)培养(四)培养接种后的锥形瓶最好放在接种后的锥形瓶最
14、好放在无菌箱无菌箱中培养,培养期中培养,培养期间应定期消毒。培养温度控制在间应定期消毒。培养温度控制在18-2218-22,并且脱,并且脱分化形成愈伤组织后,每日用日光灯光照分化形成愈伤组织后,每日用日光灯光照12h12h。22(五)移栽(五)移栽移栽生根的菊花试管苗之前,应先打开培养瓶移栽生根的菊花试管苗之前,应先打开培养瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日的封口膜,让试管苗在培养间生长几日1 1、打开封口膜、打开封口膜2 2、清洗转移、清洗转移用流水清洗根部的培养基,用流水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间生活一段
15、时间23(六)栽培(六)栽培3 3、移栽、移栽珍珠岩:固体基质型,含水量高、蓄水性强、珍珠岩:固体基质型,含水量高、蓄水性强、透性好,适合栽培透性好,适合栽培幼苗长壮后,移栽到土壤中幼苗长壮后,移栽到土壤中幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的生长情况,幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花适时浇水、施肥,直至开花2425课堂课堂2 2 月季的花药培养月季的花药培养261 1、被子植物定义:、被子植物定义:凡是种子有果皮包被着,凡是种子有果皮包被着,胚珠有子房壁包被着的植物,就叫做被子植物胚珠有子房壁包被着的植物,就叫做被子植物一、被子植物和裸子植物一、被子植物和裸子植物
16、2 2、裸子植物定义:、裸子植物定义:凡是胚珠裸露,外面没有凡是胚珠裸露,外面没有子房壁包被,种子外面没有果皮包被的植物称子房壁包被,种子外面没有果皮包被的植物称为裸子植物为裸子植物实例:玉米、大豆、梨、杏实例:玉米、大豆、梨、杏实例:松、杉、柏实例:松、杉、柏272829303 3、花的结构、花的结构314 4、花的作用、花的作用被子植物的被子植物的有性生殖有性生殖是在是在花花里进行的,里进行的,雌蕊雌蕊和雄蕊和雄蕊是进行是进行有性生殖的主要部分有性生殖的主要部分二、二、被子植物花粉粒的形成被子植物花粉粒的形成花丝花丝花药:花药:囊状结构,内有很多花粉粒囊状结构,内有很多花粉粒1 1、雄蕊的
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