“重组质粒的转化、提取及酶切分析”综合性实验在医学检验专业分子诊断学教学中的实施.docx

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1、“重组质粒的转化、提取及酶切分析”综合性实验在医学检验专业分子诊断学教学中的实施 摘要：本文从试验设计思路、试验实施、试验效果、试验体会等方面对“重组质粒的转化、提取及酶切分析”综合性试验在医学检验专业分子诊断学教学中的实施进行阐述，并针对试验教学中存在的问题，提出了详细的解决措施。 关键词：质粒；综合性试验；医学检验；分子诊断；教学 中图分类号：G642.4 文献标记码：A 文章编号：1674-932435-0273-02 分子诊断学是分子生物学与检验诊断学的结合，是目前医学检验各学科中发展最为快速的学科之一。分子生物学是跨越生物、医学、药学的一门学科，驾驭分子生物学的基础理论和基本技术已成

2、为医学专业学生所必需具备的条件，也是其今后学习、工作和科研的基础1-2。综合性试验能有效地把所学的学问联系起来，有助于学生对学问的系统理解和驾驭，培育学生综合分析、解决问题的实力，为以后从事科研工作打下基础。为此，依据试验改革的趋势，结合试验室条件，笔者在医学检验专业分子诊断学教学中实施了“重组质粒的转化、提取及酶切分析”综合性试验，取得了良好的教学效果。 一、试验设计思路 “重组质粒的转化、提取及酶切分析”综合性试验主要包括重组质粒的转化、重组质粒的提取和DNA限制性内切酶分析三个部分。先在CaCl2低渗溶液中制备大肠杆菌感受态细胞，将人Bcl-2重组质粒转化DH5扩增菌，转化后在含氨苄青霉

3、素的培育基上进行筛选，以获得含重组质粒的大肠杆菌，再用碱裂解法分别此大肠杆菌中的重组质粒DNA，提取质粒DNA，所制备的质粒DNA作为限制性内切酶EcoR的酶切底物，最终经过酶切、琼脂糖凝胶电泳后，用紫外分析仪视察重组质粒DNA的限制性内切酶图谱。 二、试验组织实施 “重组质粒的转化、提取及酶切分析”综合性试验所涉及的相关内容多、学问面广、试验过程长，并且每一个环节的都关系到试验的成败，任一环节出现错误，都将导致整个试验的失败。为解决这些状况，首先，试验前学生应当查阅相关资料，预习并熟识整个试验的目的、原理、器材和试剂、操作步骤和留意事项，记录下预习过程中遇到的疑难问题，带着问题听讲，跟着老师

4、的思路，边听边思索，避开试验过程中盲目操作；其次，试验教学过程中通过多媒体课件讲解、试验视频播放、老师现场示范，解决同学们预习过程中遇到的问题，让同学们充分理解和驾驭试验过程中的操作要领；再次，学生在试验过程中要严格根据试验指导和试剂盒说明书加入试剂，留意每个步骤的反应时间，留意试验的留意事项，老师应在旁督促和订正学生试验过程中的错误操作，协助学生顺当完成试验。最终，老师在试验结束后分析试验结果，解决学生在试验过程中遇到的问题，布置一些富有探究性的问题，启发学生的思维，激发学生的爱好。 三、试验效果 “重组质粒的转化、提取及酶切分析”综合性试验相对于其他分子生物学试验来说，耗时长，运用的试剂盒

5、和仪器设备多，由于试验的整个过程都是由学生自己独立完成的，因此，学生们热忱很高、主动参加，仔细对待试验的每一环节，在试验中赐予学生更多独立完成试验的机会，调动了学生的自主能动性和试验操作主动性，试验效果明显比传统的验证性试验效果好。由于“重组质粒的转化、提取及酶切分析”综合性试验涵盖了DNA重组技术、核酸的分别与纯化技术、DNA的酶切及电泳技术，是一个多方位的综合性试验，使学生能够融会贯穿多学科学问，全方位、多维度进行思索，极大地提高了学生综合学问的运用实力。同时，还培育了同学独立动手的实力、相互协作的精神、严谨的科学看法，达到了综合性试验训练的目的。 四、教学体会 1.试验意义。“重组质粒的

6、转化、提取及酶切分析”综合性试验要求学生驾驭重组质粒转化技术、质粒提取和纯化技术、限制性内切酶酶切技术和琼脂糖凝胶电泳技术。试验过程中涉及到的学问点有：重组质粒DNA的性质、转化的条件、提取过程中各种试剂的作用、限制性内切酶酶切的条件和酶切产物的琼脂糖凝胶电泳等。学生在老师的引导下，将相关联的试验内容有机地结合起来，侧重于多方面理论学问和多种操作技能的综合运用，极大地调动了学生学习的自主能动性，提高了学生分析问题、解决问题的实力。 2.存在的问题与策略。试验课前学生不预习的现象普遍存在，上课时等着老师介绍试验原理、试验试剂和器材、操作步骤和留意事项，之后根据试验课上的操作照做，而不是带着问题，

7、思索后操作。课前不预习主要存在以下几种问题：一是不了解试验原理，不明白为什么要这样进行试验；二是试验步骤不明白，经常出现加错试剂、遗弃须要的产物、奢侈时间、结果不志向等现象；三试验过程中遇到与理论现象不符合的状况不知道该如何分析，经常拿着试验结果问老师对不对，而不擅长自己分析结果。长期下来，造成一些学生对试验课持应付了事的看法，试验课主动性不高。针对这些状况，要求学生试验课前预习相关的学问，结合所学学问、试验指导书及查阅资料，弄懂试验原理与操作步骤。带着问题去试验，避开机械地照书做。“重组质粒的转化、提取及酶切分析”综合性试验难度大，操作烦琐，包含了大量学问，学生仅靠老师试验课中有限的讲解无法

8、完全驾驭试验所涉及的学问和领悟试验的操作要领，而学生对学问的把握程度干脆影响到试验课的教学质量。近年来，网络技术和多媒体技术在教学中的应用越来越普遍，渐渐成为趋势。针对试验课内容多、操作性强等特点，可以制作演示与模拟于一体的多媒体课件，结合文字、图像、声音、动画和视频等展示试验课内容和试验操作步骤。学生可以通过试验演示与虚拟操作加深试验印象，削减试验过程中错误的发生，避开不知道如何运用试验仪器和不明白试验内容状况的发生。与传统试验相比，利用多媒体课件教学可以使学生直观了解试验原理、试剂与器材、操作步骤和试验现象，使其更有效地驾驭试验内容和操作要点。通过多媒体课件，有利于学生对试验内容的理解，有

9、助于学生更好地驾驭试验内容、操作要点和试验现象，提高试验课教学质量。 参考文献： 1高利臣，肖璐，冯涛.分子生物学试验教学改革的几点思索J.试验室探讨与探究，2022，29：101-102. 2武慧敏，郑晓珂，黄睿，等.中医院校生物化学与分子生物学课程连接的探究探讨J.中医药管理杂志，2022，20：56-57. 3韩华，王岩.有效培育学生创新素养的途径探讨J.试验室科学，2022，14：7-9. 基金项目：广东省高等教化学会试验室管理专业委员会探讨基金项目；全国高等学校特色专业建设点-医学检验；广东省高等学校试验教学示范中心-医学检验；广东省高等院校精品课程-临床生物化学及检验；广东医学院教化教学探讨课题 作者简介：李江滨，男，副教授，硕士，主要从事医学专业教学与教化探讨工作。 第6页 共6页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页