维生素C和维生素E与蛹虫草联用对大鼠免疫调节的影响.docx

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1、维生素C和维生素E与蛹虫草联用对大鼠免疫调节的影响 摘 要：蛹虫草具有抗疲惫、提高机体免疫力的作用，维生素E具有抗氧化，清除体内氧自由基，免疫调整的作用。维生素C具有强还原性，与维生素E在免疫调整上具有正向协同作用。该探讨运用8周递增负荷跑台训练建立大鼠运动疲惫模型，分为空白比照组、运动比照组、运动+蛹虫草组、运动+蛹虫草+维生素C+维生素E组4组。运动第8周后，取全血提取总RNA反转录cDNA，采纳qRT-PCR检测IL-2的表达量，并做qRT-PCR的电泳图检测IL-2的片段大小。结果表明，8周大鼠递增负荷运动后CKY组的IL-2表达量与CK组相比显著降低，YCC组表达量接近相同，YCE组

2、表达量明显增高。依据电泳图显示，各组IL-2的条带大小均与内参基因GAPDH大小一样，且没有明显的引物二聚体。维生素C和维生素E与蛹虫草联用能促进IL-2的表达，维生素C和维生素E对蛹虫草的免疫调整是正向协同作用。 关键词：IL-2；蛹虫草；维生素C；维生素E；免疫调整 中图分类号 R29 文献标识码 A 文章编号 1017-773114-0048-03 Abstract：Cordyceps militaris has anti-fatigue， improve the body immunity， vitamin E has antioxidant， remove the body free

3、 radicals， immune regulation， vitamin C has a strong reduction， and vitamin E in the immune regulation has a positive synergistic effect. Blank control group， exercise control group ， exercise + Cordyceps militaris group， exercise + Cordyceps militaris + vitamin C + vitamin E group 4 groups. The exp

4、ression of IL-2 was detected by qRT-PCR and the size of IL-2 was detected by electrophoretic pattern detection. The results showed that the expression of IL-2 in CKY group was significantly lower than that in CK group， and the expression level of YCC group was similar to that of YCC group. YCE group

5、 expression was also significantly increased. According to the electrophoregram， the bands of IL-2 in each group were consistent with the size of GAPDH， and there was no obvious primer dimer. Vitamin C and vitamin E combined with Cordyceps militaris can make IL-2 expression up-regulated， vitamin C a

6、nd vitamin E on the immune regulation of Cordyceps militaris is a positive synergistic effect. Key words：IL-2；Cordyceps militaris；Vitamin C；Vitamin E；Immunomodulation 免疫功能低下是一種病理特征，人体免疫力就是我们的身体在面对外来的侵袭时所能抵挡其侵害的实力。在机风光对外来感染时，免疫细胞产生大量氧自由基抵挡感染。同时，大量的氧自由基也损害了自身的免疫细胞1。比如无处不在的细菌、病毒向人体进攻时，身体反抗实力的好与坏干脆确定了是否

7、会被感染。免疫功能降低的症状包括：常常发生伤风和流感，常常治愈的寄生虫感染又复发。探讨发觉，很多疾病都与过氧化脂质的产生有关，免疫功能降低，抗氧化养分素，如维生素C、维生素E等有消退自由基的抗氧化作用，抗氧化维生素对免疫调整可以弥补和提高机体的免疫反应2。同时一些抗氧化素有协同作用。 蛹虫草，又名北冬虫夏草、北虫草3，其主要成分是虫草多糖，具有提高免疫力，延缓苍老、扶正固体、爱护心脏、肝脏、抗癌的作用。蛹虫草提取物具有调整小鼠体内免疫调整作用，可减轻内毒素或类似物质引起的炎症，具有肯定的免疫爱护作用4。国内外探讨证明，蛹虫草的机制主要归功于免疫调整3-5。 维生素E是生育酚和三烯生育酚的总称，

8、是一种脂溶性维生素，具有很强的抗氧化和清除氧自由基的效果2。维生素E在细胞内的主要作用是抗氧化，防止细胞内和膜内的不饱和脂肪酸被氧化而破坏，保证其完整性6。维生素E在正常的免疫功能中发挥作用，尤其是对于淋巴细胞，这一作用已经在动物模型和美国老年人群中得到证明7。 维生素C有L型和D型2种异构体，只有L型具有生理功能，还原型和氧化型都具有生理活性8。维生素C是一种水溶性维生素，最重要的是强还原性的分子特征，并与维生素E产生协同作用，降低脂质过氧化、超氧化物歧化酶的生成，爱护超氧化酶活性，清除氧自由基，提高机体免疫功能8。 通过探讨发觉，具有有规律的中小强度运动习惯的人群寿命和生活质量优于很少或者

9、不运动人群9。然而，由于大强度运动导致的运动性免疫机能失衡，长期大强度运动人群，尤其在中老年阶段仍进行大强度训练可能降低生活质量和缩短寿命9。在运动免疫领域，由运动员高负荷运动导致的T淋巴细胞免疫失衡和Th1/Th2免疫失衡的抑制，在免疫水平的维持引起过度的留意10-11。 白细胞介素2：分子量为1.5万的糖蛋白，对T细胞激活及生长起着重要作用12。IL-2是参加免疫应答的重要细胞因子，并参加抗肿瘤效应和移植排斥反应13。IL-2可将B细胞分化成可产生活化细胞免疫球蛋白的细胞14。 本探讨采纳跑台递增负荷运动建立大鼠疲惫模型，通过qRT-PCR检测II-2的表达量及电泳图检测IL-2片段的大小

10、进行结果分析。 1 材料与方法 1.1 供试材料 1.1.1 试验动物 24只四周龄SD雌性大鼠，由北京通利华试验动物技术有限公司供应，合格证：SCXK。 1.1.2 仪器与试剂 LDZM立式压力灭菌器：由上海申安医疗器械厂生产；实时定量PCR仪：设备型号FQD-96A；PCR仪：型号GD35-TP600；电泳仪：由北京市六一仪器厂生产，型号DYY-6C型；冷CCD凝胶成像分析仪：型号GL；IL-2总RNA的提取试剂盒，维生素C泡腾片：拜耳医药保健公司，规格：1010mg/片，批号H20226946；维生素E软胶囊：浙江医药股份有限公司，规格：101mg/粒，批号：H33020227；蛹虫草：

11、湖北众菇善年生物技术有限公司。 1.2 方法 疲惫型大鼠模型的建立，疲惫是指机体生理过程不能持续其机能在肯定水平上，或不能维持特定的运动强度13。在探讨运动疲惫和复原过程中，疲惫是探讨运动疲惫发生和复原的先决条件。大鼠疲惫模型的建立主要是以跑步机为训练模式。依据自身试验探讨的须要，建立不同时期的疲惫模型。大部分受训是7周递增负荷跑步机运动模式，大鼠运动负荷递增，第7周训练起先力竭。力竭推断标准主要有大鼠跟不上试验预定速度，表现为臀部压在笼具后壁，后肢随转动皮带后拖达30s以上；对连续的光、声、机械刺激无反应；出现呼吸深急，精神乏累，俯卧位垂头，刺激后无反应等行为特征10。值得留意的是，在实际建

12、模过程中，依据自己的试验详细状况适当调整运动负荷或运动时间。本探讨参照上海体育学院王茹，陈佩杰15等的跑台运动模型进行训练设计。详细的跑台训练负荷见表1。 将买回来的大鼠放在饲养室饲养7d，让其适应饲养室的环境。7d后根据本试验要求随机分成4个组，每组6只。空白比照组：置于笼中自然生长，不参加跑台训练，在其他组训练完后同时赐予与蛹虫草组相同剂量的0.9%生理盐水；训练比照组：本试验设计的运动疲惫模型，进行跑台训练，并在跑台训练后即刻灌胃与蛹虫草组相同剂量的0.9%生理盐水；训练+蛹虫草组：本试验设计的运动疲惫模型，进行跑台训练，并在每次跑台训练后即刻灌胃蛹虫草水溶液；训练+蛹虫草+VC+VE组

13、：本试验设计的运动疲惫模型，进行跑台训练，并在每次跑台训练后即刻灌胃蛹虫草+VC+VE水溶液，自由进食饮水。 经过8周的递增负荷训练建立疲惫模型，第九周从大鼠眼眶后静脉从取其全血。将同一组的大鼠全血各取1mL于一个新的离心管中充分混合，提取总RNA。反转录成cDNA，放在-20备用。应用Premier Premier 5.0软件设计引物，引物由上海生工生物工程股份有限公司合成。 2 结果与分析 2.1 引物质量检测 图1中2、3、4、5泳道是GAPDH内参基因，6、7、8、9泳道是IL-2基因。从PCR琼脂糖凝胶电泳图中可以清楚的看出IL-2与内参条带大小都为单一的条带，无明顯引物二聚体，说明

14、引物质量牢靠，可用于qRT-PCR探讨。 2.2 qRT-PCR检测结果 从图2可以看出，以CK组的IL-2的表达作为参照，CKY组的IL-2表达倍数显著削减；YCC组的IL-2表达倍数比CK组IL-2的表达倍数略高；YCE组的IL-2表达倍数比CK组IL-2的表达倍数显著增高。 3 探讨 长期坚持低中等强度的运动会提高机体健康、生活质量，延长寿命等。但是大强度的运动会导致运动性机体免疫平衡失调，降低机体健康水平。低等强度训练初期运动有助于大鼠免疫力的提高，各运动组大鼠体重及其饮食量与饲养时间成正相关增长。但是随着运动负荷的增大，破坏了运动组大鼠免疫系统的平衡，在没有赐予任何提高机体免疫力药物

15、的CKY组大鼠出现一系列如体重增长缓慢、进食量削减、毛发凌乱、打喷嚏、对外界刺激敏感性降低等现象。大强度运动后会造成大鼠免疫力的减弱，蛹虫草基本可以反抗大鼠大强度运动后疲惫引起的免疫调整实力降低，而维生素C和维生素E与蛹虫草联用不仅可以反抗大鼠高负荷运动疲惫引起的免疫调整实力低下，还能在肯定程度上增加大鼠的免疫调整实力。 参考文献 1杨志蕃，延娟，刘军，等.不同维生素免疫调整作用在鼠疟模型中的试验视察J.微生物学杂志，2022，12：75-79. 2于波.维生素E对机体免疫功能的影响J.赤峰学院学报，2022，35：195-196. 3樊慧婷，林洪生.蛹虫草化学成分及药理作用探讨进展J.中国中

16、药杂志，2022，8：2549-2552. 4蒋志涛，戴国梁，潘金火，等.蛹虫草化学成分及药理作用探讨进展J.现代中药探讨与实践，2022，5：80-83. 5Hwan H . L .， SeLki L .， Hyosun C.， et aL. Anti-cancer effect of Cordyceps miLitaris in human coLorectaL carcinoma RKO ceLLs via ceLL cycLe arrest and mitochondriaL apoptosisJ.DARU JounaL of PharmaceuticaL Sciences，2022，

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18、6. 9罗贝贝，陈佩杰.运动免疫学探讨的现状与展望J.上海体育学院运动科学学院，2022：273-27. 10刘倩.蛹虫草对运动疲惫大鼠Th1/Th2免疫平衡影响的探讨D.济南：山东体育学院，2022. 11田雪文，刘倩，黄超，等.蛹虫草对过度运动大鼠T淋巴细胞免疫抑制的调整探讨J.山东体育学院学报，2022，6：41-45. 12赵定亮，单风平.白细胞介素-2最新探讨进展J.微生物学杂志，2022，8：77-82. 13赵可伟.运动对白细胞介素-1、白细胞介素-2与白细胞介素-6影响的探讨进展J.首都体育学院学报，2022，5：43-67. 14翟志敏.IL-2对免疫激活和免疫耐受的双向调整作用J.中国药理学通报，2022，29：319-322. 15王茹，陈佩杰.CD 4+CD 25+调整性T细胞在大鼠递增负荷过度训练中的表达及其免疫调整功能J.上海体育学院学报，2022，34：49-56. 第9页 共9页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页